心復(fù)康口服液的藥效學(xué)研究進(jìn)展1）

杜 柏，胡元會(huì)，劉瑞華，吳華芹，高 楊

通過建立多種動(dòng)物模型探討心復(fù)康口服液治療充血性心力衰竭（心衰）的作用機(jī)制，現(xiàn)將有關(guān)的研究?jī)?nèi)容綜述如下。

1 心復(fù)康口服液對(duì)心室重塑及心功能的影響

1.1 心復(fù)康口服液對(duì)急性缺血性心衰的影響 馬文禮等［1］采用冠狀動(dòng)脈結(jié)扎法制作心肌梗死模型，研究表明中藥心復(fù)康口服液在明顯減少左室舒張末期內(nèi)徑（LVEDD）和左室舒張末期容積（LVEDV）的同時(shí)，使急性心肌梗死（AMI）模型大鼠減小的左室射血分?jǐn)?shù)（LVEF）、左室短軸縮短率（FS）值顯著增加。心復(fù)康口服液口服液可以改善心室重塑大鼠的心功能，保護(hù)心臟結(jié)構(gòu)重整；抑制心臟膠原纖維的增生［1］。胡元會(huì)等［2］采用冠脈結(jié)扎法制作心肌梗死模型，研究后認(rèn)為心復(fù)康口服液能顯著改善心肌梗死心衰大鼠的血流動(dòng)力學(xué)狀態(tài)，可使心肌梗死心衰大鼠心輸出量（CO）增加，左室內(nèi)壓最大變化速率（±dp／dtmax）上升，說明心復(fù)康口服液能顯著改善心肌梗死心衰大鼠的心臟收縮和舒張功能。

1.2 心復(fù)康口服液對(duì)慢性心衰的影響 胡元會(huì)等［3］通過腹腔注射阿霉素復(fù)制心衰大鼠模型，研究認(rèn)為心復(fù)康可使心衰大鼠心排血量（CO）增加，±dp／dtmax上升，證實(shí)心復(fù)康口服液對(duì)阿霉素心衰模型大鼠心功能有明確保護(hù)作用。

2 心復(fù)康口服液對(duì)大鼠心肌Ca2＋定位及Ca2＋－ATPase活性的影響［3，4］

Ca2＋穩(wěn)態(tài)對(duì)維持心肌細(xì)胞正常的形態(tài)和功能是不可或缺的，在心肌細(xì)胞膜及線粒體膜、肌漿網(wǎng)膜等生物膜上存在轉(zhuǎn)運(yùn)Ca2＋的Ca－ATPase，線粒體和肌漿網(wǎng)等細(xì)胞內(nèi)Ca2＋貯庫可調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)Ca2＋在一定范圍，若過多的Ca2＋進(jìn)入細(xì)胞或Ca－ATPase活性降低可使上述調(diào)節(jié)失常，導(dǎo)致Ca2＋超載，從而損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。Ca－ATPase具有主動(dòng)轉(zhuǎn)運(yùn)Ca2＋的作用，是調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞內(nèi)Ca2＋穩(wěn)態(tài)的主要酶之一，通過腹腔注射阿霉素復(fù)制大鼠心衰模型，證實(shí)ADR模型組心肌細(xì)胞Ca－ATPase反應(yīng)較弱，沉淀物多在肌膜和線粒體膜上，提示由于細(xì)胞生物膜上Ca－ATPase活性降低，以至進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)過多的Ca2＋不能被及時(shí)轉(zhuǎn)運(yùn)出細(xì)胞或轉(zhuǎn)進(jìn)Ca2＋內(nèi)貯庫，從而使細(xì)胞內(nèi)Ca2＋超負(fù)荷，導(dǎo)致心肌細(xì)胞變性、壞死。而心復(fù)康治療組心肌細(xì)胞Ca－ATPase反應(yīng)較正常對(duì)照組、ADR組增強(qiáng)，反應(yīng)物廣泛分布于肌纖維膜、線粒體膜及肌漿網(wǎng)膜各處，說明藥物可通過增強(qiáng)細(xì)胞膜上Ca2＋泵活性，將進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)的Ca2＋移出，防止Ca2＋超負(fù)荷，同時(shí)，線粒體和肌漿網(wǎng)膜上Ca2＋泵活性增強(qiáng)，將部分Ca2＋移入內(nèi)貯庫，推測(cè)該藥改善心功能的機(jī)制可能是在Ca2＋超負(fù)荷時(shí)減少胞漿內(nèi)Ca2＋濃度，并在心肌收縮時(shí)由內(nèi)貯庫釋放出一定的Ca2＋以滿足心肌收縮所需。提示心復(fù)康口服液有顯著改善阿霉素心衰模型大鼠的心臟收縮和舒張功能的作用，可能與通過提高Ca－ATPase活性、促進(jìn)Ca2＋轉(zhuǎn)運(yùn)、防止心肌細(xì)胞Ca2＋超載有關(guān)。

3 心復(fù)康口服液對(duì)心肌的保護(hù)作用及可能的作用機(jī)制

3.1 心復(fù)康口服液對(duì)阿霉素亞急性心肌毒性的防治作用 胡元會(huì)等［5］通過腹腔注射阿霉素復(fù)制亞急性心肌損傷大鼠模型，以心肌超微結(jié)構(gòu)及心肌組織中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH－Px）活性、丙二醛（MDA）含量為觀察指標(biāo)。結(jié)果阿霉素模型組GSHPx活性和MDA含量分別為（51.59±2.721）U／（min·mg）和（0.66±0.468）nmol／（mg·pr），與正常對(duì)照組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；心復(fù)康組GSH－Px活性和 MDA含量分別為（64.77±5.112）U／（min·mg）和（0.326±0.241）nmol／（mg·pr），與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01），接近正常對(duì)照組。同時(shí)電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，阿霉素模型組心肌細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)有嚴(yán)重?fù)p傷，硝酸鑭標(biāo)記可見鑭顆粒進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，在細(xì)胞內(nèi)有大量電子致密的鑭顆粒，線粒體外膜周圍亦有致密的鑭顆粒沉積，壞死的肌原纖維之間亦有少量散在的鑭顆粒沉積。心復(fù)康治療組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷較輕，細(xì)胞間隙和外膜可見鑭沉積的電子致密顆粒，線粒體、肌絲之間有少量的鑭顆粒沉積。結(jié)果顯示ADR模型組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷嚴(yán)重，膜通透性亦發(fā)生明顯改變。心復(fù)康治療組心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)損傷較輕，膜通透性改變不明顯。心復(fù)康口服液具有抗氧自由基作用和保護(hù)心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)及膜通透性的作用。提示這種心肌保護(hù)作用的機(jī)制可能與心復(fù)康口服液增強(qiáng)心肌細(xì)胞對(duì)半醌式自由基的清除能力有密切關(guān)系。3.2 心復(fù)康口服液對(duì)注射去甲腎上腺素兔心肌損傷的保護(hù)作用及可能的機(jī)制 通過注射去甲腎上腺素復(fù)制兔心肌損傷模型，何建成等［6］用透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)心復(fù)康口服液對(duì)心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)有明確的保護(hù)作用，可改善去甲腎上腺素心肌病心肌微循環(huán)，防治心肌內(nèi)毛細(xì)血管內(nèi)皮受損，保護(hù)心肌細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)免受損傷。曹雪濱等［7］應(yīng)用半定量計(jì)算心肌壞死面積證實(shí)其可以減輕心肌組織損傷程度，并且可以防止鈣離子過度內(nèi)流，證實(shí)心復(fù)康口服液對(duì)兔實(shí)驗(yàn)性心肌損傷有明確保護(hù)作用。琥珀酸脫氫酶（SDH）為心肌細(xì)胞線粒體能量代謝的關(guān)鍵酶，反應(yīng)心肌細(xì)胞能量代謝的水平［8］。曹雪濱等［9］應(yīng)用電鏡細(xì)胞化學(xué)方法結(jié)合圖像分析研究表明，心復(fù)康口服液可以明顯提高去甲腎上腺素性損傷的心肌細(xì)胞線粒體SDH活性，證實(shí)心復(fù)康口服液對(duì)心肌細(xì)胞能量代謝具有一定的保護(hù)作用。并應(yīng)用電鏡硝酸鑭電子示蹤技術(shù)證實(shí)，對(duì)心肌細(xì)胞膜通透性的保護(hù)可能為心復(fù)康口服液對(duì)心肌細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu)保護(hù)作用的重要機(jī)制之一。

4 心復(fù)康口服液對(duì)心肌能量代謝產(chǎn)物及相關(guān)調(diào)節(jié)酶基因和蛋白的表達(dá)的影響

4.1 心復(fù)康口服液對(duì)心肌能量代謝產(chǎn)物的影響 心肌能量代謝障礙是心肌細(xì)胞損傷的始動(dòng)環(huán)節(jié)，是引起和促進(jìn)心力衰竭發(fā)生、發(fā)展的重要因素。王艷飛等［10］通過建立腹主動(dòng)脈部分縮窄致壓力超負(fù)荷大鼠模型，用高效液相法（HPLC）測(cè)定心肌高能磷酸鹽的濃度，通過透射電鏡觀察大鼠心肌線粒體的形態(tài)，觀察大鼠第6周、第8周心功能的指標(biāo)及心肌高能磷酸鹽［三磷酸腺苷（ATP）、二磷酸腺苷（ADP）、一磷酸腺苷（AMP）、腺嘌呤核苷酸總量（TAN）及能荷（EC）］的含量。治療組與模型組相比，大鼠心功能指標(biāo)及ATP、ADP、AMP、TAN的含量均明顯改善（P＜0.01）。治療組大鼠心功能指標(biāo)及 ATP、ADP、AMP、TAN的含量在8周時(shí)明顯高于6周時(shí)（P＜0.05）；治療組大鼠心肌線粒體的受損程度較模型組輕。證實(shí)心復(fù)康口服液能明顯改善慢性壓力超負(fù)荷大鼠心肌能量代謝和心臟功能，并對(duì)心肌線粒體起到保護(hù)作用。

乳酸（lactate，LAC）是能量代謝的低能通路，是細(xì)胞能量代謝缺乏的指標(biāo)。心肌能量代謝發(fā)生障礙時(shí)，脂肪酸氧化利用減少，葡萄糖氧化利用增加。由于糖酵解作為乳酸產(chǎn)生的主要途徑，葡萄糖氧化利用增加勢(shì)必會(huì)引起機(jī)體乳酸的增加。徐淑樂等［11］運(yùn)用1H－MRS對(duì)腹主動(dòng)脈部分縮窄致壓力超負(fù)荷模型大鼠心肌組織乳酸進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示6周、12周時(shí)模型組大鼠心肌乳酸水平較同期假手術(shù)組、心復(fù)康組顯著升高（P＜0.01）。同組間比較，模型組大鼠心肌乳酸水平6周、12周時(shí)均呈明顯升高趨勢(shì)（P＜0.01）。可見，模型組大鼠心肌能量代謝障礙持續(xù)存在，并隨著時(shí)間的延長(zhǎng)呈進(jìn)一步加重趨勢(shì)。心復(fù)康組大鼠心肌乳酸水平，12周時(shí)較6周時(shí)顯著降低（P＜0.01），進(jìn)而說明心復(fù)康對(duì)于大鼠心肌能量代謝障礙具有非常明顯的改善作用。

徐淑樂等［12］運(yùn)用1H－MRS對(duì)腹主動(dòng)脈部分縮窄致壓力超負(fù)荷模型大鼠心肌組織肌酸、牛磺酸水平進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果顯示6周、12周時(shí)，模型組大鼠心肌肌酸、牛磺酸水平均低于同期假手術(shù)組、心復(fù)康組（P＜0.01）。同組間比較：模型組大鼠心肌肌酸、牛磺酸水平，12周時(shí)較6周時(shí)顯著降低（P＜0.01）；心復(fù)康組大鼠心肌肌酸、牛磺酸水平，12周時(shí)較6周呈顯著升高趨勢(shì)（P＜0.01）。說明心復(fù)康對(duì)于大鼠心肌能量代謝障礙具有非常改善作用，而且隨時(shí)間延長(zhǎng)，其中藥心復(fù)康對(duì)心肌能量代謝的改善作用則進(jìn)一步凸顯。

4.2 心復(fù)康口服液對(duì)心肌能量代謝相關(guān)調(diào)節(jié)酶基因和蛋白的表達(dá)的影響 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)因1（GLUT1）是調(diào)節(jié)心肌細(xì)胞糖代謝的主要膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白，心肌缺血時(shí)分布于細(xì)胞亞膜的GLUT1移向細(xì)胞質(zhì)膜，從而促進(jìn)心肌細(xì)胞的糖代謝。心肌缺血時(shí)不僅是心肌細(xì)胞GLUT1發(fā)生移位，而且GLUT1mRNA的表達(dá)亦可增強(qiáng)數(shù)倍。吳華芹等［13］研究發(fā)現(xiàn)，心復(fù)康口服液可增加結(jié)扎左冠狀動(dòng)脈前降支心肌梗死后心衰模型大鼠心肌組織中ATP含量，上調(diào)GLUT1基因的表達(dá)，有效改善心肌梗死后心衰大鼠心肌能量代謝，從而保護(hù)心功能。

徐淑樂等［14］通過檢測(cè)腹主動(dòng)脈部分縮窄致壓力超負(fù)荷模型大鼠心肌線粒體ND4mRNA和蛋白的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)模型組大鼠ND4mRNA的相對(duì)含量較同期假手術(shù)組明顯降低（P＜0.01）；心復(fù)康組與假手術(shù)組比較ND4mRNA的含量顯著升高（P＜0.01），ND4蛋白含量升高（P＜0.05），表明心衰大鼠心肌線粒體ND4mRNA和ND4蛋白含量降低，心復(fù)康口服液可上調(diào)大鼠心肌線粒體ND4mRNA的表達(dá)，增加心衰大鼠心肌線粒體中ND4蛋白含量，顯著改善心衰大鼠心肌能量生成障礙。

王巍偉等［15］觀察心復(fù)康口服液對(duì)壓力負(fù)荷性心衰大鼠心肌細(xì)胞線粒體呼吸酶復(fù)合物活性的影響，證實(shí)心復(fù)康口服液能夠顯著提高心衰大鼠心肌細(xì)胞線粒體呼吸酶復(fù)合物活性，尤以線粒體呼吸酶復(fù)合Ⅱ（SDH）、Ⅳ（CCO）為著，進(jìn)而改善心肌細(xì)胞能量代謝障礙，對(duì)心肌能量代謝具有一定的保護(hù)作用。王紅英等［16］采用腹主動(dòng)脈部分縮窄法制作充血性心力衰竭（CHF）大鼠模型，研究結(jié)果顯示，心復(fù)康口服液治療6周、8周后的CHF大鼠心肌線粒體跨膜電位顯著升高，同時(shí)大鼠心肌ATP、ADP、AMP和TAN水平均有升高，能量代謝障礙得到改善。證實(shí)心復(fù)康口服液可穩(wěn)定線粒體膜電位，顯著改善心衰大鼠能量代謝障礙。

7 心復(fù)康口服液對(duì)緩慢性心律失常的影響

程曉昱等［17］用甲狀腺切除致緩慢性心律失常大鼠60只，心復(fù)康高、中劑量組能提高緩慢性心律失常大鼠的心率，改善房室傳導(dǎo)，其療效明顯優(yōu)于對(duì)照組（P＜0.05或P＜0.01）；可以提高血漿環(huán)磷酸腺苷含量，降低環(huán)磷酸鳥苷的含量。心復(fù)康可以有效提高緩慢性心律失常大鼠心率，其機(jī)制可能是通過對(duì)神經(jīng)內(nèi)分泌的調(diào)節(jié)來實(shí)現(xiàn)的。

綜上所述，從多角度、系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)研究中，通過使用并建立不同動(dòng)物模型，證實(shí)了具有益氣溫陽、活血化瘀功效的心復(fù)康口服液對(duì)各種心肌損傷及心力衰竭模型具有多方面的藥理作用，為其臨床用于治療充血性心力衰竭提供了切實(shí)的證據(jù)。

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