中國野生葡萄病原菌誘導響應VqSAP基因的克隆及表達分析

摘要: 【目的】為了驗證SAP基因在葡萄抗病防御機制中的作用，【方法】在前期通過抑制消減雜交技術（SSH）獲得中國野生葡萄毛葡萄株系‘商-24’衰老相關蛋白（SAP）基因EST序列的基礎上，采用RT-PCR從毛葡萄‘商-24’中分離到SAP基因cDNA序列， 并通過實時定量PCR和半定量PCR分析了SAP基因的表達特異性。【結果】序列分析表明該基因具有完整的的開放閱讀框，序列長度為819 bp，編碼272個氨基酸殘基，相對分子質量為30.56 ku，等電點為8.78，將其命名為VqSAP。多重比較結果顯示VqSAP基因與油棕、玉米、萱草、擬南芥、水稻等植物SAP基因的同源性為65%～74%。實時定量結果表明，在白粉菌誘導初期，抗病的毛葡萄株系‘商-24’和感病的華東葡萄株系‘湖南-1’ VqSAP基因表達量均升高，這可能是因為它參與了病原菌誘導的細胞程序性死亡過程。水楊酸（SA）、茉莉酸甲酯（MeJA）、乙烯（Eth）處理表明衰老相關蛋白基因表達受激素分子調節，但在抗病和感病株系中基因的表達量有所差異。在嫩葉、嫩莖、花、果皮、卷須等不同葡萄組織中的表達表明VqSAP基因的表達具有空間差異性。 【結論】這些結果暗示著VqSAP的表達響應病原菌侵染并受生物脅迫相關激素的調控，很有可能在葡萄防御病原菌侵染的機制中發揮重要作用。

關鍵詞: 毛葡萄； 衰老相關蛋白； VqSAP基因； 克隆； 表達分析