頭孢菌素C酰化酶S12在不同原核系統中的表達

任羽 張建安 朱玉山

摘 要:目的:構建頭孢菌素C酰化酶(Cephalosporin C Acylase)基因的兩種原核表達載體,確定高效原核表達體系。方法:人工合成頭孢菌素C酰化酶S12基因,分別克隆到含有Lac啟動子的載體pBC KS和T7-lac啟動子的載體pET-28a上,命名為pBC-S12和pET-28-S12,重組質粒分別轉化感受態大腸桿菌DH5α和BL21(DE3),表達純化目的蛋白S12,測定酶活。結果:成功地構建了頭孢菌素C酰化酶S12的原核表達菌株,組成型表達和誘導型表達體系的表達量低,目的蛋白具有酶活,誘導型表達產生的酶比組成型表達產生的酶具有更強活性,可作為大腸桿菌表達頭孢菌素C酰化酶的高效表達體系。