青蒿最佳收割時期及青蒿葉末合理制備方法探討

劉遠志 郭玲 韓雪瓊 李杰 倪均

[摘要] 通過對青蒿生長過程中青蒿素的測定，指導種植戶收割青蒿最佳時期、青蒿葉末合理制備、種植區域，防止盲目收割野生青蒿而破壞生態平衡，導致資源枯竭，同時還可提高資源的利用率，增加經濟效益。

[關鍵詞] 青蒿；收割時期；青蒿葉末

瘧疾是世界上流行非常廣，發病率和死亡率都非常高的熱帶寄生蟲傳染病。據世界衛生組織的報告，世界上有100多個國家為瘧疾流行區，全球約25億人生活在疫區，約22億人受瘧疾的威脅，每年有300萬-500萬瘧疾臨床病例，病死人數為110-270萬，在非洲，對治療瘧疾有效藥物的需求是非常巨大的[1]。因此，種植、開發青蒿很有前景。另外，這種病能影響兒童生長和發盲，導致貧血和出生低體重兒、孕婦得婦科病和貧血等[2]。

青蒿入藥在《神農本草經》、《本草綱目》等書中均有記載。1972年我國科學家在整理民間驗方及實踐的基礎上從青蒿中分離出這種活性物質（青蒿素）。青蒿素類藥物是中國人自主研發的擁有知識產權的中藥藥物，其治療惡性瘧疾效果尤其顯著，世界衛生組織己將其作為治療瘧疾的基本藥物。隨著對該類藥物藥理作用研究的不斷深人，證實此類藥均具有抗藥、抗孕、抗纖維化、抗血吸蟲、抗弓形蟲、抗類風濕性關節炎、抗心律失常、抗菌素腫瘤細胞毒性、抗免疫、結核病潮熱、中暑、皮膚痛、蕁麻疹、脂溢性皮炎、滅蚊和解熱等作用[3]。此外，還有治療艾滋病、黑熱病、紅班狼瘡及白血病等病的作用[4]。近年來研究發現青蒿素對血癌和乳腺癌細胞具有高選擇性，是其他化學療法的100倍，而且青蒿素可以殺死癌細胞，但不傷害周圍健康細胞[5]。青蒿素類產業主要原料資源在中國，世界衛生組織及聯合國兒基會對中國青蒿素類藥物需求量大，現有產量遠遠不能滿足市場需要。

青蒿素是一年生草本植物，為菊科艾屬植物黃花蒿。株高40-150cm以上，全生育期120d左右。喜濕潤、忌干旱、怕漬水，光照要求充足。青蒿素原料是武陵山區的青蒿草，該區域地理環境、氣候條件適合青蒿的生長，尤其是烏江流域中下流（秀山、酉陽、彭水、黔江、武隆、涪陵）地處武陵山區，擁有豐富的野生青蒿資源，全球青蒿供應量80%來自重慶酉陽，世界衛生組織2005年從酉陽購買了1億劑量的青蒿素類抗瘧藥。現在，青蒿素用藥缺口每年為總需求的40-60%，估計填補全球青蒿種植的空缺需要15-20年[6]。因此，野生青蒿遠遠不能滿足市場需要，同時長期采伐會造成生態平衡失調，人工種植面積也較少，為解決供需矛盾，要把重慶市切實建成全球最大青蒿供應基地，就應該利用好烏江流域的地理環境優勢，擴大種植優質青蒿已迫在眉睫，這樣不但能解決青蒿素的國際市場的需求，也能保護野生資源和帶動地方經濟發展。青蒿素藥材分布廣泛，且類似品種較多，類型混雜，不同產地，不同生長期青蒿素含量差異較大，據測定，歐洲和美國青蒿中青莆素的含量在0.03%-0.22%之間[7]，中國和越南人工種植的青蒿中青蒿素含量平均在0.3%-0.8%之間，烏江流城含量最高（酉陽野生青蒿中青蒿素含量至今保持全國最高記錄0.9%-1.3%）[8]。為了更好、更充分地利用烏江流域獨有的地理環境和氣候條件，提高資源的利用率，增加經濟效益，指導農民正確種植、適時收割、合理制備青蒿葉末意義重大，同時還為烏江流域青蒿的質量評價和進一步加速開發該中藥資源提供科學依據。

一、試驗部分

1.監測點選擇

以烏江流域中下游為主干，從上游至下游，按海撥從高至低的順序，選擇了秀山（平均種植海撥高度900m）、酉陽（平均種植海撥高度700m）、彭水（平均種植海撥高度600m）、武隆（平均種植海撥高度500m）、涪陵（平均種植海撥高度300m）五個區縣，較大型（0.6一1.33hm2）種植戶5戶作為監測對象。

2.種植戶土質要求

根據青蒿最佳生長條件要求，海撥在800m以下的灰棕紫泥土（五區的土質有60%為灰棕紫泥土）均可種植。

3.品種選擇

選擇高質、穩產、耐旱、抗病、節肥、省力且在重慶大面積推廣的優良青蒿品種（市購）

4.田間管理和試驗要求

將良種青蒿種子，統一發放給五區種植戶，由專職的農技員根據青蒿的生長特性，對農戶進行統一規劃，統一管理。具體要求如下：

（1）播種時間：烏江沿岸海撥1000m以下區域，每年3月中旬期間均可播種，五個監測區播種時間統一定為3月15-30日。

（2）幼苗假植：應選擇澆水方便的土地，起廂種植。要求廂面積寬1·2m，假植規格株行距10一l5cm。假植后加強肥水管理，可用腐熟人糞尿或畝用復合肥5Kg沖糞水淋施，做到勤施薄施。大約假植18-20d左右（氣溫低時約需20-25d），當植株生長到l0cm-l5cm時，即可移至土壤或大田種植。

（3）移栽地準備：土壤經深翻梨耙、碎土，每畝施腐熟農家肥或土雜肥1000-1200Kg，磷肥25-30Kg作基肥，開溝起廂種植。起廂規格為：寬1.2m，溝寬0.4m，溝探0.2-0.5m，每廂種兩行，株行距為0.8X0.8m-

（4）適時移栽當假植苗達到10-l5cm時進行移栽，移栽時選擇陰天或睛天下午進行。栽后淋足定根水。合理密植，畝植1000株左右。

（5）田間管埋：移栽后應加強田間管理。做到科學施肥，合理排灌。可分三個階段施肥，第一個階段：移栽一個皇期左右輕施復合肥或農家肥，畝用復合肥5-7K9或用0·3%的復合肥水淋施：第二階段：移栽15-20d，每畝開穴施復合肥l4K9左右或腐熟農家肥，施肥后進行復土。第三階段：移栽35-45d后，畝施25Kg復合肥或農家肥，結合培土。大田種植要防漬水，在雨季注重排除漬水，干旱時要及時澆灌。

（6）病蟲害防治

①病害 青蒿主要病害是莖腐病。在多雨季節，如發生莖腐病，可用滅菌威或托布津防治。

②蟲害 青篙主要害蟲有蚜蟲，應在其遷飛擴散前噴藥，畝用40%樂果或20%速滅丁或蚜虱凈等噴霧防治。

5.監測對象

五區人工種植的青蒿幼苗、返青苗、花蕾初期（老枝出現花蕾）、花蕾期（花蕾初期的第3d作為花蕾1期，以后每3d作為1個花蕾期）、成熟晚期（花蕾再生極少且有少許葉再泛黃）青蒿子葉，在對應時期采集野生青篙同時進行青蒿素的測定。

6.樣品采集和制各

每個監測基地按五點法采集，野生青蒿隨機采集。取其子葉，在曬場曬干，打落其子葉，子葉繼續曬干至符合收購要求或取其子葉在800C的烤箱中殺青30min，隨后在400C的烤箱中烘烤至恒重。將干子葉粉碎過60目篩制成葉末，留作檢測用。

7.青篙素檢測

（1）樣品處理：精確稱取青蒿葉末約0·5-1·09g于燒杯中，加入50mL石油醚，振搖30min，用組織勻漿機以13500r/min勻漿3min，然后轉人G4垂容濾斗中進行抽濾，并不斷用石油醚洗至無色，加大5OmL（20，20，10）2%氫氧化鈉溶液洗滌G4垂容濾斗中的內容物，將收集的濾液在振蕩器上振搖5min，棄去下層濾液中的堿液后，以蒸餾水洗至中性。經水洗后的提取液置于圓底燒瓶中以550C減壓蒸餾，得到青蒿素的浸膏，最后用95%乙醇溶解，定容至50m1待測，同時作試劑空白[9]。

（2）樣品測定：吸取樣品處理液2·0m1，補加95%乙醇至5·0mL，最后加入0·2%氫氧化鈉溶液至50mL，在550C的水浴中反應30min后取出，冷至室溫。在L=l0mm，λ=292nm，以"o"管調零，測定吸光度值（A）。

（3）標準曲線的制備：按試驗方法[10]進行測定[10]，繪制青蒿素濃度對吸光度的曲線，其線性方程A=21.14CS-0.02048，r為0·9997，將樣品測得的吸光度值（A），按線性方程計算出青蒿葉末中青蒿素的含量（%）。

二、結果與討論

⒈四個監測區，青篙不同生長時期，青篙素含量記錄

（1）不同海撥高度在250-950m五個監測區，人工種植的青蒿，在不同生長時期，青蒿素含量（%）檢測記錄（見表1）

根據表1：作青蒿在整個生長過程中青蒿素含量分布圖（見圖1）胡不同海拔高度花蕾4期青蒿素含量分布圖（見圖2）。從圖2可知：青蒿最宜種植在海拔高度為700m左右。

（2）不同海撥高度在250-950m五個監測區，野生青蒿，在不同生長時期，青蒿素含量（%）檢測記錄（見表2）

從表1和表2，我們發現：無論是人工種植還是野生青蒿，在它的整個生長過程中，以花蕾期青蒿素含量最高，尤其是在花蕾4期，青蒿素含量達到極至。

（3）選人工種植青蒿，用自然曬干和人為烘干兩種方法制作青蒿葉末，其有效成分保存情況的監測記錄（以青蒿素計：%）（見表3）

從表3可知如果以人為烘干法測得的青蒿素為基質，則自然曬干比人為烘千青蒿素損失將在6-30%之間。

三、結論

1.種植青蒿最好選擇在海撥高度為700m左右區域進行種植。

2.青蒿宜花蕾初期計算在第15一18日4d內收割完畢。

3.建議青蒿葉末制備方法仿照烤煙烘干法，這樣可以避免因空氣濕度過大或綿雨天造成不必要的損失，增加經濟效益，同時提高青蒿有效成分的利用率。

4.通過該項目的研究，可以防止盲目收割野生青蒿而破壞生態平衡，導致資源枯竭。同時為武陵山區青莆的質（下轉第157頁）量評價和進一步加速開發該中藥資源提供科學依據。

參考文獻

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[2] 戰雅蓮·006WHO批準用青蒿素治療非洲瘧疾[J].國外醫藥.植物藥分冊.2006，21（1）：70-21

[3] 鄭全芳，楊志剛，孫紅祥.青篙素及其衍生物藥理作用研究進展[j].中國獸藥雜志.2006，4（1）：40-44.

[4] WuTs，etaI.New constituents and anti platelet aggregation and anti-HIVpincipies of Artemisia capillaries [J].BioorgMedChem，2001，9（1）：77.

[5] 陳立軍，靳秋月，于利人等·青篙素及其衍生物抗腫瘤研究進展「J]·中草藥，2005，36（11），1754-1755

[6] 廣西青蒿（黃花篙）產業發展規劃.2005

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[9] 秦宗會，謝朝懷..組織勻漿法快速測定青篙素探討.中國衛生檢驗雜志.2007

[10] 李中棟，周全，趙長文等.青篙素固體分散物的，備及體外溶出研究.中國藥學雜志