小陷胸顆粒中鹽酸小檗堿的含量測(cè)定

羅國(guó)平 孟會(huì)寧 張?jiān)讫?趙寧

“小陷胸顆粒”的中藥處方來(lái)源為“小陷胸湯”，小陷胸湯是《傷寒論》中的一首名方，載于138條之下，原文“小結(jié)胸病，正在心下，按之則痛，脈浮滑者，小陷胸湯主之。”原方組成:黃連一兩，半夏洗半升，瓜蔞實(shí)大者一枚。藥僅三味，法度嚴(yán)謹(jǐn)，用于因邪熱與痰飲結(jié)于胸脘之癥，體現(xiàn)了清熱化痰開(kāi)結(jié)的治法［1］。臨床上用于急性膽囊炎、慢性膽囊炎和膽囊結(jié)石、急性胃炎、慢性淺表性胃炎、十二指腸炎、慢性胃竇炎、慢性結(jié)腸炎、直腸癌、胸膜炎等［2］。“小陷胸湯”為中藥湯劑，由于湯劑存在諸多的缺陷，如久置易發(fā)霉，使用、攜帶不方便等，故將其改成顆粒劑。小陷胸顆粒方中君藥為黃連，黃連中的有效成分為鹽酸小檗堿，本試驗(yàn)采用紫外分光光度法對(duì)顆粒中鹽酸小檗堿的含量進(jìn)行了測(cè)定［3］，用于控制制劑的質(zhì)量，該法操作簡(jiǎn)單，結(jié)果準(zhǔn)確。報(bào)告如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 儀器:SHB-ⅢT循環(huán)水式多用真空泵(鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)有限公司);KQ-250D型分體式數(shù)控超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司);RE-52AA旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(上海亞榮生化儀器廠);BL310電子天平;V-160A型紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(上海第三分析儀器廠)。

1.1.2 試劑:鹽酸小檗堿對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào):110713-200911);小陷胸顆粒(自制);甲醇為分析純。

1.2 方法

1.2.1 溶液的制備

1.2.1.1 對(duì)照品貯備液的制備:稱取鹽酸小檗堿對(duì)照品約10 mg，精密稱定，置100 ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，搖勻，即得。

1.2.1.2 供試品溶液的制備:取小陷胸顆粒，研細(xì)，稱取藥粉約70 mg，精密稱定，置于25 ml容量瓶中，加甲醇20 ml，超聲20 min，放涼后加甲醇至刻度，搖勻后過(guò)濾，取續(xù)濾液5 ml置于25 ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。

1.2.2 最大吸收波長(zhǎng)的選擇:將鹽酸小檗堿對(duì)照品溶液用紫外分光光度計(jì)掃描，波長(zhǎng)范圍為200～400 nm，所得吸收光譜如圖1所示。鹽酸小檗堿對(duì)照品在波長(zhǎng)275 nm、345 nm及385 nm處出現(xiàn)峰值，本實(shí)驗(yàn)選用345 nm作為鹽酸小檗堿的測(cè)定波長(zhǎng)。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備:精密吸取 1、2、3、4、5 ml鹽酸小檗堿對(duì)照品貯備液，分別置50 ml容量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。以甲醇為空白，在345 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，求得吸光度(A)與質(zhì)量濃度(C)的回歸方程為:A=0.0603C －0.0029，r=0.9992(n=5)。結(jié)果表明，在345 nm波長(zhǎng)處，鹽酸小檗堿質(zhì)量濃度在2～10 μg/ml范圍內(nèi)與吸光度線性關(guān)系良好。

圖1 鹽酸小檗堿紫外吸收光譜

1.2.4 精密度實(shí)驗(yàn):將質(zhì)量濃度為6 μg/ml的鹽酸小檗堿對(duì)照品溶液在345 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度(每隔2 h測(cè)定1次，連續(xù)測(cè)定5次)，計(jì)算平均值為0.371，RSD為0.87%。

1.2.5 重現(xiàn)性實(shí)驗(yàn):取同一批樣品5份，按1.2.1.2項(xiàng)下操作，在345 nm處測(cè)吸光度，計(jì)算顆粒中鹽酸小檗堿的含量，計(jì)算平均含量為3.070%，RSD為1.33%。見(jiàn)表1。

表1 重現(xiàn)性試驗(yàn)結(jié)果 %

1.2.6 加樣回收率實(shí)驗(yàn):精密吸取已知鹽酸小檗堿含量的供試品溶液，分別加入占已知含量約80%、100%、120%的鹽酸小檗堿對(duì)照品溶液，每個(gè)濃度2份，共6份，照1.2.1.2項(xiàng)下操作并分別測(cè)定吸光度并計(jì)算回收率，計(jì)算平均回收率為:100.01%，RSD=1.82%。見(jiàn)表 2。

表2 回收率測(cè)定結(jié)果

2 結(jié)果

取自制的小陷胸顆粒3份，照1.2.1.2項(xiàng)下操作，分別在345 nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度，代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程計(jì)算顆粒中鹽酸小檗堿的含量。小陷胸顆粒中鹽酸小檗堿的含量為3.007% ～3.037%，平均值為3.021%，考慮到藥材來(lái)源，以及制劑生產(chǎn)、貯藏等因素，故暫訂本品中鹽酸小檗堿的含量不得少于2.5%。見(jiàn)表3。

表3 小陷胸顆粒中鹽酸小檗堿的含量測(cè)定結(jié)果

3 討論

黃連中含有的鹽酸小檗堿為該類藥品的藥理活性成分，已有十分成熟的測(cè)量方法，如HPLC法、薄層掃描法、紫外分光光度法等［4，5］，本文采用的是第3種方法，對(duì)小陷胸顆粒中的鹽酸小檗堿中的含量進(jìn)行了測(cè)定并作了規(guī)定。該法操作簡(jiǎn)單、結(jié)果準(zhǔn)確，可用于小陷胸顆粒的質(zhì)量控制。

1 石德軍.小陷胸湯的臨床應(yīng)用.河南中醫(yī)藥學(xué)刊，1999，14:44-45.

2 婁志紅，龐曉星，尋延濱，等.鹽酸小檗堿片含量測(cè)定的影響因素和改進(jìn)方法.中國(guó)藥品標(biāo)準(zhǔn)，2010，10:141-143.

3 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部).北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010.附錄 30.

4 陳彤，杜利云.鹽酸小檗堿片含量測(cè)定方法探討.中國(guó)民族民間醫(yī)藥雜志，2002，55:113-114.

5 魏萍，陳新善，孔愛(ài)英.鹽酸小檗堿片含量測(cè)定中樣品溶液制備方法的考察與建議.解放軍藥學(xué)學(xué)報(bào)，2010，25:449-450.