原發性高血壓患者尿液足細胞標志蛋白PCX水平測定及分析

劉冬青，趙蓮英，樊瑞芬，瞿 峰

(1邯鄲市第一醫院，河北邯鄲 056002;2河北工程大學附屬醫院)

近年來，我國原發性高血壓發病率逐漸升高，腎臟是其重要的靶器官。近幾年大量的研究證實，尿液中出現足細胞是診斷腎臟早期微小病變最有效的方法，但其檢查方法繁瑣、臨床應用受限。2011年11月～2012年3月，我們對92例原發性高血壓患者尿液中足細胞標志蛋白Podocalyxin(PCX)、微量白蛋白(mALB)進行了檢測及對比分析，旨在探討PCX在早期腎損害診斷中的應用價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 同期于我院就診的原發性高血壓患者92例(高血壓組)，男54例，女38例;年齡40～76歲。均符合1999年WHO及中國高血壓防治指南高血壓病診斷標準相關規定，收縮壓(SBP)≥140 mmHg和(或)舒張壓(DBP)≥90 mmHg。排除冠心病、糖尿病及腎血管性、慢性腎臟病性高血壓。另選取我院體檢中心的健康體檢者30例作為對照組，兩組一般資料具有可比性。

1.2 尿液中PCX、mALB檢測 兩組均收集清晨首次清潔中段尿10 mL，2 500 r/min離心10 min后取上清，一部分用免疫比濁法測定mALB，試劑盒為英國朗道廠家提供，所用儀器為日立7170全自動生化分析儀。另一部分保存于－80℃低溫冰箱中(避免反復凍融)待檢 PCX:取人足細胞標志蛋白PCX ELISA試劑盒(美國R＆D公司提供)，用純化的抗體包被微孔板，制成固相抗體，向包被單抗的微孔中依次加入PCX抗原、生物素化的抗人PCX抗體、辣根過氧化物標記的抗生物素蛋白，經過徹底洗滌后用底物四甲基聯苯胺(TMB)顯色，用酶標儀在450 nm波長下測定吸光度值，計算樣品濃度。

1.3 統計學方法 采用SPSS13.0軟件進行統計學處理。計量資料用±s表示，正態分布的兩組均數間比較用t檢驗，計數資料采用χ2檢驗，檢驗水準α=0.05。指標間相關性采用Pearson相關分析法。

2 結果

2.1 尿液PCX、mALB水平 高血壓組和對照組尿液 PCX 分別為(4.816 ±1.769)、(2.032 ±0.652)ng/mL，mALB 分別為(46.6 ±10.3)、(11.2 ±5.9)mg/L，組間比較P均 ＜0.01。

2.2 尿液PCX、mALB陽性率 高血壓組和對照組尿液 PCX 陽性率分別為 45.6%(42/92)、0，mALB陽性率分別為28.3%(26/92)、0，組間比較P分別＜0.01、0.05;高血壓組PCX陽性率顯著高于mALB陽性率(P＜0.05)。

2.3 高血壓組尿液中PCX水平與mALB水平的關系 Pearson相關分析顯示，高血壓組尿液中PCX水平與 mALB水平呈顯著正相關，P＜0.05(r=0.749)。

3 討論

足細胞即腎小球臟層上皮細胞，呈趾狀交叉覆蓋于腎小球基底膜最外層，連同基底膜和毛細血管內皮細胞一起，構成腎小球血液濾過屏障。腎小球損傷時足細胞首當其沖，故足細胞損傷和脫落是腎病最早期的病理改變。目前尿液中mALB作為腎早期損傷的常用檢測指標已在臨床廣泛應用。PCX又稱為Podocalyxin相似蛋白1，位于足細胞頂端區，近期研究顯示其為腎臟足細胞表達的帶有大量負電荷的唾液酸黏蛋白，其主要表達在腎小球上皮細胞而不表達于其他的尿道上皮細胞，該蛋白缺乏或改變將最終影響腎小球濾過膜的功能［1］。Hara等［2］證實，腎臟疾病患者尿中排泄的足細胞及其裂解碎片均能反映足細胞損傷程度。Vogelmann等［3］研究提示，即使是凋亡的足細胞仍然表達PCX。因此，目前臨床已將PCX作為檢測各種腎小球疾病患者足細胞的標志分子［4］，用PCX代表和定量尿中足細胞的脫落情況對評價腎小球疾病中足細胞的損傷具有臨床意義。

大量文獻證實，尿中mALB是早期發現腎病最敏感、最可靠的檢測指標［5］。本研究顯示，高血壓組尿液中PCX、mALB水平及陽性率均顯著高于對照組，高血壓組PCX陽性率顯著高于mALB陽性率;Pearson相關分析顯示，高血壓組尿液中PCX水平與mALB水平呈顯著正相關。表明原發性高血壓患者存在足細胞受損的狀態，即高血壓導致足細胞形態結構和相關分子表達異常，進而引起腎小球濾過屏障結構和功能的異常，促使蛋白尿形成;PCX檢測比mALB能更早發現原發性高血壓患者的微小腎損傷，二者聯合檢測可以相互彌補、提高早期腎損傷檢出率［4，6］。筆者認為，對于尿液中 PCX 或者mALB陽性的高血壓患者應及時采取干預措施，如運用血管緊張素轉化酶抑制劑、血管緊張素受體阻斷劑、腎上腺皮質激素保護足細胞、保護腎功能，減少終末期腎病的發生和發展，此對于保護龐大的原發性高血壓人群的健康具有重要臨床意義。

［1］Barisone L，Kopp JB.Update in podocyte biology:putting ones best foot forward［J］.Curr Opin Nephrol Hypirtens，2003，12(3):251-259.

［2］Hara M，Yanagibara T，Kihara I，et al.Apical cell membranes are shed into urine froom injured podocytes:a novel phenomenon of podocyte injuy［J］.J Am Soc Nephrol，2005，16(2):408-416.

［3］Vogelmann SU，Nelson WJ，Myers BK，et al.Urinary excretion of viable podoccytes in health and renal disease［J］.Am J Physiol，2003，285(1):40-48.

［4］Petemann A，Floege J.Podocyte damage resulting in podocyturea A potential diagnostic markerto assess glomerulat disease activity［J］.Nephmn Clin Pmct，2007，106(2):61-66.

［5］韋景勇.尿微量白蛋白檢測在高血壓早期腎損害診斷中的應用價值［J］.臨床合理用藥，2011，4(7):33-34.

［6］陳立平.足細胞及其相關分子在糖尿病腎病中的作用［J］.中國現代醫學雜志，2006，8(16):2478-2483.