泌尿生殖道沙眼衣原體檢測結果的分析

辛青松 何韶堅 修寧寧 張光輝 陳 杰

1.廣東省東莞康華醫院，廣東 東莞 523080;2.東莞市塘廈醫院，廣東 東莞 523000

泌尿生殖道沙眼衣原體 (Chlamydia trachomatis，CT)感染是世界范圍內一種常見的性傳播疾病，其發病率高，流行廣泛，已經發展成較為嚴重的公共衛生問題。女性，其引起的疾病包括宮頸炎、尿道炎、急性輸卵管炎、盆腔炎、異位妊娠、不孕不育等后果;男性引起尿道炎、附睪炎、前列腺炎等，往往病情反復，導致不孕不育癥［1－2］。當沙眼衣原體侵入生殖道后早期多呈現隱匿感染，表現為無癥狀或輕微癥狀而不為病人所重視，其感染在我國有逐漸上升的趨勢［3］。為了解本地區CT感染情況，進行了本次調查，現報告如下。

1 材料和方法

1.1 標本來源 來自東莞康華醫院2010年5月1日至2010年11月30日的泌尿外科、皮膚科、婦產科的標本，共1459例。

1.2 主要試劑和儀器 試劑盒為愛爾蘭Trinity公司，批號T016107，有效期20101226，酶標儀為Clinibio 128C，產地:奧地利;洗板機為DEM－III，產地:北京拓普。

1.3 標本采集 ①女性宮頸樣本采集:先用清潔拭子，清潔宮頸口周圍的分泌物，用拭子插入宮頸管內2～3cm，轉動5～10s后取出，放入傳送管中，于標記處折除棉簽桿，蓋緊管蓋。②男性尿道樣本采集:先用清潔拭子清除尿道口周圍分泌物，后用拭子插入男性尿道2～3cm左右，轉動拭子后取出，于標記處折除棉簽桿，蓋緊管蓋 (囑病人采樣前一小時內勿小便)。③男性尿液標本:采集5ml初段尿(囑病人在采樣之前一小時內不應小便)。

1.4 操作方法

1.4.1 標本處理 標本及質控物，陽性、陰性對照置于預熱板上95～100℃，15min。

1.4.2 主要操作過程 分別將質控物和陽性、陰性對照及標本各100μl加入微孔板置于37±2℃孵育90分鐘;洗板:將抗體試劑100μl加入微孔板中，37℃孵育30分鐘;洗板。再加入100μl酶結合物，37℃孵育30分鐘。

1.4.3 結果判斷 分別加入50μlA和B底物;用酶標儀(主波長450～副波長620nm)雙波長檢測各孔吸光值(A)，S/CO＞1為陽性。

1.5 統計學分析

采用SPSS13.0進行統計學處理，卡方檢驗。

2 結果

表1 不同科室ELISA法檢測的CT陽性率

經卡方檢驗，皮膚科和泌尿外科高于婦產科，比較差異有統計學意義 (P＜0.01)。

表2 不同性別ELISA法檢測的CT陽性率

經卡方檢驗，男性和女性陽性檢出率比較差異有統計學意義 (P＜0.01)。21～30歲和31～40歲年齡組明顯高于其它年齡段。

表3 不同年齡段ELISA法檢測的CT陽性構成比

3 討論

3.1 沙眼衣原體在宿主細胞內生長繁殖，是一類專性細胞內寄生，具有特殊的發育周期，能通過細胞濾器的原核細胞型微生物。其特殊發育周期，可觀察到兩種不同的顆粒結構，一種是原體，具有高度的感染性，其形態多為球形，直徑約為0.3μm;一種是網狀體，沒有感染性，圓形或不規則形，直徑約為0.5～1.0μm甚至更大。一般認為網狀體在包涵體中以類似普通細菌的二分裂方式增殖，經過若干次分裂之后，網狀體濃縮成具有堅韌細胞壁的原體，并從細胞破裂釋放，繼而感染其他細胞，開始新的發育周期，每個發育周期需要48～72小時［4］。

3.2 本實驗CT陽性檢出率為9.87%，與國內其他文獻報道不一致，王新等報道為 7.2%［5］，王麗等報道為33.67%［6］，這可能是由于檢測的試劑盒不同及CT血清型存在地區差異或變異等原因造成［5］。本實驗發現不同科室的陽性檢出率有明顯差異 (x2=35.17，P＜0.01)，皮膚科為25.0%，泌尿外科為17.58%，婦產科為7.60%，皮膚科和泌尿外科遠高于婦產科，通過隨訪臨床發現，過來就診皮膚科和泌尿外科的病人大多都是因為出現有尿道或陰道搔癢等不適癥狀，就診目的明確。除去試劑盒敏感性差異、血清型存在地區差異或變異、實驗操作原因外，取樣的質量對衣原體的檢測結果極為重要［5］。例如我院患者做檢測時，通常衣原體和支原體同時分別取材送檢，由于取第1根拭子時可能已經帶走取樣部位大部分被感染的細胞，在同樣部位取樣的第2根拭子會因感染細胞的減少而使陽性率降低。

3.3 本實驗發現不同性別的陽性檢出率有明顯差異，男性為18.46%，女性為7.14%，差異有統計學意義 (x2=38.54，P＜0.05)。本實驗與王麗等報道CT陽性檢出率女性高于男性［6］不一致，我們經回顧資料分析發現男性標本來自皮膚科和泌尿外科標本量少，提醒我們在以后CT檢測中注意收集更多男性資料，再做進一步探究。

3.4 本實驗發現不同年齡段的CT陽性構成比有明顯差異，主要集中在21～30歲和31～40歲年齡組，與 Araujo的“年齡是泌尿生殖道沙眼衣原體感染的危險因素”［7］相一致，說明沙眼衣原體的感染與年齡有關，特別是21～40歲是性活動頻繁時期，CT感染主要通過性傳播途徑而引起，為有效控制病原體的傳染，高危年齡段人群要做到定時體檢，盡早發現，及時治療，不要因為沒有癥狀就拒絕檢查和治療，同時提倡安全套的推廣使用。

3.5 目前CT檢測中，細胞培養法的敏感性為80～90%，特異性為100%，是確診沙眼衣原體感染最可靠的方法，是實驗室診斷的金標準［3］，但對操作環境及技術要求高，較難在臨床實驗室推行。酶聯免疫法和膠體金法檢測衣原體抗原設備要求低，一般實驗室即可滿足條件，有著前幾種方法不可比擬的優點，操作也較簡便、快速。尤其是膠體金法時間更短，1h之內便可以出結果。幸彩梅報道，雖然在沙眼衣原體檢測方面，膠體金檢測卡普遍使用，但方法學上存在靈敏度低的問題，ELISA法較膠體金法敏感度高，對男性標本，陽性檢出率較膠體金高［8］。ELISA法敏感度高、快速、操作簡便，可以為無癥狀的就診病人提供快速檢測，更適用于臨床檢測。

［1］王千秋.重視生殖道沙眼衣原體感染的防治［J］.中華皮膚科雜志，2007，40(5):257－259.

［2］MA.Guven，U.Dilek，O.Pata，S Dilek，P.Ciragil.Prevalance of Chlamydia trachmatis.Ureaplasma urealvticum and Mycoplasma hominis infections in the unexplained infertile women. Arch Gynecol Obstet，2007，276:219－223.

［3］徐麗玲，顧偉鳴，楊陽，等.1996－2003年上海市某醫院泌尿生殖道分泌物標本性病檢測結果分析［J］.中國艾滋病性病，2005，11(02):121－124.

［4］倪語星，尚紅.臨床微生物學與檢驗［M］，第4版，北京:人民衛生出版社，2008:315－329.

［5］王新，韓麗華.581例泌尿生殖道支原體、衣原體感染耐藥性分析及對策.中華醫院感染學雜志，2007，17(6):752－754.

［6］王麗，王金桃.性病就診人群非淋球菌性尿道炎病原學的感染特征分析.中國艾滋病性病，2007，13(1):50－51.

［7］Araujo RSC，Guimaraes EMB，Alves MFC，et al.Prevalence and risk factors for Chlamydia trachomatis infection in adolescent females and young women in central Brazil［J］.Eur J Clin Microbiol infect Dis，2006 Jun;25(6):397－400.

［8］幸彩梅.二種沙眼衣原體抗原檢測方法比較與評價［J］.海南醫學雜志，2009，20(3):92－93.