玉竹水提物對(duì)大鼠血栓形成的影響

鄧藻鏞，程全芬

玉竹為百合科植物玉竹的根莖，含有生物堿，強(qiáng)心甙，多糖類，黏液質(zhì)，維生素A等物質(zhì)。玉竹的干燥根莖性平、味甘，具有養(yǎng)陰、潤(rùn)燥、生津止渴、清熱潤(rùn)膚等功效，有強(qiáng)心、擴(kuò)張血管、降血糖、降血脂和抗腫瘤等作用。自古以來，民間用玉竹作食療就十分普遍，這些藥膳中有的用于外感風(fēng)熱而發(fā)熱咳嗽、咽痛口渴，呼吸系統(tǒng)疾病的患者如慢性支氣管炎、慢性肺病、肺結(jié)核等炎癥，有的用于冠心病、血管硬化、高血脂、高血壓等疾病。由此可見，玉竹可能有抗感染、抗凝等多重作用，但對(duì)其機(jī)制尚缺乏研究。本研究以大鼠實(shí)驗(yàn)性血栓形成為指標(biāo)研究玉竹水提物的抗血栓作用，并探討其可能的作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 藥品與試劑 玉竹購(gòu)于四川省中藥材有限責(zé)任公司，取玉竹加適量水煮沸1h，重復(fù)煎煮3次，濾液合并后濃縮成1ml相當(dāng)于0.5g生藥的液體，將濃縮液放于4℃冰箱備用。血漿血栓烷B2(TXB2)和6-酮 -前列腺素 F1α(6-keto-PGF1α)放射免疫分析測(cè)定試劑盒均購(gòu)自北京市福瑞生物工程公司。

1.2 實(shí)動(dòng)物物 SD大鼠，雄性，體質(zhì)量230～260g，由四川大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 大鼠動(dòng)-靜脈旁路血栓形成模型的建立及藥物處理將30只大鼠隨機(jī)分成3組，每組10只，即血栓模型組、玉竹處理組、正常對(duì)照組。玉竹處理組灌胃給藥，1次/d，給藥容積為2.5g/kg，連續(xù)給藥12d，血栓模型組和正常對(duì)照組給予等量蒸餾水。末次給藥后1h，參照文獻(xiàn)［1］的方法制成動(dòng)-靜脈旁路血栓形成模型，即將大鼠腹腔注射10%水合氯醛(按0.35g/kg)麻醉，于仰臥位固定后分離右側(cè)頸總動(dòng)脈和左側(cè)頸外靜脈。將三段聚乙烯管相連，一端插入右頸總動(dòng)脈，另一端插入左頸外靜脈，中間段長(zhǎng)10cm，放入一根長(zhǎng)為8cm的7號(hào)手術(shù)線 (已稱重)，管內(nèi)注滿2.5U/ml肝素0.9%氯化鈉溶液，建立動(dòng)靜脈旁路。20min后取下套管，取出絲線，在濕潤(rùn)的濾紙上滾動(dòng)，去除多余浮血，置已稱重的硫酸紙上稱濕重。

1.3.2 血栓濕重和干重的測(cè)量 血栓濕重由總重量減去絲線干重表示。將血栓放入烘箱內(nèi)60℃烘烤1h至恒重，冷卻稱重得血栓干重。

1.3.3 血漿TXB2和6-keto-PGF1α的含量測(cè)定 腹主動(dòng)脈取血，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作并檢測(cè)血漿TXB2和6-keto-PGF1α的含量。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 11.5統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行分析，計(jì)量資料以 ()表示，組間比較采用t檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血栓濕重和干重的測(cè)量結(jié)果 玉竹處理組血栓濕重和干重的重量明顯低于血栓模型組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.01，見表1)。

2.2 血漿TXB2和6-keto-PGF1α的含量測(cè)定結(jié)果 玉竹處理組血漿TXB2的含量明顯低于血栓模型組，血漿6-keto-PGF1α的含量明顯高于血栓模型組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.01，見表2)。

3 討論

血栓形成是冠心病、腦卒中、動(dòng)脈粥樣硬化等致殘和致死率高的心腦血管疾病的病理學(xué)基礎(chǔ)。血栓形成過程涉及異常的血管內(nèi)膜表面，血小板及激活的凝血因子之間的相互作用。本實(shí)驗(yàn)采用的大鼠動(dòng)-靜脈旁路血栓形成法制備的血栓是血栓形成的“經(jīng)典過程”，能較好地模擬血管阻塞性血栓形成和血小板黏附性血栓形成，反應(yīng)自然的病理過程。實(shí)驗(yàn)中絲線上形成的血栓主要由血小板形成［2］。

研究表明，血栓烷A2(TXA2)和前列腺素I2(PGI2)是機(jī)體內(nèi)調(diào)節(jié)血小板聚集的一對(duì)生物活性物質(zhì)，二者的平衡對(duì)維持血液流動(dòng)性和保證生理止血功能具有重要意義。TXA2有促進(jìn)血小板聚集、誘發(fā)血栓形成的作用［3］，但TXA2在體內(nèi)極不穩(wěn)定，t1/2僅為37s［4］，迅速降解為無活性的TXB2。與TXA2作用相反，PGI2與血小板膜表面的特異受體結(jié)合，激活腺苷酸環(huán)化酶，引起血小板內(nèi)c-AMP增高，抑制血小板黏附聚集，但其t1/2僅為2min，迅速降解為穩(wěn)定型6-keto-PGF1α。因此，TXB2和6-keto-PGF1α的檢測(cè)可以間接反映血液中TXA2和PGI2的變化情況。

本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，玉竹水提物對(duì)大鼠動(dòng)-靜脈旁路血栓形成有明顯抑制作用，可以明顯降低血漿中TXB2的含量，升高6-keto-PGF1α的含量，可恢復(fù)二者的失衡情況。由此推測(cè)玉竹水提物的抗血栓作用機(jī)制可能與抑制血小板的聚集有關(guān)，確切的機(jī)制有待進(jìn)一步探討。

表1 玉竹水提物對(duì)大鼠血栓形成的影響 (，n=10，mg/cm)Table 1 The effect of the extract of Polygonatum odoratum on thrombus formation in rats

表1 玉竹水提物對(duì)大鼠血栓形成的影響 (，n=10，mg/cm)Table 1 The effect of the extract of Polygonatum odoratum on thrombus formation in rats

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表2 玉竹水提物對(duì)血漿TXB2和6-keto-PGF1α的影響 (，n=10，pg/ml)Table 2 The effect of the extract of Polygonatum odoratum on the levels of TXB2 and 6-keto-PGF1α

表2 玉竹水提物對(duì)血漿TXB2和6-keto-PGF1α的影響 (，n=10，pg/ml)Table 2 The effect of the extract of Polygonatum odoratum on the levels of TXB2 and 6-keto-PGF1α

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