維生素K1注射液、硫酸鎂注射液與阿托品注射液的配伍穩(wěn)定性考察

徐帆，徐貴麗，肖少琴，孟方（.成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院，昆明65003；.桂林醫(yī)學(xué)院，廣西桂林54004）

維生素K1、硫酸鎂及阿托品都具有治療內(nèi)臟絞痛的相關(guān)藥理作用，臨床上常將以上3種藥物配伍應(yīng)用于佐治膽絞痛，具有止痛迅速、療效高、副作用少的優(yōu)點(diǎn)[1]。筆者參考目前最新的配伍檢索表[2，3]，發(fā)現(xiàn)其結(jié)果均為“忌配伍”，原因是出現(xiàn)混濁、沉淀、產(chǎn)氣、變色、失效、增毒、拮抗。周曉潔等[4]研究報(bào)道指出，維生素K1不宜配伍給藥。以上結(jié)論與臨床實(shí)際用藥相矛盾。因此，筆者參考3種藥的臨床使用劑量，對(duì)維生素K1、硫酸鎂及阿托品注射液在0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液中的配伍穩(wěn)定性進(jìn)行研究，旨在為臨床合理用藥提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

2695系列高效液相色譜（HPLC）儀，包括2695 HPLC泵及自動(dòng)進(jìn)樣器、2487紫外雙波長(zhǎng)檢測(cè)器、Empower色譜工作站（美國(guó)Waters公司）；XW-80A渦旋混合器（上海精科實(shí)業(yè)有限公司）；Hitachi Z-2300火焰原子吸收分光光度計(jì)（日本日立公司）；HI98103筆式酸度計(jì)（北京哈納科儀科技有限公司）；GWJ-4智能微粒測(cè)定儀（天津市天大天發(fā)科技有限公司）。

1.2 試藥

維生素K1注射液（天津藥業(yè)集團(tuán)新鄭股份有限公司，批號(hào):1003061，規(guī)格:1 mL∶10 mg）；硫酸鎂注射液（杭州民生藥業(yè)有限公司，批號(hào):1006283，規(guī)格:10 mL∶2.5 g）；阿托品注射液（上海禾豐制藥有限公司，批號(hào):100304，規(guī)格:1 mL∶0.5 mg）；0.9%氯化鈉注射液（四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào):B100726L，規(guī)格:500 mL∶4.5 g）；5%葡萄糖注射液（四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào):B100706B，規(guī)格:500 mL∶25 g）；滅菌注射用水（四川科倫藥業(yè)股份有限公司，批號(hào):100730H，規(guī)格:500 mL）；甲醇為色譜純，水為超純水，其他試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 配伍液的配制

模擬臨床常用濃度，取維生素K1注射液（1 mL∶10 mg）2支、硫酸鎂注射液（10 mL∶2.5 g）1支和阿托品注射液（1 mL∶0.5 mg）2支，用無(wú)菌注射器分別注入0.9%氯化鈉注射液（500 mL）和5%葡萄糖注射液（500 mL）中，充分混合，并將配制后的配伍液分別放入避光袋中。

2.2 外觀觀察

在室溫、避光條件下，取“2.1”項(xiàng)下的配伍液適量，以未加藥的0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液作對(duì)照，用目測(cè)法于0、1、2、4、6、8、16、24 h時(shí)觀察配伍液的外觀變化。試驗(yàn)結(jié)果顯示，2種配伍液于室溫避光放置24 h內(nèi)，溶液顏色微黃，透明澄清，顏色無(wú)變化，無(wú)沉淀、混濁或氣體產(chǎn)生。

2.3 pH值測(cè)定

在室溫、避光條件下，分別在0、1、2、4、6、8、16、24 h時(shí)測(cè)定“2.1”項(xiàng)下的配伍液和加藥前空白的0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液的pH值，每個(gè)樣本測(cè)定3次，結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

表1 3種藥品在0.9%氯化鈉注射液中配伍后不同時(shí)間pH值及不溶性微粒數(shù)（n＝3）Tab 1 pH value and the number of insoluble particle of 3 drugs mixed with 0.9%Sodium chloride injection at different time（n＝3）

表2 3種藥品在5%葡萄糖注射液中配伍后不同時(shí)間pH值及不溶性微粒數(shù)（n＝3）Tab 2 pH value and the number of insoluble particle of 3 drugs in 0.5%Glucose injection at different time（n＝3）

2.4 不溶性微粒測(cè)定

在室溫、避光條件下，分別在0、1、2、4、8、12、16、24 h時(shí)，取“2.1”項(xiàng)下的配伍液，用激光微粒測(cè)定儀測(cè)定≥10 μm及≥25 μm的微粒數(shù)，結(jié)果見(jiàn)表1、表2。

2.5 含量測(cè)定

2.5.1 檢測(cè)條件:（1）維生素K1色譜條件:色譜柱為Waters Symmetry C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相為甲醇-水（96∶4），流速為1.5 mL·min－1，檢測(cè)波長(zhǎng)為 245 nm，柱溫為35℃，進(jìn)樣量為10 μL。（2）硫酸鎂測(cè)定條件（火焰原子吸收法）:檢測(cè)波長(zhǎng)為285.2 nm，燃燒頭高度為7.5 mm，狹縫寬度為1.3 nm，燈電流為7.5 mA，燃燒氣為乙炔、空氣混合物，流速為2.2 L·min－1。（3）阿托品色譜條件:色譜柱為Waters Symmetry C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），流動(dòng)相為0.05 mol·L－1磷酸氫二鈉-甲醇（78∶22，pH＝4.13），流速為1.0 mL·min－1，檢測(cè)波長(zhǎng)為210 nm，柱溫為35℃，進(jìn)樣量為10 μL。

2.5.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制:（1）維生素K1:精密吸取10 mg·mL－1的維生素K1適量，加滅菌注射用水分別配制成系列濃度的維生素K1對(duì)照品溶液（5、10、20、50、100、200 μg·mL－1），按擬定的色譜條件分別進(jìn)樣測(cè)定3次，記錄色譜圖，以濃度（X）為橫坐標(biāo)，峰面積（Y）為縱坐標(biāo)繪制曲線，求得維生素K1的回歸方程為Y＝13 700X－5 890（r＝0.999 9，n＝3），其保留時(shí)間為18.10 min；（2）硫酸鎂:精密吸取0.25 g·mL－1的硫酸鎂適量，加滅菌注射用水配制成系列濃度的硫酸鎂對(duì)照品溶液（2、4、6、8、10 μg·mL－1），按擬定的測(cè)定條件進(jìn)樣，記錄吸光度值，以濃度（X）為橫坐標(biāo)，吸光度值（Y）為縱坐標(biāo)繪制曲線，求得硫酸鎂的回歸方程為Y＝0.026 1X+0.006 4（r＝0.9989，n＝3）；（3）阿托品:精密吸取0.5 mg·mL－1阿托品適量，加滅菌注射用水分別配制成系列濃度的阿托品對(duì)照品溶液（0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10.0 μ g·mL－1），按擬定的色譜條件分別進(jìn)樣測(cè)定3次，記錄色譜圖，以濃度（X）為橫坐標(biāo)，峰面積（Y）為縱坐標(biāo)繪制曲線，求得阿托品的回歸方程為Y＝11 700X+673（r＝0.999 8，n＝3）。結(jié)果表明，維生素K1、硫酸鎂及阿托品檢測(cè)濃度分別在5～200、2～10和0.2～10.0 μg·mL－1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。高效液相色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 高效液相色譜圖Fig 1 HPLC chromatograms

2.5.3 精密度試驗(yàn):配制維生素K1、硫酸鎂及阿托品低（10、2、0.5 μg·mL－1）、中（50、4、2 μg·mL－1）、高（100、8、5 μg·mL－1）系列濃度的對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣10 μL（n＝5），考察其方法學(xué)精密度。結(jié)果，維生素K1、硫酸鎂及阿托品的RSD分別低于1.20%、3.43%、7.97%。

2.5.4 回收率試驗(yàn):配制維生素K1、硫酸鎂及硫酸阿托品低（10、2、0.5 μg·mL－1）、中（50、4、2 μg·mL－1）、高（100、8、5 μg·mL－1）系列濃度的對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣10 μL。測(cè)定其峰面積或吸光度，代入回歸方程計(jì)算濃度，并計(jì)算回收率。結(jié)果，維生素K1、硫酸鎂及阿托品的平均回收率分別為101.19%、100.69%、98.02%，RSD分別為1.20%、3.43%、7.97%。

2.5.5 配伍液含量測(cè)定:按照臨床實(shí)際用藥濃度，精密吸取“2.1”項(xiàng)下的0.9%氯化鈉和5%葡萄糖配伍液，按擬定的色譜條件，進(jìn)樣測(cè)定維生素K1，將測(cè)定的峰面積代人回歸方程，計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)配伍液中藥物的含量；精密吸取“2.1”項(xiàng)下的0.9%氯化鈉和5%葡萄糖配伍液，按擬定的測(cè)定條件，進(jìn)樣測(cè)定硫酸鎂，將吸光度值代入回歸方程，計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)配伍液中藥物的含量；精密吸取“2.1”項(xiàng)下的0.9%氯化鈉和5%葡萄糖配伍液，按擬定的色譜條件，進(jìn)樣測(cè)定阿托品，將測(cè)定的峰面積代人回歸方程，計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)配伍液中藥物的含量。以配伍即刻時(shí)間（0 h）的含量為100%，計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)3種藥的相對(duì)百分含量，結(jié)果見(jiàn)圖1、表3。

表3 室溫、避光條件下3種藥品在0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液中不同時(shí)間的含量變化（%）Tab 3 Content changes of 3 drugs which were mixed in 0.9%Sodium chloride solution and 5%Glucose solution at different time under the condition of room temperature and being protected from light（%）

3 討論

筆者研究相關(guān)維生素K1注射液配伍穩(wěn)定性的試驗(yàn)報(bào)道[4～7]，發(fā)現(xiàn)其結(jié)果均顯示K1在配伍后隨時(shí)間的延長(zhǎng)含量明顯降低。同時(shí)，筆者也注意到所有報(bào)道中并未在避光條件下進(jìn)行試驗(yàn)，而維生素K1在光照條件下穩(wěn)定性降低是有相關(guān)報(bào)道的[8]。因此，筆者質(zhì)疑維生素K1與其他藥物配伍后含量逐漸降低，真正原因是其在光照條件下不穩(wěn)定降解，并非與其他藥物配伍所致。為了驗(yàn)證光照對(duì)維生素K1的影響，筆者研究了維生素K1水溶液分別在光照和避光條件下的穩(wěn)定性。配制濃度為400 μg·mL－1的維生素K1水溶液，分別在光照和避光條件下于0、1、2、4、6、8 h時(shí)按“2.5.1”項(xiàng)的色譜條件測(cè)定其含量，結(jié)果光照條件下維生素K1水溶液8 h后其含量降低為56.73%，而避光條件下的維生素K1水溶液含量不變（維生素K1含量8 h后為101.45%），色譜圖見(jiàn)圖1（I、J）。由此可見(jiàn)，維生素K1在光照條件下不穩(wěn)定，隨著時(shí)間的延長(zhǎng)含量明顯降低。這一結(jié)論與Ferland等[8]的報(bào)道一致。因此，在研究3種藥配伍時(shí)，筆者均選擇在避光條件下進(jìn)行。研究結(jié)果也證明了在室溫、避光條件下，維生素K1、硫酸鎂及阿托品與0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液配伍后，24 h內(nèi)配伍液外觀、pH值及3種藥物含量均無(wú)明顯變化，可配伍使用。3種藥在0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液中配伍即刻的微粒數(shù)明顯增加，可能是因?yàn)榫S生素K1脂溶性強(qiáng)，在水溶液中溶解緩慢有關(guān)。

綜上所述，為了保證臨床用藥安全、有效，維生素K1、硫酸鎂、阿托品可與0.9%氯化鈉注射液和5%葡萄糖注射液為溶媒在避光條件下24 h內(nèi)配伍使用。

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