透明質酸對創面膠原代謝的影響

譚新東　李希軍　葉雪玲

[摘要]目的：通過觀察外源性透明質酸（HA）對兔耳創面膠原代謝的影響，探討外源性透明質酸在傷口愈合中的作用。方法：18只日本大耳白兔，建立兔耳創傷愈合模型后，隨機分成2%HA治療組（A組），1%HA治療組（B組）和生理鹽水對照組（C組）。觀察創面愈合及瘢痕形成情況，術后第3、7、10、14、18天取標本勻漿后測定羥脯氨酸（HPr）含量，將數據進行統計學處理。結果：A、B兩組羥脯氨酸含量明顯低于C組（P<0.01），A、B兩組間也有統計學差異（P<0.05）。A、B兩組創面愈合相對C組延遲，形成瘢痕小于C組。結論：外源性HA能夠抑制成纖維細胞合成膠原，延遲創面愈合，減少瘢痕形成，其作用有劑量依賴性。

[關鍵詞]透明質酸；創面愈合；羥脯氨酸

[中圖分類號]Q591.2 [文獻標識碼] [文章編號]1008-6455（2012）08-1332-02

如何通過干預創傷愈合的過程來促進創傷愈合，減少瘢痕形成一直是醫學研究的一個熱點。近年來，有許多關于應用生長因子、藥物等減少創面瘢痕形成的研究報道，并取得了一些效果[1-3]。透明質酸（HA）是重要的創傷愈合細胞外基質，具有抗炎、調控膠原合成、促進創傷愈合等作用[4]。筆者通過觀察HA對兔耳創面愈合前后組織中羥脯氨酸（HPr）測定，為外源性HA對創面愈合及瘢痕增生中膠原的代謝提供了研究資料。

1材料和方法

1.1 實驗動物、試劑和儀器

1.1.1 實驗動物：健康日本大耳白兔（2.0～2.5kg）18只（南方醫科大學動物實驗科）。

1.1.2 實驗試劑：HA：分子量Mr 6×106～7×106，由人臍帶中提取（德國SIGMA公司）。L-HPr（中國科學院上海生物化學研究所）。

1.1.3 實驗儀器：玻璃勻漿器（上海醫療器械廠）。分光光度計（Beckmen，USA）。

1.2 實驗方法

1.2.1 動物模型的建立及分組：18只動物隨機分成A、B、C 3組，每組6只，以速麻安（0.1ml/kg）肌注麻醉后，兔耳腹側面皮膚碘酒、酒精消毒，用圓規在皮膚表面刻畫出6個直徑為1cm的圓，內外側各3個，間隔1.5cm，切除圓內皮膚及皮下軟骨。每組72個創面，共216個創面。HA每次使用前用生理鹽水臨時配置成2%和1%的HA溶液。A組創面用兩層1cm×1cm紗布浸潤2%HA溶液覆蓋，再以干的無菌紗布墊于兔耳內側面，將兔耳內卷，膠布固定。B組創面外用1%HA溶液，C組創面外用生理鹽水溶液作為對照組，方法同上。每日換藥一次，直至創面愈合。愈合后，A組應用2%HA溶液，B組應用1%HA溶液，C組應用生理鹽水，以微量注射器進行瘢痕內注射，每次0.05ml，隔日一次，共3次。

2結果

3討論

透明質酸（HA）是由葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖以β糖苷鍵連接起來的重復二糖直鏈高分子聚合體。是細胞外基質的主要組成成分之一。HA在創傷愈合中具有抗炎、調控膠原合成、促進創傷愈合等作用[4]。筆者利用兔耳增生性瘢痕模型對HA調節膠原代謝的作用進行了觀察。從表1可以看出，對照組兔耳皮膚創面愈合后HPr的含量仍持續增加（術后10～18天），這與大體觀察到的瘢痕增生時間相一致。HA治療組HPr的含量增加緩慢，明顯低于對照組，而2%HA治療組的HPr含量又低于1%HA治療組。說明外源性HA能夠抑制成纖維細胞合成膠原，并且有劑量依賴關系。本實驗同時觀察到HA治療組創面愈合時間延長，愈合后瘢痕小，說明創面外用HA能延遲創面愈合，減少瘢痕形成。這與有的文獻報道[5-7]HA的促進創面愈合的結論相矛盾。實際上高分子量的HA和低分子量的HA其生物學作用正好相反[8]。外緣性和內緣性HA的生物學作用也不相同[9]。低分子量的HA具有促進細胞的移動、增殖、分化和吞噬的作用，而高分子量HA由于其物理性質粘稠，抑制了細胞在創面內的遷移。本研究采用的HA（分子量Mr 6×106～7×106）是高分子量HA，因此筆者的實驗結果與其他文獻報道并不矛盾。由于外緣性高分子量HA抑制了成纖維細胞在創面內的遷移增殖和分化，因此減少了創面膠原堆積，延遲了創面愈合。同時增生性瘢痕的形成是由于成纖維細胞持續合成大量的膠原纖維導致膠原纖維在皮膚中過量沉積而引起的。HA通過抑制成纖維細胞合成膠原而抑制增生性瘢痕的形成。HA還能夠抑制肌成纖維細胞的出現[10]，而肌成纖維細胞是具有收縮性和高度分泌活性的、可以促進創面愈合和瘢痕形成成纖維細胞，從而是延遲創面愈合。這些報道與筆者觀察到的外緣性高分子量HA延遲創面愈合，減少增生性瘢痕形成的作用相一致。

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[收稿日期]2012-04-03[修回日期]2012-06-27

編輯/張惠娟