倍氯米松尿素乳膏中丙酸倍氯米松的含量測(cè)定

齊雅雯 姜?dú)g歡

[摘要] 目的 建立高效液相色譜法測(cè)定倍氯米松尿素乳膏中丙酸倍氯米松含量的方法。 方法 色譜柱（菲羅門C18 4.6 mm×150 mm，4 μm），以甲醇-水（82∶18）為流動(dòng)相，流速1.0 mL/min，檢測(cè)波長(zhǎng)240 nm。 結(jié)果 線性范圍（0.94～4.72）μg/mL（r = 0.999 99），高、中、低濃度的平均回收率分別為101.46%、101.35%、101.57%，RSD分別為0.29%、0.17%、0.77%。 結(jié)論 該法分離度好、快速、簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好，可用于倍氯米松尿素乳膏的質(zhì)量控制。

[關(guān)鍵詞] 倍氯米松尿素乳膏；高效液相色譜法；丙酸倍氯米松；含量測(cè)定

[中圖分類號(hào)] R927.2[文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] B[文章編號(hào)] 1673-9701（2012）12-0064-02

倍氯米松尿素乳膏是衢州市皮膚病性病醫(yī)院的醫(yī)院制劑，適用于過(guò)敏性與炎癥性皮膚病和相關(guān)疾病，如濕疹、過(guò)敏性皮炎、接觸性皮炎、神經(jīng)性皮炎、扁平苔蘚、盤狀紅斑狼瘡、掌跖膿皰病、瘙癢、銀屑病等。為了更有效地控制產(chǎn)品質(zhì)量，參考相關(guān)文獻(xiàn)[1-5]建立了測(cè)定產(chǎn)品中倍氯米松含量的高效液相色譜法。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

高效液相色譜儀：島津LC-10AD泵，SPD-10A紫外檢測(cè)器，色譜柱（菲羅門C18 4.6 mm×150 mm，4 μm），N2000色譜工作站；電子天平：MettlerAE240；超聲波清洗器；紫外分光光度計(jì)：島津UV2450。

1.2 試藥

丙酸倍氯米松對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供）；甲醇為色譜純，水為去離子水；空白基質(zhì)，倍氯米松尿素乳膏3批由衢州市皮膚病性病醫(yī)院提供，規(guī)格為25 g，每克中含丙酸倍氯米松0.25 mg。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

色譜柱（菲羅門C18 4.6 mm×150 mm，4 μm），以甲醇-水（82∶18）為流動(dòng)相，流速為1.0 mL/min，240 nm檢測(cè)波長(zhǎng)，20 μL進(jìn)樣量，柱溫為室溫，用外標(biāo)法定量峰面積。在此色譜條件下，出峰時(shí)間為4.9 min，理論塔板數(shù)均在2 000以上，陰性對(duì)照品無(wú)干擾，分離度達(dá)到要求。

2.2 線性關(guān)系

將105℃干燥至恒重的丙酸倍氯米松對(duì)照品約0.011 80 g精密稱取后置100 mL量瓶中，加入甲醇-水使其溶解，稀釋至刻度，搖勻，精密量取該溶液5 mL，置100 mL量瓶中加甲醇-水至刻度，即得對(duì)照品儲(chǔ)備液[2-4]，精密量取此儲(chǔ)備液2、3、4、5、6、8、10 mL分別于50 mL量瓶中，加入甲醇-水稀釋至刻度，搖勻，依據(jù)上述色譜條件進(jìn)樣20 μL，記錄峰面積，以峰面積A為縱坐標(biāo)，濃度C為橫坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得回歸方程為Y=647X+4.2×104（r = 0.999 99，n = 7），線性范圍為（0.94～4.72）μg/mL。

2.3 精密度試驗(yàn)

取丙酸倍氯米松樣品，重復(fù)進(jìn)樣5次，按2.7項(xiàng)下樣品含量測(cè)定方法測(cè)定日內(nèi)精密度，結(jié)果RSD為0.88%（n = 5）。

2.4 重復(fù)性試驗(yàn)

取同一批號(hào)樣品5份，按2.7項(xiàng)下含量測(cè)定方法進(jìn)行樣品測(cè)定，結(jié)果丙酸倍氯米松含量平均值為103.85%，RSD=0.54%（n = 5）。

2.5 穩(wěn)定性試驗(yàn)

分別對(duì)2.3項(xiàng)下丙酸倍氯米松樣品進(jìn)樣20 μL，在0、2、4、6、…… 24 h按照2.7項(xiàng)下含量測(cè)定的條件進(jìn)行峰面積測(cè)定，計(jì)算含量，結(jié)果RSD=0.60%，說(shuō)明樣品在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.6 回收率試驗(yàn)

取空白基質(zhì)9份各0.5 g，精密稱取分別置50 mL容量瓶中，再精密稱取丙酸倍氯米松對(duì)照品0.011 80 g，置25 mL量瓶中，用流動(dòng)相溶解后，繼續(xù)用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，精密量取上述溶液5 mL置100 mL量瓶中，加流動(dòng)相至刻度并搖勻，精密量取6、5、4 mL各3份分別加入上述9份容量瓶中，按2.7項(xiàng)下含量測(cè)定方法處理。

2.7 樣品含量測(cè)定

分別取樣品三批約0.5 g，精密稱取，混勻后置50 mL量瓶中，加流動(dòng)相30 mL于80℃水浴中加熱溶解后置超聲波清洗器中超聲15 min，放置室溫，用流動(dòng)相稀釋至刻度，搖勻，置冰浴中冷卻2 h，馬上濾過(guò)，取續(xù)濾液，作為樣品溶液。另精密稱取丙酸倍氯米松對(duì)照品0.014 62 g置于50 mL量瓶中，用流動(dòng)相溶解并稀釋至刻度，搖勻，再取2 mL，精密量取置200 mL容量瓶中加流動(dòng)相至刻度，搖勻，作為對(duì)照品溶液。分別取上述三批樣品溶液和對(duì)照品溶液20 μL進(jìn)樣，按外標(biāo)法計(jì)算百分標(biāo)示量，結(jié)果見(jiàn)表2。

3 討論

3.1 溶液配備

3.1.1 水浴熱溶丙酸倍氯米松軟膏黏性大，樣品的溶解與濾過(guò)受到影響。直接溶解、過(guò)濾時(shí)，樣品損失較大。經(jīng)試驗(yàn)，通過(guò)水浴加熱加快樣品的溶解，同時(shí)，溶解后的樣品溶液經(jīng)冷卻處理后則濾過(guò)完全。結(jié)果表明，此方法操作簡(jiǎn)便，準(zhǔn)確性高，穩(wěn)定性好，重復(fù)性好，可作為丙酸倍氯米松軟膏含量測(cè)定的方法。采用本法測(cè)定80℃水浴加熱提取時(shí)要防止流動(dòng)相噴出。

3.1.2 流動(dòng)相超聲丙酸倍氯米松在本品中含量很少，有效的提取方法是含量測(cè)定準(zhǔn)確的重要前提；根據(jù)丙酸倍氯米松在流動(dòng)相中的良好溶解性，我們采用流動(dòng)相超聲使之溶解，從而達(dá)到提取完全的目的；加樣回收試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法能有效準(zhǔn)確地測(cè)量倍氯米松尿素乳膏中丙酸倍氯米松。

3.2 測(cè)定波長(zhǎng)

色譜掃描結(jié)果顯示在波長(zhǎng)為240 nm處丙酸倍氯米松在流動(dòng)相中有最大吸收，因此選擇測(cè)定波長(zhǎng)為240 nm。

3.3 流動(dòng)相

本實(shí)驗(yàn)曾經(jīng)用甲醇、無(wú)水乙醇作為溶劑進(jìn)行提取，結(jié)果提取后測(cè)得的含量差別無(wú)幾，說(shuō)明選用這兩種溶劑均可。在流動(dòng)相的選擇中，曾采用甲醇-水（74∶26），但倍氯米松尿素乳膏這一復(fù)方制劑的成份復(fù)雜，丙酸倍氯米松以外的成分同樣對(duì)測(cè)定有影響，經(jīng)過(guò)優(yōu)化和摸索，結(jié)果以甲醇-水（82∶18）的分離效果較好，回收率高。最后選擇甲醇-水（82∶18）為本實(shí)驗(yàn)的流動(dòng)相。

3.4 優(yōu)點(diǎn)

本實(shí)驗(yàn)采用HPLC法測(cè)定倍氯米松尿素乳膏的含量，處理簡(jiǎn)便，測(cè)定結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可用于該制劑的質(zhì)量控制[6]。

[參考文獻(xiàn)]

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（收稿日期：2011-10-19）