子癇前期胎盤中Endoglin和轉化生長因子β1的表達及相關性研究

劉 金 ，梁義娟 ，薛會靈 ，趙 丹 ，呂麗娟

（1.河北大學附屬醫院 產科，河北保定 071000；2.保定市第一中心醫院 產科，河北保定 071000；3.保定市淶源縣婦幼保健院，保定 074300）

子癇前期是妊娠期特有的疾病，在妊娠期婦女中發生率約為5%，其嚴重的并發癥是孕產婦及圍生兒死亡的重要原因之一[1，2]，目前認為滋養細胞浸潤能力下降造成滋養細胞侵入子宮壁過淺和螺旋動脈重塑障礙是子癇前期發生的主要機制。Endoglin是一種整合于細胞膜上的跨膜糖蛋白，是轉化生長因子β（transforming growth factor β，TGFβ）受體家族的輔助蛋白質，二者不僅與血管的發育及重塑有關，還與滋養細胞的分化及浸潤有關。本研究通過檢測子癇前期胎盤組織中Endoglin和TGFβ1的表達，探討二者在子癇前期發生發展中的作用及其相關性。

1 資料與方法

1.1 研究對象

收集2010年10月～2011年10月就診于河北大學附屬醫院的子癇前期患者40例作為病例組，年齡 22～31 歲（27.6±3.5 歲），孕周 34～41 周（37.5±1.5 周），診斷標準參照《婦產科學》[3]，其中輕度子癇前期患者15例，重度子癇前期患者25例。另選擇同期住院分娩的健康孕婦35例作為正常對照組，年齡 20～33 歲（26.0±3.7 歲），孕周 37～42周（39.0±1.8周）。所有孕婦均為單胎妊娠，既往無慢性高血壓、糖尿病、腎炎、心臟病等內科疾病。

1.2 實驗方法

1.2.1 標本采集與試劑來源

胎盤一經娩出，立刻于胎盤母體面取大小約1cm×1cm×1cm組織（無出血、壞死及梗死），0.9%鹽水沖凈后10%的福爾馬林液固定，常規石蠟包埋、切片。TGFβ1兔抗人多克隆抗體及Endoglin鼠抗人CD105單克隆抗體均購自北京天恒博晟科技有限公司。

1.2.2 免疫組化檢測TGFβ1和Endoglin的表達

TGFβ1和Endoglin的染色表達操作按說明書進行。結果判定：TGFβ1和Endoglin染色陽性為胞膜或胞質中有棕黃色顆粒。結果應用全自動圖像分析儀 （彩色圖像細胞免疫組化面積分析法），在同一條件下，對切片的TGFβ1和Endoglin進行定量分析。

1.3 統計學方法

統計學處理應用SPSS16.0統計軟件包。多組比較采用完全隨機設計的方差分析F檢驗，組間比較采用兩兩比較的q檢驗；相關分析采用簡單直線相關。

2 結果

2.1 胎盤組織中TGFβ1表達

TGFβ1陽性表達在胎盤絨毛合體滋養細胞的胞膜和胞漿上。定量分析：輕度組與正常組比較無顯著性差異（P＞0.05）；重度組與正常組、輕度組比較均有顯著性差異（均P＜0.01），結果見表1。

表1 Endoglin和TGFβ1在子癇前期胎盤組織中的表達情況

2.2 胎盤組織中Endoglin的表達

Endoglin陽性表達在胎盤的合體滋養細胞的細胞膜上。定量分析：輕度組與正常組比較、重度組與正常組比較以及重度組和輕度組比較均存在顯著性差異（P＜0.05，P＜0.01），結果見表 1。

Endoglin的表達水平與TGF β1呈顯著正相關（r=0.795，P＜0.05）。

3 討論

轉化生長因子β（transforming growth factor β，TGFβ）超家族包括多潛能的細胞因子和兩型受體，可以調節細胞的諸多重要生物學功能，如細胞分化、增殖、運動、凋亡等[4]。Endoglin是分子量為180kD的跨膜糖蛋白分子，主要表達于人血管內皮細胞和胎盤合體滋養細胞的細胞膜上，其內包含豐富的絲/蘇氨酸控制區，絲/蘇氨酸蛋白激酶系統激活后，進而使下游的轉錄因子磷酸化，最終啟動細胞核內與血管生成有關的轉錄，參與血管發育和重塑[5～7]。同時Endoglin還作為一種缺氧誘導蛋白，與細胞增殖及NO信號系統有關。Gilbert等[8]通過缺氧建立妊高癥孕鼠模型，發現在缺氧的影響下妊高癥孕鼠胎盤中Endoglin的表達量明顯升高，是正常對照組的2倍，同時正常孕鼠體內也有低量的表達，說明妊娠依賴于Endoglin的正常表達，但當其表達異常時就會引發病理改變。Caniggia等[9]通過體外試驗證實，用反義的寡核苷酸或 Endoglin抗體阻斷Endoglin的表達后能刺激絨毛外細胞滋養細胞的分化和浸潤，說明Endoglin是調節滋養細胞分化侵入的關鍵的負性調節因子。

子癇前期的病理基礎是全身小血管痙攣，內皮細胞受損，引發的一系列病變。有研究顯示通過上調TGFβ1的表達，誘導靜脈內皮細胞Endoglin的表達，引發血小板粘附、聚集，可促進深靜脈血栓形成[10]。我們通過免疫組化方法檢測胎盤組織中Endoglin和TGFβ1的表達，發現Endoglin和TGFβ1在正常妊娠胎盤組織中均有較低表達，說明二者對維持正常妊娠有一定作用，子癇前期組與正常妊娠組分布相同但著色明顯加深，說明當其表達增高時，對滋養細胞的分化和浸潤的負調控作用增強，引起胎盤淺著床及子宮螺旋動脈重鑄障礙，參與了子癇前期的發生。同時Endoglin隨著子癇前期病情的加重表達明顯增強，說明Endoglin的表達情況與疾病的嚴重程度密切相關。

總之，Endoglin和TGFβ1共同參與了子癇前期的發病，而且Endoglin與疾病嚴重程度密切相關。可以設想將二者聯合起來作為臨床子癇前期的監測指標，有效調控Endoglin和TGFβ1的作用通路有望成為預防和治療子癇前期的新途徑。

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