枇杷果實總RNA的提取及八氫番茄紅素合成酶基因（PSY）片段的克隆

摘要： 【目的】為從枇杷果實中提取高質量的RNA，【方法】以枇杷果實為材料，對6種總RNA提取方法進行分析和比較。【結果】結果表明，在裂解前先用70%丙酮和80%乙醇分別對枇杷果皮和果肉進行預處理，再結合CTAB-LiCl法，得到的總RNA質量較好，OD260/OD280在1.8～2.2，OD260/OD230超過2.0，得率分別為幼果果皮56.78 μg·g-1，幼果果肉40.62 μg·g-1，成熟果果皮40.86 μg·g-1，成熟果果肉9.24 μg·g-1；并根據其他植物的八氫番茄紅素合成酶基因（PSY）保守區設計引物，用以上方法提取的RNA為模板進行RT-PCR，得到453 bp的基因片段，其推導的氨基酸序列與其他植物的同源性高達95%，推測該片段為PSY基因。【結論】先用70%丙酮和80%乙醇分別對枇杷果皮和果肉進行預處理，再結合CTAB-LiCl法，得到的RNA質量好，可用于后續的分子生物學研究。

關鍵詞： 枇杷果實； 總RNA提取； PSY基因