非水電位滴定法測定阿戈美拉汀工作對照品的含量

2012-01-10 03:35:34聶忠莉王曉玲李長生唐雪楓陳小寧

成都大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版) 2012年3期

聶忠莉,王曉玲,李長生,唐雪楓,陳小寧

(1.成都大學(xué)生物產(chǎn)業(yè)學(xué)院,四川成都 610106;2.成都欣捷高新技術(shù)開發(fā)有限公司,四川成都 610041)

0 引言

阿戈美拉汀(Agomelatine),化學(xué)名為N-[2-(7-甲氧基萘-1-基)乙基]乙酰胺,是褪黑激素激動劑,兼有拮抗5HT2c受體作用,它是第一種褪黑激素類抗抑郁藥,能有效治療抑郁癥,改善睡眠參數(shù)和保持性等功能[1-2].阿戈美拉汀為白色或類白色結(jié)晶性粉末,幾乎不具吸濕性,它在甲醇中易溶,在乙醇、乙酸乙酯中溶解,在水中幾乎不溶,在熱水中極微溶解.我們在研制本藥過程中,無法從法定機(jī)構(gòu)購買獲得阿戈美拉汀對照品(USP[3]和 EP[4]均未銷售阿戈美拉汀對照品),故本研究將阿戈美拉汀精制作為工作對照品,并用經(jīng)典的非水電位滴定法對其標(biāo)定,建立了阿戈美拉汀工作對照品含量測定的方法,利用本方法測定的含量結(jié)果與采用紫外檢測(HPLC-UV)、二極管陣列檢測(HPLC-DAD)及蒸發(fā)光檢測(HPLCELSD)方法測定的含量結(jié)果進(jìn)行比對,結(jié)果一致.

1 儀器與方法

1.1 儀器與試藥

實驗所用儀器包括:PHS-3C型精密PH計(指示電極231-01型玻璃電極,參比電極為212-01型飽和甘汞電極,上海精密科學(xué)儀器有限公司);10 mL滴定管(精度為0.05 mL).Agilent 1100 G1311A泵G1314A檢測器;Waters996(DAD)Waters 600 Pump; Alltech elsd 2000 es;METT LER TOLEDO XS105電子天平(d=0.01 mg).

實驗所用試藥包括:阿戈美拉汀工作對照品(批號為100101、100201、100202、100203、100401、100402、100403,均由成都新恒創(chuàng)藥業(yè)有限公司提供);甲醇、乙腈為色譜純,氯仿、高氯酸、磷酸氫二鈉、磷酸、三氟醋酸為分析純,水為超純水.

1.2 試劑配制與標(biāo)定

1.2.1 0.1 mol/L高氯酸滴定液配制[5].

取無水冰醋酸(按含水量計算,每1 g水加醋酐5.22 mL)750 mL,加入高氯酸(70%～72%)8.5 mL,搖勻,在室溫下緩緩滴加醋酐23 mL,邊加邊搖,加完后再振搖均勻,放冷,加無水冰醋酸適量至1 000 mL,搖勻,放置24 h,備用.

1.2.2 高氯酸滴定液標(biāo)定[5].

取在105℃干燥至恒重的基準(zhǔn)鄰苯二甲酸氫鉀約0.16 g,精密稱定,加無水冰醋酸20 mL溶解,加結(jié)晶指示液1滴,用“1.2.1”項下配制的高氯酸滴定液緩緩滴定至藍(lán)色,并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正.每1 mL高氯酸滴定液(0.1 mol/L)相當(dāng)于20.42 mg的鄰苯二甲酸氫鉀.根據(jù)本液的消耗量與鄰苯二甲酸氫鉀的取用量,計算出本液的濃度.

1.3 實驗方法

取阿戈美拉汀0.18 g,精密稱定,加氯仿30 mL溶解,再加入醋酐5 mL攪拌均勻,用高氯酸滴定液(0.1 mol/L)滴定,電位指示,以高氯酸滴定液消耗體積V-電位指示E的一階導(dǎo)數(shù)(△E/△V-V)曲線判斷終點,并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正[6].每1 mL高氯酸滴定液(0.1 mol/L)相當(dāng)于 24.33 mg的C15H17NO2.

2 結(jié)果與討論

2.1 滴定劑及溶劑體系選擇

阿戈美拉汀為酰胺類化合物,在溶液中呈極微弱的堿性,是疏水性很強(qiáng)的弱極性化合物.在冰醋酸、醋酐、冰醋酸—醋酐、冰醋酸—苯、冰醋酸—氯仿[7]作溶劑時用高氯酸滴定液(0.1 mol/L)滴定均未獲得明顯的電位突躍;在氯仿—醋酐溶劑中,用高氯酸滴定液(0.1 mol/L)滴定時,當(dāng)氯仿—醋酐(6∶1)做溶劑時獲得明顯的電位突躍.

2.2 滴定終點確定

采用指示劑和電位法聯(lián)合確定滴定終點,發(fā)現(xiàn)終點電位突躍時顏色變化(由藍(lán)色變?yōu)樗{(lán)綠色)不明顯,且不敏銳.因此,選擇電位法確定滴定終點.以高氯酸滴定液消耗體積 V-電位指示 E的一階導(dǎo)數(shù)(△E/△V-V)曲線判斷終點,并將滴定的結(jié)果用空白試驗校正.

2.3 精密度(回收率)試驗

精密稱取阿戈美拉汀工作對照品(批號100101) 9份樣品,連續(xù)測定9次,測定結(jié)果的平均值為99.8%,相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.1%.試驗結(jié)果表明,采用本方法所得結(jié)果重現(xiàn)性好,精度高,符合含量測定的質(zhì)量控制要求.精密度(回收率)試驗見表1.

表1 精密度(回收率)試驗結(jié)果

2.4 線性試驗

分別精密稱取阿戈美拉汀工作對照品(批號, 100101)6份樣品,按“1.3”項下實驗方法進(jìn)行測定.以各樣品稱樣量和相對應(yīng)消耗的高氯酸滴定液做相關(guān)線性方程及線性回歸.實驗結(jié)果顯示,線性方程為:Y=0.0391x+0.0276,相關(guān)系數(shù)r為1.0000,線性關(guān)系良好.線性試驗結(jié)果見表2和圖1.