乳源ACE抑制肽的制備及應用

王佳佳，胡志和*

(天津市食品生物技術重點實驗室，天津商業大學生物技術與食品科學學院，天津 300134)

乳源ACE抑制肽的制備及應用

王佳佳，胡志和*

(天津市食品生物技術重點實驗室，天津商業大學生物技術與食品科學學院，天津 300134)

近年來高血壓成為威脅人類健康的第一大慢性病，由于常規降壓藥物對人體的損害，食源性降壓肽成為研究的熱點。目前研究發現了多種乳源ACE抑制肽，并得到應用。本文綜述乳源ACE抑制肽的制備、純化及應用現狀。

高血壓；降壓藥物；ACE抑制肽；應用

隨著經濟的發展，生活水平顯著提高，飲食中脂肪和熱量的比重上升，同時機械的發展使得體力活動減少，使我國心血管疾病的發病率呈逐年快速上升趨勢，并成為我國高死亡率、高致殘率和高醫療費用的第一大慢性疾病。心血管疾病以冠心病為主，冠心病又稱冠狀動脈硬化性心臟病，而高血壓是動脈粥樣硬化的重要危險因素[1]，且血壓水平與心血管發病危險呈正相關[2]。在WHO/ISH、ESH/ESC和中國高血壓治指南[3-5]中強調了控制收縮壓的重要性，闡述選擇降壓藥物的原則以及聯合用藥干預心血管危險因素的高血壓治療新觀念，但這些降壓藥物都有一定的毒副作用，如對心臟和腎造成損害或者對于特殊人群如心衰患者有使用限制[6]。

人們逐漸發現食物蛋白質水解后形成的小分子多肽具有明顯的降血壓作用，它與普通降壓藥物相比具有無毒副作用，且對正常的血壓無影響等優點。研究表明，這些小分子多肽是一種血管緊張素轉化酶(angiotensin converting enzyme，ACE)抑制肽，即ACE抑制肽，因此，來源于食物蛋白中的ACE抑制肽越來越受到現代社會廣泛重視[7]。通過水解所得的生物活性肽，其分子質量較小，在小腸內可以以完整肽段的形式被人體吸收，安全性好，不會引起人體的免疫排斥反應，加之其生理功能強、用量少的獨特優勢，已越來越多地引起人們的重視，其工業化生產也成為當前功能性食品研究的重點[8]，本文對有關乳源ACE抑制肽的研究與應用前景進行相關的闡述。

1 高血壓

1.1 高血壓的危害

高血壓病是近年來最常見的心血管病，是全球范圍的重大公共衛生問題。據流行病學的研究，高血壓損傷靶器官，引起多種心腦血管疾病和腎臟疾病，最終導致患者致殘和致死，血壓的升高是腦卒中和冠心病發病的獨立危險因素，防治高血壓是預防心腦血管病的關鍵。研究表明目前美國約有5000萬人患有高血壓，日本60歲以上的老年人中約有60%患有高血壓[9]，在我國高血壓患者已超過1.6億[10]，高血壓的發病率在世界范圍內的日益增高，越來越受到廣泛關注。在近10年的國際及國內高血壓的流行趨勢都顯示高血壓仍處在一種高發病低控制的狀態。因此，對于高血壓的防治已經迫在眉睫。

1.2 傳統降壓藥物的分類評價與食源性ACE抑制肽的優勢

高血壓的診斷標準是血壓水平≥140/90mmHg，它的藥物治療目標是使高血壓病人的血壓水平能非常嚴格的控制在此水平之下，其終極目標是使心血管發病和死亡發生的總危險長期受到抑制[11]。

目前用于抗高血壓藥物治療的有6種主要的降壓藥物，它們分別是利尿劑、β-阻滯劑、鈣拮抗劑、ACE抑制劑、血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑和α-腎上腺素能受體阻滯劑[6]。通過合理的用藥原則，這些降壓藥物能顯著降低血壓。但是它們都有一定的毒副作用，不良反應有過敏性血管水腫、咳嗽、腎功能不全加重、高血鉀和致畸形等[12]。而且原發性的高血壓中有些屬于輕度高血壓即高血壓前期(130～139)/(85～89)mmHg與正常血壓＜130/84mmHg相比，由于血壓水平升高幅度較小，且部分具有朝著正常波動的趨勢，所以是否選擇藥物治療引起爭議。而由蛋白質在溫和的條件下被蛋白酶水解而得到的ACE抑制肽對高血壓患者具有降壓作用，而且性質溫和并對正常血壓的人無作用，它還具有免疫活性、促進消化吸收并具有減肥等多種功效[13]，由此，食源性ACE抑制肽逐漸成為生物活性肽研究領域的重點方向之一。

2 乳源ACE抑制肽

人體內的腎素-血管緊張素系統(rennin-angiotensin system，RAS)和激肽釋放酶-激肽系統(kallikrein-kinin system，KKS)與血壓的調節密切相關。RAS是升壓系統，其中的血管緊張素原在腎素的作用下轉化為血管緊張素Ⅰ，血管緊張素Ⅰ本身沒有升高血壓的作用，它可以在血管緊張素轉化酶(ACE)的作用下生成至今已知的最強的升高血壓活性肽。與此同時在降壓系統KKS中，舒緩激肽是降壓物質，它能舒張毛細血管增加其通透性，使血壓下降，而ACE使得舒緩激肽的片段失活，引起血壓的升高。ACE抑制肽能競爭性地抑制ACE的活性，從而阻斷RAS的升血壓作用，同時增強KKS的降壓作用，起到降低高血壓患者血壓的作用。

ACE抑制肽主要來自食品中的蛋白質，目前已成功提取出的主要有乳類蛋白、植物類蛋白及動物類蛋白中的ACE抑制肽。科學研究發現，牛乳不僅含有豐富的營養成分，能夠提供人類非常豐富的必需氨基酸，而且還是生物活性肽的重要來源。對乳源活性肽的研究最早開始于1979年，由Brantl等[14]第一次從牛β-酪蛋白水解物提取出了具有嗎啡樣活性的七肽，Mellander等[15]從酪蛋白中首次獲得了酪蛋白磷酸肽(casein phosphopeptide，CPP)自此相繼從乳源蛋白中的一級結構分離出許多具有生理功能的活性肽，如嗎啡樣活性肽、抗高血壓肽、免疫調節肽、抗菌肽、抗血栓肽、促進金屬離子吸收的肽、促細胞生長肽等，這其中研究最熱門，最具研究開發價值的當數抗高血壓活性肽。

2.1 乳酪蛋白源ACE抑制肽

牛乳中蛋白質的含量為32g/L，其中酪蛋白的含量約為26g/L。酪蛋白富含磷、吸附鈣和豐富的必需氨基酸，酪蛋白的主要成分是αs1-、αs2-、β-、κ-酪蛋白，它們的質量比是3:0.8:3:1[16]。

自Maruyama等[17]于1982年在酪蛋白水解物分離出具有ACE抑制活性的12肽(CEJ12)，接著又分離出ACE抑制活性更強的CEI即和CEIS后，各國研究人員采用不同的方法從酪蛋白中分離提取了更多具有不同降壓效果的ACE抑制肽。Kohmura等[18]分別以人乳的α-酪蛋白和κ-酪蛋白為材料合成了具有生物活性的肽片段，經體外檢測具有抑制活性。但是現在研究最多的是通過各種酶對酪蛋白進行水解從而得到具有降壓作用的ACE抑制肽，如1997年Yamamoto[19]用Lactobacillus helveticus CP790蛋白酶對αs1-酪蛋白和β-酪蛋白進行了水解得到的水解物在很大程度上能抑制ACE的活性，姜瞻梅等[20]利用胰蛋白酶、胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、As.1398中性蛋白酶和Alcalase 5種蛋白酶對牛乳酪蛋白進行酶解篩選出能夠產生具有較高ACE抑制活性的AS1.398中性蛋白酶，其ACE抑制肽的半數抑制質量濃度為0.68mg/mL。

2.2 乳清蛋白源ACE抑制肽

存在于乳清中的蛋白質稱為乳清蛋白，約占乳蛋白質總量的17%～20%，主要包括β-乳球蛋白、α-乳白蛋白、牛乳血清白蛋白(BSA)、免疫球蛋白(Ig)等[21]。乳清蛋白的片段中包含多種生物活性序列，其中具有ACE抑制活性的序列可通過適當的蛋白酶對其水解而從乳清蛋白中釋放出來。

自1996年Amhar等[22]通過對酪乳清蛋白進行水解，發現不同的蛋白酶對酪乳清蛋白水解可得到不同的酶解產物，其ACE抑制活性有很大的差異。2005年，李朝慧等[23]分別用中性蛋白酶、胃蛋白酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶水解乳清蛋白制備ACE抑制肽，通過體外檢測得出堿性蛋白酶水解物的ACE抑制率最大。2007年，Ferreira等[24]利用胰蛋白酶水解乳清蛋白，而后通過RP-HPLC分離水解物得到降壓肽片段Ala-Leu-Pro-Met-His-Ile-Arg(ALPMHIR)，從而得出功能性小肽可通過水解從無活性的乳清蛋白中釋放出來。Costa等[25]分別用在65℃和95℃處理的變性乳清蛋白為原料，通過堿性蛋白酶，α-胰凝乳蛋白酶和Proteomix對其進行水解，發現65℃變性的乳清蛋白在α-胰凝乳蛋白酶水解作用下有較高的ACE抑制活性，飼喂SHR大鼠可改善其高血壓。2009年，潘道東等[26]利用瑞士乳桿菌蛋白酶水解牛乳清蛋白，通過對水解溫度、pH值、酶與底物比、底物濃度和水解時間進行優化，得到的產物ACE抑制率達到92.21%，IC50值為0.375mg/mL的高ACE抑制活性的ACE抑制肽。

2.3 發酵乳源ACE抑制肽

發酵乳是乳類經乳酸菌或其他一些有益菌發酵而制得的一類產品，與普通乳制品相比較，它具有提高乳的營養價值、改善乳的風味、增強乳的保健作用等功效。雖然乳酸菌的蛋白質水解酶系統較弱，但其胞外蛋白酶能限制性的水解乳蛋白質在發酵液中可得到一些活性多肽[27]。

發酵乳中生物活性肽的種類和性質與乳酸菌的益生效應有關，利用益生菌種Lactobacillus GG發酵，再經胃蛋白酶或胰蛋白酶消化的UHT乳中，含有αs1-酪蛋白、β-酪蛋白和α-乳清蛋白具有免疫調節活性、阿片樣活性和降血壓活性的相應肽段[28]。而ACE抑制活性活性的大小與乳酸菌的蛋白酶種類和活性密切相關。根據研究報道，瑞士乳桿菌有較強的蛋白酶活性，其中一些菌株制作的發酵乳制品，有較強的抗ACE活性[29-30]。

自1995年Nakamura等[31]以Lactobacillus helveticus和Saccharomyces cerovisiae菌株作為乳發酵劑制成Calpis酸乳，通過4步高效液相色譜從Calpis酸乳中純化出兩條ACE抑制肽VPP和IPP，其IC50值分別為9μmol/L和5μmol/L，并將Calpis和得到的兩種小肽飼喂SHR大鼠，動物實驗結果表明口服一定劑量的酸乳或這兩種肽對SHR大鼠血壓均有明顯的改善作用，并且對正常鼠血壓沒有任何影響以來，篩選適當的益生菌株發酵乳類制得含有ACE抑制肽的功能性酸乳的研究報道就屢見不鮮。

2007年，潘道東[32]從兩種干酪制品的混合樣品中分離篩選出能發酵牛乳產生較強抗ACE活性的乳桿菌1002、1004和1006。2008年，王宇[33]比較了6個屬內18種共計61株乳酸菌發酵脫脂乳后ACE抑制率的大小，結果表明不同乳酸菌菌株的ACE抑制率不同，其中乳桿菌屬的ACE抑制活力最強，其次是雙歧桿菌屬，鏈球菌屬、乳球菌屬、明串珠菌屬和片球菌屬的ACE抑制活力很低。乳酸菌ACE抑制活力其蛋白水解活力正相關性。2009年，趙樹平等[34]從81株分離自新疆傳統酸馬奶中的乳桿菌中篩選到瑞士乳桿菌(L. helveticus)ND01，利用該菌株得到的發酵乳其ACE抑制活性最大值為67.18%。

2.4 乳源ACE抑制肽的制備與純化

ACE抑制肽一般以無活性的形式存在于蛋白質序列中，但當蛋白質通過熱、酸堿的降解、酶制劑的水解或微生物的發酵等，無活性的蛋白質中可以釋放出具有降壓作用的ACE抑制肽。ACE的制備方法主要有5種：化學降解法、酶解法、微生物發酵法、化學合成法和基因工程法，現在研究最多的是酶解法和微生物發酵法。

在酶解法中酶水解條件溫和對蛋白質的營養價值破壞小，蛋白質的水解過程易控制，而且酶可以對蛋白質進行定位水解進而產生人們所需要的特定肽類，酶解法的這些特點使得越來越多的人開始了酶解法制備ACE抑制肽的研究。

目前已用在降壓肽生產過程中的蛋白質水解酶有堿性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、Alcalase、膠原蛋白酶、嗜熱菌蛋白酶、胰糜蛋白酶等。酶的選擇是ACE抑制肽生產的關鍵，因為不同的蛋白酶水解產生的多肽活性不同，又一般不知道原料蛋白質的一級結構，并且ACE抑制肽有多種結構組成，所以應根據酶的專一性從眾多的蛋白酶中進行篩選。例如Qian Zhongji等[35]利用6種不同的蛋白酶(Alcalase、α-糜蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶)水解牛蛙的肌肉蛋白生產降壓肽，通過灌胃SHR表明Alcalase蛋白酶水解物顯示出高的ACE抑制活性，經分離提純得到12肽Gly-Ala-Ala-Glu-Leu-Pro-Cys-Ser-Ala-Asp-Trp-Trp。酶法水解又可分為只用單一酶水解和兩種或多種酶同時加入或按一定順序加入進行水解的方法，在實際應用中需根據產物的活性做具體的實驗摸索。

微生物發酵法是近年來生產降壓肽很具前景的技術，研究發現發酵酸乳、奶酪及豆奶等許多發酵食品中都含有降壓肽，它們是利用微生物發酵過程中產生的復合蛋白酶具有較高的水解度來水解蛋白質，通過對水解物的檢測發現食品經發酵后含有較高活性的降壓肽，這樣就會大大的降低酶法生產降壓肽的成本從而應用于大規模的生產中。

經酶水解或微生物發酵蛋白質會得到多種長短不一的多肽混合物，建立一套適宜的分離提取工藝是將ACE抑制肽推向商業化生產的必要條件。目前分離ACE抑制肽的方法很多，如離子交換層析、凝膠過濾層析、超濾、毛細管電泳、凝膠電泳、高效液相色譜方法等。在進行ACE抑制肽的分離提取上，一般采用幾種方法相結合。目前廣泛采用的先是用活性炭吸附去除高分子質量、未水解的蛋白質，用超濾除去分子質量較大的蛋白質和不溶底物，再根據分子大小，將混合物通過凝膠過濾層析柱進行分離，因ACE抑制肽的結構相近，分子質量差別小，需和離子交換層析柱串聯使用[36]。代永剛等[37]采用超濾對堿性蛋白酶酶解酪蛋白制備ACE抑制肽酶解液進行初步分離，得到分子質量在4000u以下的組分，然后用凝膠柱Sephadex G-25進行進一步純化，純化后其相對分子質量在1500u以下，測得組分的ACE抑制活性可達62.78%，比原酶解物的ACE抑制活性高了24.77%。

3 乳源降壓肽在食品中的應用

將乳源ACE抑制肽作為一種配料添加到食品中，生產出可供正常人或輕度高血壓患者食用的具有預防和治療高血壓功效的功能性食品，是近年來研究降壓肽的最根本目的。目前國內外已經開發出一些具有ACE抑制作用的相關產品。但是應該注意的是在食品工業生產作為食品配料用的降壓肽應考慮它的感官特性和生產過程可能對它的活性的破壞作用，這是研究者們在研究過程中應當注意和解決的難題。

3.1 苦味肽的脫除

雖然酶法水解蛋白質可得到多種具有高ACE抑制活性的降壓肽，但在水解的同時也會相應的有苦味肽的形成，這就嚴重影響了水解產物的應用。在酶解過程中，往往由于條件限制，盡管底物、酶和水解度可以選擇并加以控制降低苦味，但有時也無法滿足脫苦的最低條件，還需要外加措施進行脫苦，其方法主要包括選擇性分離法、掩蓋法、酶法等[38-40]。

1)選擇分離法：根據疏水多肽的性質，采用活性炭吸附、有機溶劑抽提、樹脂分離、膜分離法等技術可去除高含量疏水氨基酸苦味肽，缺點是會造成一定量的肽的損失。

2)掩蓋法：是指向水解產物中加入某種物質來掩蓋苦味，例如采用環化糊精、凝膠淀粉、多磷酸鹽、谷氨酸、天門冬氨酸來掩蓋苦味或添加蘋果酸、檸檬酸、乳酸等降低苦味。

3)酶法：采用外切型蛋白酶切除肽端的疏水性氨基酸，外切型蛋白酶是一種胞外酶，故采用微生物酶能起到脫苦作用。外切酶又稱端肽酶，主要作用于肽鏈末端的氨基酸位點。其包括氨肽酶和羧肽酶，前者作用于肽鏈氨基末端開始而后者是從羧基末端開始依次水解氨基酸。隨著疏水性氨基酸的位置從肽鏈中間轉移至末端或游離出來，苦味即得到了有效的降低。

但是，這些方法在苦味肽的脫除方面都是有限的，在一定程度上都會造成活性肽的損失，至今還未發現一種既能有效消除苦味肽又能保持ACE抑制肽活性的方法[41]。因此，應結合實際情況認真選擇脫苦方法，現在最常用的方法是掩蓋法。如王進等[42]將質量濃度為2g/100mL的β-環狀糊精添加到質量濃度5g/100mL的復合肽水解液中，可使苦味基本去除，也不造成氮損失。

還應該注意的是，除了苦味的產生，在水解過程中為了使酶擁有很高的活性就要不斷地添加酸或堿使得水解環境處于酶的最適pH值范圍內，最后再加堿或酸中和水解產物，這就導致水解產物含有很高的鹽分，也可能影響到水解物在食品中的應用。因此要對其中的鹽分進行脫除，食品中鹽分的脫除有多種方法[43]，如離子交換、超濾、電滲析等物理、化學方法。超濾和電滲析可以有效脫除大分子化合物中的鹽分，但對蛋白質水解物來說，采用超濾或滲析技術處理會造成一些低肽分子的損失[44]。

3.2 加工過程的影響

食品的加工過程雖然可以改善食品的營養、風味、貨架期和安全性等，但同時也可能破壞降壓肽的活性，使其活性降低或消失。對食品進行熱處理主要目的分為兩種：保藏處理和轉化處理，在食品加工中幾乎是必不可少的。然而熱處理會造成氨基酸的外消旋、降解，凝膠化和與食品中的還原糖發生美拉德反應等。

單獨的或在堿性環境的熱處理都可以誘發氨基酸的外消旋，L-氨基酸轉變成D-氨基酸，尤其是在側鏈上含有很強電子電位的氨基酸，此外在有微生物存在的環境下通過微生物的氨基酸氧化酶，氨基轉移酶和差向異構酶也可以使L-氨基酸轉變成D-氨基酸，所以在發酵乳，酸乳酪和成熟的奶酪中發現D-氨基酸的存在。一些氨基酸的結構改變如精氨酸、絲氨酸、蘇氨酸和賴氨酸等也可發生降解，如精氨酸可熱解成鳥氨酸[45]。

一般無論是否在堿性環境下的熱加工都會引起氨基酸的交聯作用進而發生氨基酸的凝膠化。Ferreira等[24]研究發現加熱誘發水解產物的凝膠化，最終的凝膠時間和凝膠強度與水解程度有很大的關聯，而凝膠會使水解過程中釋放的活性肽失去活性。

在有氨基和還原糖存在的環境下通過加熱可發生美拉德反應。美拉德反應的發生雖然會對食品的風味產生一些積極的作用，但是伴隨著一些對產品產生影響的物質的生成且反應的發生對食品的營養特性產生很大的影響，尤其是對其中的氨基酸類化合物，所以人們在食品的加工過程中要嚴格控制美拉德反應的發生[46]。

在產品的加工和貯藏過程中，由于氧化劑的作用或產品中感光物質的存在等產品內部會發生氧化，氧化后的物質一般都是機體不可利用的。乳制品中由于感光物質核黃素的存在故對光特別敏感。由于氧化反應對降壓肽分子結構的改變進而對它們生物活性的影響，因此對產品包裝的選擇也是至關重要的，合適的密封包裝會減弱甚至消除它們的氧化反應。

3.3 降壓產品的開發

很多研究表明通過使用乳蛋白的水解物或發酵乳產品，輕微或嚴重的高血壓患者的血壓水平都會有所降低，表1列出了通過進行臨床實驗評價了這些降壓產品的降壓效果[45,47]。

表1 含有乳源降壓肽降壓產品的降壓效果Table 1 Antihypertensive effects of food products containing milk-derived ACE inhibitory peptides

4 結 語

營養因素在高血壓的預防和治療中發揮著重要作用已經被意識到，因此研究者致力于開發具有降血壓活性的食品。乳以其特殊的營養價值，對人類和動物獨特的免疫保護與生長調節功能，以及各成分之間的適宜比例是新生哺乳動物最好的營養素，而經過酶解或微生物發酵得到的乳源降壓肽與原料乳相比，不僅消化吸收率變高、耐酸、耐熱，而且具有多種生理調節功能。基于以上的優點，科學家們正在致力于開發具有一定的保健和營養價值，還具有較高的降血壓功能，經長期食用可達到預防、控制、緩解、治療高血壓的目的功能性食品。對含乳源降壓肽功能性食品的開發過程中要不斷地完善其感官特性和穩定性使其在功能性食品中發揮其最大的功效。因為它具有合成降壓藥物所無法比擬的獨特的優越性，因此，含有乳源ACE抑制肽的產品具有十分廣闊的應用前景。

[1]揭紅波. 淺談心血管疾病的發病機理與預防[J]. 中外醫療, 2011(5): 184.

[2]陳紹行, 沈衛峰. 高血壓治療現狀[J]. 國際心血管病雜志, 2006, 33 (2): 67-69.

[3]CHOBANIAN A V, BAKRLS G L, BLACK H R, et al. Seventh report of the joint national committee on prevention, detection, evaluation and treatment of high blood pressure[J]. Hypertension, 2003, 42(2): 1206-1252.

[4]Guidelines Committee. 2003 European Society of Hypertension-European Society of Cardiology guidelines for the management of arterial hypertension[J]. Hypertension, 2003, 21(6): 1011-1053.

[5]中國高血壓防治指南修訂委員會. 2004年中國高血壓防治指南[J]. 中華心血管病雜志, 2004, 32(12): 1060-1064.

[6]張元宏. 高血壓病的藥物治療新進展[J]. 實用醫技雜志, 2007, 14(3): 382-385.

[7]張源淑, 鄒思湘. 酪蛋白源生物活性肽[J]. 國外畜牧科技, 1998, 25 (4): 33-36.

[8]PARK O, SWAISGOOD H E, ALLEN J C. Calcium binding ofphosphopeptides derived from hydrolysis of a αs-casein and β-casein using immobilized trypsin[J]. Diary Science, 1998, 81(11): 2850-2857.

[9]MOTOYAMA M, SUNAMI Y, KINOSHITA F, et al. Blood pressure lowering effect of low intensity aerobic training in elderly hypertension patients[J]. Medicine Science in Sports Exercise, 1998, 30(6): 818-823.

[10]中華人民共和國衛生部, 中華人民共和國科學技術部, 中華人民共和國國家統計局. 中國居民營養與健康狀況[M]. 北京: 人民衛生出版社, 2005: 15-16.

[11]馬海珍. 高血壓藥物治療新進展[J]. 醫學理論與實踐, 2011, 24(5): 514-515.

[12]MANCIA G, DE BACKER G, DOMINICZAK A, et al. 2007 Guidelines for the management of arterial hypertension: The Task Force for the Management of Arterial Hypertension of the European Society of Hypertension(ESH) and of the European Society of Cardiology (ESC) [J]. European Heart Journal, 2007, 28(12): 1462-1536.

[13]肖紅, 段玉峰, 劉平, 等. 食品蛋白降血壓肽及其研究進展[J]. 食品研究與開發, 2004, 25(5): 3-6.

[14]BRANTL V, TESCHEMACHER H, LOEESPEICH F, et al. Novel opioid peptide derived from casein (β-casomorphins). I. Isolation from bovine casein peptone[J]. Physical Chemistry, 1979, 360(9): 1211-1216.

[15]MELLANDER O. The physiological importance of the casein in phosphopeptide calcium salts. II. Peroral calcium dosage in infant[J]. Acat Soc Med UPS, 1950, 55(5/6): 247-255.

[16]MATSUMOTO H, SHIMOKAWA Y, USHIDA Y, et al. New biological function of bovine α-lactalbumin: protective effect against ethanoland stress-induced gastric mucosal injury in rats[J]. Bioscience Biotechnology, and Biochemistry, 2001, 65(5): 1104-1111.

[17]MARUYAMA S, SUZUKI H. A peptide inhibitor of angiotensinⅠ-converting enzyme in the tryptic hydrolysate of casein[J]. Agric Biol Chem, 1982, 46(5): 1393-1394.

[18]KOHMURA M, NIO N, ARIYOSHI Y. Inhibition of angiotensin Ⅰ-converting enzyme by synthetic peptides of human κ-casein[J]. Agricultural and Biological Chemistry, 1990, 54(3): 825-836.

[19]YAMAMOTO N. Antihypertensive peptides derived from food proteins [J]. Biopolymers Peptide Science, 1997, 43(2): 129-134.

[20]姜瞻梅, 田波, 吳剛, 等. 酶解牛乳酪蛋白制備ACE抑制肽的研究[J]. 中國食品學報, 2007, 7(6): 39-43.

[21]顧瑞霞. 乳與乳制品的生理功能特性[M]. 北京: 中國輕工業出版社, 2001: 55-58.

[22]AMHAR A, TADAO S, MARIA V A, et al. New derivation of the inhibitory activity against angiotensin converting enzyme (ACE) from sweet cheese whey[J]. Tohoku Journal of Agricultural Research, 1996, 47(1/2): 1-8.

[23]李朝慧, 羅永康, 王全宇. 乳清蛋白酶解制備ACE抑制肽的研究[J].中國乳品工業, 2005, 33(2): 8-11.

[24]FERREIRA I M P L V O, PINHO O, MOTA M V, et al. Preparation of ingredients containing an ACE-inhibitory peptide by tryptic hydrolysis of whey protein concentrates[J]. International Dairy Journal, 2007, 17 (5): 481-487.

[25]COSTA E L D, GONTIJO J A D, NETTO F M. Effect of heat and enzymatic treatment on the antihypertensive activity of whey protein hydrolysates[J]. International Dairy Journal, 2007, 17(6): 632-640.

[26]潘道東, 郭宇星. 瑞士乳桿菌蛋白酶水解乳清蛋白制備ACE抑制肽的條件優化[J]. 食品科學, 2009, 30(11): 138-143.

[27]王海燕, 張佳程. 食品降壓肽的比較與評價方法[J]. 食品與發酵工業, 2001, 27(11): 70-73.

[28]ROKKA T, EEVA L. Release of bioactive peptides by enzymatic proteolysis of Lactobacillus GG fermented UHT milk[J]. Milchwissenschaft, 1997, 52(12): 675-677.

[29]YAMAMOTO N, AKINO A, TAKANO T. Antihypertensive effect of the peptides derived from casein by an extracellular proteinase from Lactobacillus helveticus CP790[J]. Journal of Dairy Science, 1994, 77(4): 917-922.

[30]CUSHMAN D W, CHEUNG H S. Spectrophotometric assay and properties of angiotensin-converting enzyme of rabbit lung[J]. Biochem Pharmacol, 1971, 20(7): 1637-1648.

[31]NAKAMURA Y, MASUDA O, TAKANO T. Decrease of tissue angiotensin Ⅰ-converting enzyme activity upon feeding sour milk in spontaneously hypertensive rats[J]. Biosci Biotech Biochen, 1996, 60(3): 488-489.

[32]潘道東. 抗ACE活性之瑞士乳桿菌的篩選[J]. 食品科學, 2007, 28 (2): 145-148.

[33]王宇. 乳酸菌發酵乳抑制血管緊張素轉化酶活性的研究[D]. 無錫: 江南大學, 2008.

[34]趙樹平, 陳永福, 孫天松, 等. 瑞士乳桿菌ND01(L. helveticus ND01)發酵乳中ACE抑制活性和γ-氨基丁酸的研究[J]. 中國食品學報, 2009, 9(6): 48-53.

[35]QIAN Zhongji, JUNG W K, LEE S H, et al. Antihypertensive effect of an angiotensin I-converting enzyme inhibitory peptide from bullfrog (Rana catesbeiana Shaw) muscle protein in spontaneously hypertensive rats[J]. Process Biochemistry, 2007, 42(10): 1443-1448.

[36]吳煒亮, 吳國杰, 梁道雙, 等. ACE抑制肽的生理功能和研究進展[J].現代食品科技, 2006, 22(3): 251-254.

[37]代永剛, 南喜平, 李鐵柱, 等. 酪蛋白源ACE抑制肽的分離純化[J].中國乳品工業, 2010, 38(10): 21-22.

[38]PEDERSEN B. Removing bitterness from protein hydrolysates[J]. Food Technology, 1994, 45(10): 96-98.

[39]唐傳核. 大豆中的苦味物質及脫除方法[J]. 食品與機械, 1998(4): 10-12. [40]杜林, 李亞娜. 生物活性肽的功能與制備研究進展[J]. 中國食物與營養, 2005(8): 18-21.

[41]WU Jianping, ALUKO R E. Quantitative structure-activity relationship study of bitter di-and tri-peptides including relationship with angiotensin I-converting enzyme inhibitory activity[J]. J Peptide Science, 2007, 13(1): 63-69.

[42]王進, 何慧, 石燕玲, 等. 玉米大豆復合ACE抑制肽風味控制研究[J]. 中國糧油學報, 2008, 23(5): 65-68.

[43]趙新淮. 大豆蛋白水解物的精制研究[J]. 東北農業大學學報, 1997, 28(1): 94-97.

[44]田波, 遲玉杰. 蛋清蛋白質水解物的精制[J]. 食品科學, 2003, 24(1): 90-92.

[45]BLANCA H L, MARIA D M C, ISIDRA R. Antihypertensive peptides: production, bioavailability and incorporation into foods[J]. Advances in Colloid and Interface Science, 2011, 165(1): 23-35.

[46]OGASAWARA M, KATSUMATA T, EGI M. Taste properties of Maillard-reaction products prepared from 1000 to 5000 Da peptide[J]. Food Chemistry, 2006, 99(3): 600-604.

[47]KORHONEN H. Milk-derived bioactive peptides: from science to applications[J]. Journal of Functional Foods, 2009, 1(2): 177-187.

Preparation and Application of Angiotensin Converting Enzyme (ACE) Inhibitory Peptides Derived from Milk: A Review

WANG Jia-jia，HU Zhi-he*
(Tianjin Key Laboratory of Food and Biotechnology, College of Biotechnology and Food Science, Tianjin University of Commerce, Tianjin 300134, China)

In recent years, high blood pressure has become the first chronic disease threatening human health. Research into antihypertensive peptides derived from food proteins has become a hot topic. Many milk-derived angiotensin converting enzyme (ACE) inhibitory peptides have been found and applied. The present paper reviews the current status of the preparation, purification and application of milk-derived ACE inhibitory peptides.

high blood pressure；antihypertensive drugs；ACE inhibitory peptide；application

Q936.16

A

1002-6630(2012)03-0286-06

2011-09-20

王佳佳(1986—)，女，碩士研究生，研究方向為食品生物技術。E-mail：jianianhuajiajia@163.com

*通信作者：胡志和(1962—)，男，教授，碩士，研究方向為專用功能食品。E-mail：hzhihe@tjcu.edu.cn