Skp2在大腸癌大腸腺瘤及正常大腸黏膜中的表達及臨床意義

劉鏡文 魏茂富 楊延莉

[摘要] 目的探討大腸癌、大腸腺瘤和正常大腸黏膜中Skp2蛋白表達的臨床意義。方法采用免疫組化方法,分別檢測大腸癌、大腸腺瘤和正常大腸黏膜中Skp2蛋白的表達。 結果 大腸癌、大腸腺瘤和正常大腸黏膜中Skp2蛋白表達率分別為76%（57/75）、36.7%（11/30）、16%（4/25），大腸癌與大腸腺瘤、正常黏膜比較，差異有統計學意義（P ＜0.05），大腸腺瘤與正常黏膜比較，差異無統計學意義（P ＞ 0.05）。Skp2蛋白在有淋巴結轉移的大腸癌組織中陽性率為92.3%（24/26），明顯高于無淋巴結轉移的大腸癌組織67.3%（33/49）, 差異有統計學意義（P ＜ 0.05）；其表達與其他病理及臨床因素無統計學意義（P ＞ 0.05）。 結論 Skp2的表達與大腸癌的發生及轉移有密切關系,陽性表達對預測大腸癌發生淋巴結轉移具有指導意義。

[關鍵詞] Skp2；大腸腺瘤；大腸癌；正常大腸黏膜

[中圖分類號] R735.3+4[文獻標識碼] B[文章編號] 1673-9701（2012）12-0115-02

大腸癌的死亡原因主要是肝、肺等內臟器官的遠處轉移，所以抑制腫瘤的遠處轉移是治療大腸癌的重要手段。細胞S期激酶相關蛋白2（Skp2）屬于F-box蛋白家族，F-box蛋白是泛素蛋白連接酶的組成部分。Skp2可特異識別并降解p27[1]，p27發生酶解后，誘導細胞從G期進入S期。近年來，腫瘤的研究中發現Skp2有原癌基因的功能，可以誘導癌細胞從G期進入S期，與多種惡性腫瘤的生成及進展關系密切 [2]。本實驗旨在研究大腸癌、大腸腺瘤和正常大腸黏膜中Skp2蛋白表達及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

收集我院2000年3月～2011年8月大腸癌75例、大腸腺瘤30例、正常大腸黏膜25例。大腸癌患者中,男女比例為40:35，年齡28～82歲，平均59.2歲。其中腺癌WHO Ⅲ級48例，腺癌（WHOⅡ級）22例,腺癌（WHOⅠ級）5例。伴淋巴結轉移26例。腫瘤臨床TNM分期：Ⅰ 期至Ⅳ期分別為11例，29例，25例，10例。

1.2 所用試劑及方法

所用抗體及試劑盒來自基因公司。標本用10%中性甲醛固定,常規石蠟包埋,3μm厚度切片,S-P法染色, DAB顯色,蘇木精復染細胞核。

1.3 評估標準

細胞核出現黃色或棕黃色顆粒狀物為陽性。根據文獻[3]染色強度及陽性細胞數百分比進行計分。Ⅰ：染色強度：不著色至棕黃色分別為0至3分。Ⅱ：陽性細胞百分比：＜5%計0分，6%～25%計1分，26%～50%計2分，51%～75%計3分，＞75%計4分。Ⅰ×Ⅱ＞3分為陽性。

1.4 統計學方法

統計學處理應用SPSS10.0軟件，計數資料進行χ2檢驗, P ＜ 0.05差異有統計學意義。

2 結果

在大腸癌、大腸腺瘤和正常大腸黏膜中Skp2蛋白表達（圖1、2、3）分別為76%（57/75）、36.7%（11/30）、16%（4/25），大腸癌與大腸腺瘤、正常黏膜對比差異有統計學意義（P ＜ 0.05），大腸腺瘤與正常黏膜對比差異無統計學意義（P ＞ 0.05）。 見表1 。Skp2蛋白在有淋巴結轉移的大腸癌組織中陽性率為92.3%（24/26）,明顯高于無淋巴結轉移的大腸癌組織67.3% （33/49）, 差異有統計學意義（P ＜ 0.05）；其表達與其他病理及臨床因素無統計學意義（P ＞ 0.05）。見表2 。

3 討論

大量研究表明，腫瘤的發生具有復雜的分子基礎,包括腫瘤抑制基因的滅活或丟失、原癌基因的激活、凋亡調節基因和DNA修復功能紊亂及微小RNA調節紊亂等。遺傳因素和環境因素通過影響這些基因的結構和功能導致腫瘤的形成。任何原因導致的腫瘤形成,都以細胞周期調控機制紊亂為最終表現。細胞周期是由細胞周期蛋白和細胞周期蛋白依賴性激酶進行正調節, 由細胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑進行負調節。Zhang H [4]在突變的細胞中發現3種蛋白（命名為p9，p19，p45）能影響Cyclin-CDK2的功能，即Cksl(或Cks2)、Skp1和Skp2。通過注射Skp2抗體或阻斷Skp2的功能，使細胞不能進入S期，所以Skp2的表達改變與細胞周期的調控相關。很多實驗表明，腫瘤的惡性程度與Skp2的蛋白表達水平呈正相關。Latres E[5]研究發現大鼠腫瘤發生率上升、生存期縮短與導入Skp2基因相關。本研究結果顯示，在大腸癌、大腸腺瘤和正常大腸黏膜中Skp2蛋白表達分別為76%（57/75）、36.7%（11/30）、16%（4/25），大腸癌與大腸腺瘤、正常黏膜對比差異有統計學意義（P ＜0.05），大腸腺瘤與正常黏膜對比差異無統計學意義（P ＞ 0.05）。Skp2蛋白在有淋巴結轉移的大腸癌組織中陽性率為92.3%（24/26），明顯高于無淋巴結轉移的大腸癌組織67.3% (33/49), 差異有統計學意義（P ＜0.05 ），其表達與其他病理及臨床因素無統計學意義（P ＞0.05）。我們認為，Skp2的表達與大腸癌的發生及淋巴結轉移有密切關系,陽性表達對預測大腸癌發生淋巴結轉移具有指導意義。

[參考文獻]

[1]Ungermannova D，Gao YF，Liu XD． Ubiquitination of p27 reguires physicalinteraction with cyelin E and probable phosphate recognition by Skp2[J]．J Biol Chem， 2005，280（34）:30301-30309．

[2]Yokoi S. A novel target gene, SKP2, within the 5p13 amplicon that is frequently detected in small cell lung cancers[J]． Am J Pathol, 2002,161（1）:207-216.

[3]Liu WH, Kaur M, Wang G. Inverse PCR-based RFLP scanning identifies low-level mutation signatures in colon cell and turmors[J]． Cancer Res,2004 ,64（7）:2544-2551.

[4]Zhang H,Kobayashi R,Galaktionov K,et al. P19 Skp1 and p45 Skp2 are essential elements of the cyclin A-CDK2 S phase kinase[J]．Cell， 1995 ,82（6）:915-925.

[5]Latres E，Chiarle R，Agano M． Role of theF-box protein Skp2 in lymphomagenesis[J]． Proc Natl Acad Sci USA, 2001，98(5):2515-2520.

（收稿日期：2011-12-31）