土壤-溫郁金體系中有機氯農(nóng)藥殘留的分析檢測

孫玉娜，葉佳，姜幸 ，盧靜，韓穎，仇佩虹

（1.溫州醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，浙江 溫州 325035;2.濟寧市第二人民醫(yī)院，山東 濟寧 262200；3.溫州市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢測院，浙江 溫州 325000）

土壤-溫郁金體系中有機氯農(nóng)藥殘留的分析檢測

孫玉娜1，2，葉佳1，3，姜幸1，盧靜1，韓穎1，仇佩虹1

（1.溫州醫(yī)學(xué)院 藥學(xué)院，浙江 溫州 325035;2.濟寧市第二人民醫(yī)院，山東 濟寧 262200；3.溫州市質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢測院，浙江 溫州 325000）

目的：對溫郁金GAP種植基地藥材塊根、葉子及相應(yīng)土壤中的有機氯農(nóng)藥進行檢測，并分析其相關(guān)性，為溫郁金安全規(guī)范化種植提供參考意見。方法：采用氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）法測定有機氯農(nóng)藥（OCPs）含量。結(jié)果：土壤與塊根中的α-HCB、p，p’-DDD和總HCB呈現(xiàn)顯著相關(guān)性（P＜0.01，P＜0.01，P＜0.05），塊根和葉子中的β-HCB、p，p’-DDD及p，p’-DDE呈現(xiàn)顯著相關(guān)性（P＜0.05）。結(jié)論：溫郁金種植基地土壤及其藥材的農(nóng)殘留量符合國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)，藥材中的農(nóng)殘留主要來源于土壤，應(yīng)選擇低農(nóng)殘留的土壤種植藥材。

溫郁金；有機氯農(nóng)藥；土壤；殘留分析

溫郁金為姜科植物溫郁金Curcuma wenyujinY.H.Chen et C.Ling的干燥塊根，在中國、日本和印度的傳統(tǒng)醫(yī)藥中是一味重要的藥材，具有行氣化瘀、清心解郁、利膽退黃之功效[1]。溫郁金主要分布于浙江南部，是著名的道地藥材“浙八味”之一，主要用于治療經(jīng)閉痛經(jīng)、腫瘤、胸腹脹痛、刺痛、熱病神昏、癲病發(fā)狂和黃疸尿赤等癥[2-5]。

有機氯農(nóng)藥（OCPs）是一類含氯有機化合物，曾因廣譜、高效、價廉、急性毒性小而廣泛用于防治植物病蟲害。OCPs具有高度的化學(xué)、物理和生物學(xué)的穩(wěn)定性[6]，由于其半衰期長，不易降解和代謝，對環(huán)境造成嚴(yán)重的污染；它自接污染作物，并大量殘留在土壤中。而中草藥的種植期較長，易受到OCPs污染。

氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）聯(lián)用廣泛用于植物環(huán)境中的OCPs殘留含量檢測[7-9]，是一種快捷、靈敏的檢測方法，因此我們采用GC-MS法對溫郁金種植基地土壤及其藥材中的OCPs殘留量進行檢測并分析相關(guān)性，為溫郁金安全規(guī)范化種植提供參考。

1 實驗材料

1.1 供試樣品 樣品來源：溫州市瑞安溫郁金種植基地。土壤采樣在供試基地內(nèi)溫郁金成熟期時分設(shè)3個隨機采樣區(qū)1、2、3（pH值分別為5.64、5.81、5.69）采挖，每個采樣區(qū)隨機采集6株溫郁金及其對應(yīng)的種植的泥土，各樣品帶回實驗室風(fēng)干，按分析要求分別磨碎過篩備用。各溫郁金植株分別采集葉子、塊根，洗凈、曬干、烘干（60 ℃）、混勻，取部分粉碎后脫水至恒重，置干燥器中備用。

1.2 儀器與試劑 GC6890N/MS5975B型氣質(zhì)聯(lián)用儀（美國Agilent），BS110型電子分析天平（北京賽多利斯天平有限公司），SK2200HP超聲波清洗器（上海科導(dǎo)超聲儀器有限公司），HCB、DDT標(biāo)準(zhǔn)樣品（中國標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)開發(fā)公司表樣開發(fā)部）。

試劑：α-HCB、β-HCB、γ-HCB、δ-HCB、p，p’-DDE、o，p’-DDT、p，p’-DDD和p，p’-DDT，分析標(biāo)準(zhǔn)品，純度99.9%（阿拉丁試劑公司）。

正己烷、丙酮、石油醚、濃硫酸均為分析純。

2 方法

2.1 供試品溶液的制備 分別稱取1.00 g塊根、葉子、土壤樣品于10 mL離心管中。移取5.0 mL正己烷:丙酮（3:7）于塊根、土壤的離心管中，7.0 mL的正己烷:丙酮（3:7）于葉子的離心管中，超聲30 min，2000 r·min-1離心20 min，移取上清液于另一離心管。塊根、土壤樣品的沉淀中加5.0 mL正己烷，葉子樣品的沉淀中加3.0 mL正己烷，超聲30 min，2000 r·min-1離心20 min，移取上清液。合并兩次上清液，采用氮氣發(fā)生器吹干液體，加入5.0 mL正己烷，振蕩混勻，再加入2.0 mL濃硫酸，振蕩混勻，靜置10 min后移取上清液于另一試管，采用氮氣發(fā)生器吹干液體。用1.0 mL丙酮溶解，轉(zhuǎn)移到進樣瓶里。同時做空白對照，重復(fù)3次。2.2 儀器工作條件 色譜條件：色譜柱為0.25 m×30 mm，0.25μm；進樣口溫度230 ℃；檢測器溫度300 ℃，不分流進樣；程序升溫為從初始100 ℃開始，按10 ℃·min-1升至220 ℃，再以8 ℃·min-1升至250 ℃，保持10 min；理論塔板數(shù)按α-BHC峰計算應(yīng)不低于1×105，2個相鄰色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5。

質(zhì)譜條件：離子源為EI源；檢測模式為分時段選擇離子檢測（SIM）。

2.3 標(biāo)準(zhǔn)品配置及標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 取α-HCB、β-HCB、γ-HCB、δ-HCB、p，p’-DDE、o，p’-DDT、p，p’-DDD和p，p’-DDT 8種OCPs標(biāo)準(zhǔn)品用石油醚配制成0.001～1.0μg·mL-1濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液。按“2.2”工作條件，對各元素標(biāo)準(zhǔn)溶液進行測定并繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見表1。由表1可知，各元素回歸方程線性范圍曲線相關(guān)系數(shù)均在0.9953～1.0000之間， 呈良好的線性關(guān)系。

表1 標(biāo)準(zhǔn)曲線參數(shù)

2.4 加樣回收率試驗 精確稱取各樣品，在樣品中加入相應(yīng)的定量的各元素標(biāo)準(zhǔn)溶液，按照“2.1”項操作得到各供試樣品，測定元素含量，結(jié)果見表2。由表2可知，被測元素的加樣回收率在89.0%～105.1%之間，說明本實驗方法測定溫郁金樣品中微量元素含量，準(zhǔn)確度良好，測定結(jié)果可靠。

表2 實際樣品加標(biāo)回收試驗

2.5 OCPs含量的測定 分別稱取1.00 g塊根、葉子和土壤樣品按照“2.1”項配置成供試溶液，并根據(jù)“2.2”項進行檢測，采用統(tǒng)計軟件SPSS11.5和Excel 2003對實驗數(shù)據(jù)進行處理及相關(guān)性分析。

3 結(jié)果和討論

3.1 土壤-溫郁金體系的農(nóng)藥殘留量分析 溫郁金藥材及其土壤的農(nóng)藥殘留結(jié)果見表3。

由表3可知，塊根中HCB主要以γ-HCB異構(gòu)體的形式存在，葉子中HCB以β-HCB、δ-HCB異構(gòu)體的形式存在，土壤中主要以α-HCB，β-HCB和γ-HCB三種異構(gòu)體的形式存在。藥材和土壤中DDT以p，p’-DDE和p，p’-DDD異構(gòu)體存在，o，p’-DDT和p，p’-DDT異構(gòu)體均未檢測出。塊根和葉子中DDT主要以p，p’-DDD異構(gòu)體的形式存在，其含量占DDT總量的84%以上，可知藥材DDT中p，p’-DDD異構(gòu)體的貢獻率最大。土壤樣品1和2中沒有檢測到δ-HCB殘留，僅在土壤樣品3中檢測到，而葉子和塊根樣品中均有檢測到δ-HCB殘留，這可能是空氣中農(nóng)藥殘留附著在葉子上導(dǎo)致的。

表3 溫郁金塊根、葉子及土壤中農(nóng)藥殘留測定結(jié)果（n=3，μg·kg-1）

3.2 農(nóng)藥殘留的相關(guān)性分析 土壤-溫郁金體系中各OCPs異構(gòu)體的相關(guān)性結(jié)果見表4。

表4 藥材及土壤中的OCPs殘留量的相關(guān)性

由表4可見，土壤與塊根中的α-HCB、p，p’-DDD呈現(xiàn)極顯著相關(guān)性（P＜0.01），總HCB呈現(xiàn)顯著相關(guān)性（P＜0.05），土壤與葉子中的p，p’-DDD呈現(xiàn)顯著相關(guān)性（P＜0.05），說明土壤中α-HCB、p，p’-DDD和總HCB殘留量直接影響到溫郁金藥材中相應(yīng)農(nóng)藥殘留的含量。塊根和葉子中的β-HCB、 p，p’-DDD及p，p’-DDE呈現(xiàn)顯著相關(guān)性（P＜0.05），說明溫郁金葉子中β-HCB、p，p’-DDD和p，p’-DDE含量直接受到塊根中相應(yīng)農(nóng)藥殘留含量的影響。

3.3 種植基地藥材安全性分析建議

3.3.1 根據(jù)我國土壤環(huán)境標(biāo)準(zhǔn)（GB15618-95），土壤中的總HCB和DDT的濃度極限為0.50 mg·kg-1。根據(jù)我國2005年藥典，總HCB和DDT的食用極限為0.2 mg·kg-1。溫郁金種植基地土壤及其藥材的農(nóng)藥殘留量符合國家有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。

3.3.2 由于空氣中農(nóng)藥殘留對溫郁金藥材的影響，我們建議噴灑農(nóng)藥時盡量避開藥材葉子表面。

3.3.3 溫郁金塊根中總HCB和DDT含量是相應(yīng)土壤中含量的1.87～8.46倍，說明塊根對OCPs具有富集作用。塊根和土壤中α-HCB、p，p’-DDD及總HCB含量的關(guān)系密切，葉子和土壤中p，p’-DDD含量的關(guān)系也比較密切，說明溫郁金藥材中的農(nóng)藥殘留主要來源于土壤。為了降低溫郁金藥材的農(nóng)藥殘留量，我們建議選擇低農(nóng)藥殘留的土壤進行溫郁金的栽培種植。

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Studies on residues of organochlorine pesticides in Soil-CurcumaSystem

SUN Yuna*，YE Jia，JIANG Xing，LU Jing，HAN Ying，QIU Peihong.
*School of Pharmacy，Wenzhou Medical College，Wenzhou，325035

Objective:To provide scientific reference for Good Agricultural Practices(GAP)planting ofCurcuma wenyujin. To evaluate and analysis the residues of orga-nochlorine pesticides in planting soils andCurcuma wenyujin.Methods:GC-MS method was used to determine the residues of organochlorine pesticides.Results:The correlative analysis indicated that the contents of α-BHC， p，p’-DDD and total BHC in the roots of the plants had relationships with the contents of these species in the soil(P＜0.01，P＜0.01，P＜0.05，respectively). Also，the analysis indicated that the contents of β-HCB， p，p’-DDD and p，p’-DDE in the leaves had significant relationships with the contents of these species in the roots(P＜0.05，P＜0.05 andP＜0.05，respectively).Conclusion:The residual levels of organochlorine pesticides in the plants and soils are accorded with the relevant standards of the State. The pesticide residues in the plants are mainly from soils，so we should choose low-residue soils to cultivate medicinal materials.

Curcuma wenyujin；organochlorine pesticides；soil；residues analyses

R917

A

1000-2138（2012）06-0537-04

2012-05-07

溫州市科技局科研基金資助項目（Y20080091）；浙江省新苗人才計劃資助項目（2011R413036）。

孫玉娜（1982-），女，黑龍江齊齊哈爾人，碩士生。

仇佩虹，教授，碩士生導(dǎo)師，Email：wzqph@163.com。

吳健敏）

·論 著·