EAS混合溶劑體外溶石的研究

張建群

（河北省巨鹿縣醫院外科，河北巨鹿 055250）

EAS混合溶劑體外溶石的研究

張建群

（河北省巨鹿縣醫院外科，河北巨鹿 055250）

目的探討純乙基叔丁醚，氨羧混合液以及5%氨氧化鈉（EAS）混合溶劑分別對人膽道結石的直接溶解作用。方法通過體外對比試驗表明，EAS混合溶劑對常見類型的各種膽道結石有很強的快速溶解作用。結果0.2g左右的結石在4h內體外溶石率可達90%～100%。結論該溶劑有可能成為一種實用的膽石快速接觸性溶劑。

膽結石；溶劑；體外研究

本研究以尋求適合溶解各種結石的溶石劑為目的，經對比實驗選擇了乙基叔丁醚（E）、氨羧混合溶劑（A）、5%氫氧化鈉（S）混合溶石劑，EAS混合溶劑對各類結石均有較強的溶解性，有可能成為一種實用的膽道結石快速直接溶石劑［1-2］。

1 資料與方法

1.1 材料：結石取自手術患者。根據結石成分分析，選擇固醇型（固醇含量＞60%），色素型（膽紅素及其鹽含量＞60%），混合型（固醇及色素含量各占50%）。乙基叔丁醚（ethyl tertbutyl ether，ETBE）M=102.17，n2D0=1.374 6 bp=74℃。中藥雞內金汁

10mL（取新鮮雞內金汁50mg，清洗干凈，50℃水浸泡4h，壓榨取汁包裝，蒸汽滅菌器消毒10min備用）。氨羧混合溶液，分別將氨羧化合物乙二胺四乙酸二鈉（ethylene diamine teraacetic acid，EDTA）、乙 二 醇 乙 醚 二 胺 四 乙 酸［ ethylene bis（oxgethyleneitriol）acid，EGTA］、氨三乙酸（NTA）與吐溫-80、二甲基亞砜等按一定比例混合，用蒸餾水配成水溶液即可。5%氫氧化鈉（NaOH）溶液，按質量百分比配成水溶液。

1.2 EAS混合溶劑的配制：利用正交設計法（4h）以溶石率為優化指標，選擇混合溶劑中各組的最佳配比。

1.3 體外溶石實驗：將直徑相似，質量相似（0.2g左右）的各種結石，分別置入50mL梨形瓶中，加入等量的溶石劑，裝上球形冷凝管，置入水浴箱中，35℃恒溫，間斷式振蕩，保持4h將梨形瓶中的溶解物過濾，濾渣自然干燥稱質量，計算溶石率。

2 結 果

2.1 ETBE的溶石效果：用ETBE分別對固醇型、色素型、混合型結石進行溶石研究，實驗結果表明，固醇型結石4h溶石率達90% ～100%，混合型Ⅰ60%～70%，混合型Ⅱ30%～40%，色素型20%～30%；混合型Ⅰ中固醇含量大于混合型Ⅱ，混合型Ⅱ色素含量高。

2.2 氨羧混合溶液的溶石效果：用EDTA氨羧混合液對各類結石進行溶解，結果表明，固醇型4h溶石率5% ～10%，混合型Ⅰ 20% ～30%，混合型Ⅱ0%～60%，色素型80%～90%。

2.3 EAS混合溶劑最佳比例選擇：根據2.1，2.2的實驗結果，將一定量的ETBE、氨羧混合液、5%氫氧化鈉溶液組成的混合溶劑進行溶石研究，由于影響溶石的因素較多，采用L9（33）正交實驗法，固定反應溫度35℃，反應時間4h，樣品用量0.2g左右（直徑相近），改變混合溶液中3種組分的用量，以溶石率為優化指標。表觀好條件為a3、b1、c3，其溶石率最高為92.5%，由K值最大分析的好條件為a2、b1、c3，正交表中無此條件，為此對其做對比試驗，結果后者溶石率為79.79% 。故確定最佳條件為 a3（2ml 5%NaOH）、b1（1ml EDTA混合溶液）、c3（4ml ETBE），見表1。

表1 L9（33）正交實驗結果

2.4 EAS混合溶劑的溶石效果比較：利用上述實驗得到的最佳溶石條件，對不同氨羧混合液進行了對比實驗，各種氨羧化合物組成的EAS混合溶劑對各類結石的溶石效率大小順序為EGTA＞EDTA＞NTA。這與氨羧配位劑與鈣形成絡合物的平衡常數的大小順序是完全一致的。見表2。

表2 ETBE與不同氨羧混合溶液組成的溶石劑及溶石效果

3 討 論

膽道結石的溶石研究是近些年深受關注的課題，但長期以來未取得滿意的效果，直到20世紀70年代初，隨著膽汁理化特性等基礎研究的深入，膽結石溶石治療有了較大的發展［3-7］。我國醫務工作者為了尋找較好的溶石劑，曾先后對多種中藥及1%去氧膽酸鈉-EDTA-2Na單辛酯無機溶劑對膽結石進行了體外實驗。近年來又采用了甲基正丁醚、復方甲基叔丁醚-二甲基亞砜等有機溶劑進行溶石，結果都不理想，有的對固醇型結石溶解效果好，而對色素型結石只有25%～40%的溶解效果。對膽結石的各種類型的溶解沒有一個比較完整全面的報道。對膽結石患者膽汁與膽石中主要金屬離子的測定表明，膽固醇結石和色素型結石患者膽汁中鈣離子較正常高。氨羧配位劑是鈣的良好配位劑，ETBE是膽固醇結石的較強熔劑，我們將二者配成混合溶劑，對各種結石進行溶石比較結果表明，對混合型溶石率達100%，對色素型結石溶解率達90%以上，均高于單純使用甲基叔丁醚，而且溶石劑pH為8.5與生理膽汁的pH一致，溶解后殘渣＜1.5mm。

通過使用EAS混合溶劑對各類結石的溶解行為的對比，可得出如下結論：①ETBE是固醇型結石的良好溶劑，其溶石率可達90%～100%，不僅溶石率高且可減輕對膽囊黏膜的刺激；②EGTA混合溶液是色素型結石良好溶劑，其溶石率達 80% ～90%；③EAS混合溶劑中ETBE-EGTA混-S是各類結石的良好溶劑，對各類結石的溶石率分別為，固醇型 90.02%，混合型Ⅰ100.00%，混合型Ⅱ99.18%，色素型95.73%。其主要原因是混合溶劑中各組分可選擇性地溶解其易溶成分，氨羧混合物是鈣的良好絡合劑，尤其是配合5%NaOH溶液使其對膽紅素鈣具有很好的溶解性。ETBE對膽固醇及蛋白支架有良好的可溶性。因此，可獲得滿意的體外溶石實驗結果。

本研究在該溶石劑中加入雞內金汁可提高固醇型結石的溶石效果，中藥學理論認為雞內金汁有化石作用，而且對膽道黏膜無刺激，是一種良好的輔助溶石的藥物。本研究目前只是體外溶石試驗，在以后的研究過程中將對溶石劑進行動物毒理實驗以及人體毒理試驗。通過該實驗有望能對肝膽外科手術后膽道殘留結石溶解作出貢獻。

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（本文編輯：劉斯靜）

R331

B

1007-3205（2012）11-1309-03

2012-03-16；

2012-05-21

張建群（1954-），男，河北巨鹿人，河北省巨鹿縣醫院主治醫師，從事肝膽外科疾病診治研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2012.11.028