飼料中不同蛋白和鈣對雞腎臟影響的研究

晁利剛 臧猛 高倩

（河南新正好生物工程有限公司，河南 鄭州 450011）

雞尿酸鹽沉積癥,是一種由蛋白質及嘌呤核苷酸代謝障礙引起的高尿酸血癥、腎功能損害性疾病，是家禽的常見病，不同季節，不同日齡的各種家禽均可發生。尿酸鹽沉積的原因有：傳染病因素如腎型傳染性支氣管炎、傳染性法氏囊病、包涵體肝炎等；營養因素如蛋白含量或鈣含量過高，鈣磷比例失衡，維生素缺乏等；管理因素如溫度高、飲水不足，雞舍通風不良，空氣中氨氣含量過高等。尿酸鹽沉積癥常引起雞飲水量、采食量下降，血液中尿酸含量升高，關節腫大，行動遲緩，嚴重的雞腎臟呈花斑狀，內臟、關節表面及其它間質組織有大量白色尿酸鹽結晶?；茧u不僅生長緩慢，生產性能降低，而且死亡率有的高達30%。

本試驗通過人工試驗出雞尿酸鹽沉積模型，觀察腎臟臨床病理變化，旨在探究禽尿酸鹽沉積的機制，為開發治療尿酸鹽沉積病的新藥提供指導，并為其預防提供試驗依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗動物與分組

8日齡AA雞60只，分為健康對照組（15只）、44%高蛋白組（15只），高鈣組（15只，0.5%鈣飲水）、44%高蛋白高鈣組（15只，0.5%鈣飲水）等4組。

1.1.2 飼料配制

魚粉（蛋白含量 60%，product of Peru）,飼料（鄭州市紅門飼料有限責任公司提供），健康組喂普通肉雞飼料，高蛋白組飼喂總蛋白為44.0%的含魚粉飼料，高鈣組飲水0.5%的鈣，高蛋白高鈣組飼喂總蛋白為44.0%的魚粉飼料和鈣含量0.5%的飲水。

1.1.3 試劑

鎢酸鈉（成都市科龍化工試劑廠，20081121）,碳酸鋰（天津市風船化學試劑科技有限公司，20090511），檸檬酸鈉 (天津市科密歐化學試劑開發中心，20090310），濃磷酸（天津市凱通化學試劑有限公司，20090612），濃硫酸（天津市凱通化學試劑有限公司，20070516）,乙二醇(天津市凱通化學試劑有限公司,20081106),碳酸鈣(天津市科密歐化學試劑開發中心，20090925），碳酸鈉(天津市科密歐化學試劑開發中心，20090416），氯化鈣(天津市科密歐化學試劑開發中心，20090628）。

1.1.4 藥物

尿酸對照品（北京中西遠大科技有限公司生產）。

1.1.5 儀器

TU-1810紫外分光光度計（北京普析通用儀器有限責任有限公司），TL80-1型離心沉淀機（江蘇姜堰市天力醫療機械有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 體重變化計算

先隨機取20只小雞，稱取每只雞的體重，取平均值,看雞的體重在什么數值范圍內最多,平均值±5.0 g。每組雞為15只，每組雞體重之間的平均值差異不能超過0.5 g。

1.2.2 水重、料重的計算

雞自由飲水和采食，記錄24 h的總飲水量和總采食量，計算每只雞每天平均的飲水量和采食量。

1.2.3 死亡率的統計

記錄小雞在造模試驗中，每天死亡的只數，觀察雞死亡的高峰期。

1.2.4 血液中尿酸鹽含量的測定

每組雞采血1 ml,放入1 ml含有3.8%的草酸鈉液體里面,混合均勻,12 h內測定。4組雞血混合物樣品、尿酸對照品和空白對照(蒸餾水)各組取0.5 ml，放入離心管中，加鎢酸試劑4.5 ml，靜止6 min，4000 r/min離心10 min,每離心管取上清液2.5 ml放入試管中,每管加0.5 ml的1 mol/l碳酸鈉溶液,混勻后,放置10 min,加入0.5 ml磷鎢酸應用液，混勻后室溫放置20 min，用分光光度計在波長660 nm，以空白對照調零，記錄各管的吸光度（λ），血清尿酸（μmol/l）=（測定管吸光度/標準管吸光度）×300×2。

1.2.5 雞生理、病理變化

解剖小雞，觀察小雞的消化系統、泌尿系統（特別是腎臟的變化）有什么病理變化。

2 結果與分析

2.1 試驗前后雞體重的變化（見表1）

表1 各組雞試驗前后體重變化

從表1可知：試驗前每組雞的平均體重在81.1～81.5 g,平均體重最大相差0.4 g；飼養5 d，每組雞的體重在134.6～204.9 g，平均體重最大相差70.3 g，體重差別明顯,高蛋白組每只雞平均增重68.0 g，高鈣組每只雞平均增重58.8 g，高蛋白高鈣組每只雞平均增重53.5 g，健康對照組每只雞平均體重增重123.7 g，這些數據說明：高蛋白和高鈣影響雞的正常生長發育，0.5%的鈣比44.0%的高蛋白對雞的生產性能影響更大，兩者聯用，進一步降低生產性能。從增重率上可以看出來，高蛋白高鈣組增重率最低，不及健康組的一半，其生產性能明顯受到抑制。

2.2 試驗前后雞飲水量和采食量的變化(見表2、表3)

表2 試驗中雞每天平均的飲水量（g）

從表2可知：給水第1 d，各組每只雞平均飲水量變化不是很大,在56.4～68.3 g；第5 d時,飲水量最少的高鈣組為30.2 g，飲水量最大的高蛋白組為116.8 g,高蛋白組是高鈣組的3.9倍,是高蛋白高鈣組的2.7倍,各組雞平均飲水量差異比較顯著。高蛋白組和健康對照組的雞平均飲水量從第1 d到第5 d是逐漸增加的,高蛋白組增加了53.7 g,健康對照組增加了47.6 g；而高鈣組則是逐漸遞減，從第1 d的56.4 g，減到第5 d的30.2 g；高蛋白高鈣組先增加再減少，但總體還是在減少。

表3 試驗中雞每天平均的采食量（g）

從表3可知：第1 d各組每只雞的平均采食量在32.5～34.3 g，相差不超過 2.0 g，第 5 d 時，高蛋白組每只雞的平均采食量為53.1 g，健康對照組為46.9 g，而高鈣組為17.3 g，高蛋白高鈣組為16.9 g，高蛋白組的每只雞平均采食量是高蛋白高鈣組的3.1倍多，是高鈣組的近3.1倍。各組每只雞的平均采食量和其飲水量呈同一趨勢，即高蛋白組和健康對照組的采食量每天逐漸增加，而高鈣組逐漸減少，高蛋白高鈣組還是先增加后減少。

2.3 雞死亡率的統計

模型試驗中，每組雞共15只，在5 d的試驗中，高蛋白組未見死雞，高鈣組在第4 d、第5 d各死一只，高蛋白高鈣組在第3 d、第4 d各死一只，第5 d死兩只。高鈣組的死亡率為13.33%，高蛋白高鈣組的死亡率為26.67%，與有關報道相符合。

表4 試驗中雞的死亡率

2.4 試驗雞血清中尿酸鹽含量的測定

用磷鎢酸還原法測定血清尿酸的含量，各組雞取1 ml雞血于含有1 ml草酸鈉試管中，經過處理，用紫外分光光度計在660 nm處測定其吸光度，并計算含量（見表 5），高蛋白尿酸含量為 297.90 μmol/l，較健康對照組 268.53 μmol/l高 29.37 μmol/l。試驗幾組雞中，高蛋白高鈣組血清尿酸含量最高為423.78 μmol/l，是健康對照組血清尿酸含量的1.6倍。試驗各組雞血清尿酸的含量測定結果與黎曉敏等雞血清尿酸測定結果比較接近，與李榮譽等雞血清尿酸測定結果相比偏低。

2.5 解剖死雞和健康對照雞比較病理變化

試驗結束后，記錄試驗數據。對比各組雞的精神狀態，從健康組中解剖一只雞，觀察其腎臟變化，腎臟結果見圖1，腎臟表面光滑，有光澤，顏色鮮潤，塊狀結構分布明顯，血液顏色鮮紅；從高蛋白高鈣組中，找一個精神萎靡的雞，解剖并觀察腎臟變化，其結果見圖2，腎臟表面無光澤、發干，顏色暗淡，腎臟腫大，塊狀結構分布不明顯，腎臟內部結構呈不規則的花紋狀，血液顏色變深。

表5 尿酸含量計算

圖1 健康雞腎臟

圖2 模型雞腎臟（花斑腎）

3 討論

3.1 尿酸鹽沉積機理

一方面生物沉積，自身免疫反應，體內抗原抗體反應沉淀物在腎臟蓄積，如：當病原體(如細菌、病毒、寄生蟲等)侵入雞體后，體內的防御系統就產生抵抗這些病原體的物質，稱之為抗體。在抗體抵抗抗原的過程中，抗體戰勝了入侵的病原體，使疾病得以痊愈；同時也破壞自身組織，從而引發疾病，另外，抗原抗體在競爭的過程中形成抗原抗體復合物，這些已形成的復合物可在腎臟內沉積；另一方面物理沉積，是由腎功能損傷（腎炎等），導致物質不能更好的代謝，在腎臟沉積，如：鈣過高或鈣磷比例失調，超出機體的吸收和排泄能力。大量的鈣鹽就會從血液中析出，沉積在腎臟，引起腎腫。飼料配制不合理或選擇原料使用不當，造成鈣、磷比例增大，就會促進血鈣升高，而增加腎臟排泄的負擔，長時間下去會因鈣鹽沉積于輸尿管內而引起腎臟發生病變，如腎結石和痛風病等；再一方面化學沉積，體內代謝的CO2、尿酸等物質在腎臟內與代謝的鈣、鎂等離子發生化學反應，形成碳酸鹽或尿酸沉淀，如：飼喂高蛋白飼料造成雞尿酸鹽沉積。由于家禽攝入蛋白質的代謝終產物是尿酸 (家畜是尿素)，若血液中尿酸增多，當超出腎臟的排泄限度時，則引起尿酸在體內的蓄積；同時，由于尿酸長期和過度地刺激腎小管上皮細胞，引起黏膜變性，致使腎臟排泄障礙，又加重尿酸鹽在體內的沉積。試驗選用高蛋白和高鈣飼料進行人工試驗得出雞尿酸鹽沉積模型，可有上述理論作為依據。

3.2 尿酸鹽沉積模型

試驗采用高蛋白和高鈣的飼料，飼喂小雞，造成尿酸鹽沉積。建立的尿酸鹽沉積模型，主要通過小雞的增重率、采食量、飲水量、死亡率、血清尿酸鹽含量測定、腎臟病理變化等指標進行考察。小雞的增重率是考察尿酸鹽沉積模型的重要指標之一，小雞分組前，體重有一定的差異，有的差異甚大，試驗去除體重大、小兩端的雞，8日齡的小雞體重平均為81.0 g，以(81.0±5.0)g選雞分組，一方面每組雞整體體重差異不大，另一方面每只雞個體差異也不大，這樣試驗數據更科學。采食量、飲水量主要考察高蛋白、高鈣對雞生產性能的影響。死亡率和雞臨床病理變化的考察，主要更接近市場上雞發生的尿酸鹽沉積癥，一方面雞飲水采食量下降，精神萎靡，雞排出糞便尿酸鹽過多，腎臟腫大，呈花斑狀等，另一方面發生尿酸鹽沉積癥會導致一定數量的雞死亡，有報道稱尿酸鹽沉積癥死亡率可達40%以上。

3.3 尿酸鹽沉積模型的建立，對養禽業有重大的指導意義，在養雞飼料配制中，注意蛋白和鈣的比例，高蛋白易引起尿酸鹽沉積癥，影響雞的生產性能；高鈣不僅能引起尿酸鹽沉積癥，嚴重的還能引起雞成批量死亡，即使鈣磷比例適當，鈣的含量也不能超過1.0%。尿酸鹽沉積模型的建立，為新藥的研究與開發，提供了試驗依據。

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