中藥復(fù)方對2型糖尿病大鼠的治療作用及其機制研究

趙美燕

糖尿病是一種慢性代謝性疾病，由胰島功能減退、胰島素抵抗等而引發(fā)的糖、蛋白質(zhì)、脂肪、水和電解質(zhì)等一系列代謝紊亂綜合征，臨床上以高血糖為主要特點，典型病例可出現(xiàn)“三多一少”的癥狀，嚴重影響著人類的健康。中藥治療糖尿病具有獨特的效果，且毒副作用小，可長期應(yīng)用。筆者通過中藥復(fù)方對2型糖尿病大鼠治療作用的研究，初步探討了其治療2型糖尿病的作用機制[1－3]，現(xiàn)報道如下。

1 材料與方法

1.1 藥物配制及試劑

中藥復(fù)方湯劑，由大黃、黃連、黃芪、赤芍、白術(shù)、知母、山藥、枸杞、人參、金銀花等12味中藥組成，每劑中藥加10倍量水，浸泡30 min，常規(guī)煎煮30 min 2次，合并藥液濃縮至100 mL;正糖膠囊(威海東寶制藥有限公司，國藥準字 B20020072，批號為110501)，臨用前配制成 0.05 g/mL濃度。鏈脲佐菌素(STZ，sigma公司產(chǎn)品，由拜耳醫(yī)藥保健有限公司提供，批號S－0130)，－20℃保存，用時用0.1 mol/L的檸檬酸緩沖液在冰浴下配制成10 g/L的STZ溶液，調(diào)至pH 4.0，現(xiàn)配現(xiàn)用。

1.2 2型糖尿病動物模型的建立[4－7]

Wistar大鼠，體重180～200 g，雄性90只，由新疆醫(yī)科大學實驗動物中心提供，生產(chǎn)許可證號為SCXK(新)2003－0001。其中15只為正常組，喂以正常飼料(給予每100 g體重1.0 mL生理鹽水)。將75只造模大鼠隨機分為5組，分別為模型組(給予每100 g體重1.0 mL生理鹽水)，陽性藥物對照組(正糖膠囊0.75 g/kg)，中藥復(fù)方低(每 100 g 體重 0.5 mL)、中(每 100 g 體重 1.0 mL)、高劑量組(每100 g體重2.0 mL)。5組均喂以高脂飼料(膽酸鈉0.5%，膽固醇 1%，豬油 5%，蛋黃粉 10%，基礎(chǔ)飼料 83.5%)。各組均自由進食和飲水，共計12周。于第4周后按腹腔注射鏈脲佐菌素50 mg/kg，正常組大鼠予以枸櫞酸緩沖液腹腔注射進行試驗，5 d后尾靜脈取血，測定空腹血糖、總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)。選取血糖高于11.1 mmol/L的大鼠作為糖尿病模型大鼠，造模后的大鼠均表現(xiàn)明顯的多飲、多尿、多食、體重下降，并有精神萎靡、反應(yīng)遲鈍、動作遲緩、蜷臥拱背、皮毛無光澤、松散、身體消瘦、窩濕等現(xiàn)象。

1.3 指標檢測

每天觀察各組大鼠的活動狀態(tài)、精神狀態(tài)、攝食量、飲水量、皮毛、大小便情況，于第12周稱重，腹主動脈取血測血糖、糖耐量、TC、TG、糖化血紅蛋白、腫瘤壞死因子－α(TNF－α)及白細胞介素6(IL－6)等值。

1.4 統(tǒng)計學處理

所有計量資料均以均數(shù)±標準差(X±s)表示。采用PEMS 3.1統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析，組間比較采用方差分析。

2 結(jié)果

2.1 體重

結(jié)果見表1。可見，治療后各組大鼠體重均比給藥前體重有所增加，模型組大鼠體重比給藥前減輕。

2.2 空腹血糖

結(jié)果見表2?？梢?，模型組大鼠空腹血糖較正常組明顯升高。各組大鼠經(jīng)過治療后空腹血糖值與模型組比較有顯著性差異(P＜0.05)，各組治療前后空腹血糖值也有明顯下降。

表1 給藥前后各組大鼠體重變化(X ± s，n=15)

表2 給藥前后各組大鼠血糖變化(X ± s，n=15，mmol/L)

2.3 糖耐量

給藥第12周后，大鼠禁食不禁水8 h，按2 g/kg的劑量腹腔注射 1.11 mol/L 的葡萄糖溶液，然后測定 0，60，120，180，240 min血糖值，結(jié)果見表3。可見，正常組大鼠在180 min時血糖恢復(fù)到正常血糖值，模型組大鼠在240 min時血糖值仍然維持較高的水平，糖耐量異常。各給藥組大鼠在240 min時血糖值開始下降，說明中藥復(fù)方對糖耐量異常有所改善。

表3 第12周各組糖耐量試驗結(jié)果(X ± s，n=15)

2.4 血脂

結(jié)果見表4。

表4 給藥前后各組血脂變化比較(X ± s，n=15，mmol/L)

2.5 糖化血紅蛋白、TNF－α及IL－6

結(jié)果見表5?？梢?，模型組大鼠體內(nèi)糖化血紅蛋白含量較正常組明顯升高，即中藥復(fù)方對糖尿病大鼠糖化血紅蛋白含量有所降低。各給藥組均降低了2型糖尿病大鼠血清IL－6和TNF－α，但組間無顯著性差異，說明無劑量依賴性。

3 討論

糖尿病屬中醫(yī)“消渴”范疇，基本病機為陰虛燥熱，本虛標實，陰虛為標，燥熱為本。近年來大量研究說明，2型糖尿病的發(fā)生、發(fā)展與許多炎癥因子密切相關(guān)。隨著體內(nèi)TNF－α，IL－6等多種炎癥因子的釋放，引起胰島素抵抗，發(fā)生胰島素分泌功能障礙。許多炎癥因子如 TNF－α、白細胞介素1(IL－1)、IL－6、γ－干擾素(IFN－γ)等，可通過血液和(或)旁分泌的作用干擾胰島素的信號轉(zhuǎn)導，導致胰島素敏感細胞(肝細胞、肌肉細胞和脂肪細胞)內(nèi)的胰島素受體底物絲氨酸磷酸化，抑制其酪氨酸磷酸化，導致胰島素與胰島素受體的結(jié)合能力下降，并減弱胰島素激活其下游的磷脂酰肌醇－3－激酶結(jié)合能力，干擾胰島素信號經(jīng)IR/IRS/PI－3K通路下傳，從而誘發(fā)胰島素抵抗(IR)[8－12]。本試驗結(jié)果可知，陽性對照組及中藥復(fù)方各劑量組對2型糖尿病大鼠糖耐量異常有一定的改善作用，明顯降低了血糖、糖化血紅蛋白、TC，TG，IL－6，TNF－α，其作用機制可能與減少炎癥因子釋放，增加胰島細胞敏感性有關(guān)。其他機制例如抑制α－葡萄糖苷酶活性、提高超氧化物歧化酶(SOD)活性、清除自由基、抑制脂質(zhì)過氧化、對受損胰島B細胞修復(fù)作用等，還需進一步研究。

表5 第12周各組糖化血紅蛋白、TNF－α及IL－6比較(X ± s，n=15)

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