高效液相色譜法測定苯佐卡因軟膏中苯佐卡因含量

楊麗杰，牟 陽，王金華，胡寶榮，張 婧

(哈爾濱醫科大學附屬第一醫院藥學部，黑龍江 哈爾濱 150001)

苯佐卡因軟膏為醫院制劑，是苯佐卡因單方制劑，具有局部麻醉作用，臨床用于皮膚瘙癢與黏膜和創面、潰瘍面及痔瘡的鎮痛等。目前醫院制劑質量規范的含量測定方法為永停滴定法，而永停滴定儀的適用范圍較窄。本試驗的目的是通過高效液相色譜法檢測苯佐卡因軟膏的含量，建立一個準確、可靠的檢測方法。

1 儀器與試藥

Waters 600高效液相色譜系統(2996檢測器、717自動進樣器、Empower數據系統);BP211D 10萬分之一天平(德國Sartorius公司)。苯佐卡因對照品(藥用原料，永停滴定法測得含量為99.2%);苯佐卡因軟膏(哈爾濱醫科大學附屬一院制劑室);甲醇為色譜純，水為超純水(自劑)，其余試劑均為分析純。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

分析柱:SinoChrom ODS－BP 柱(250 mm ×4.6 mm，5 μm);流動相:甲醇－水－冰醋酸(80∶20∶0.5);柱溫:25℃;流速:1.0 mL/min;檢測波長:291 nm。

2.2 溶液配制

取105℃干燥至恒重的苯佐卡因對照品100 mg，精密稱定，置100 mL量瓶中，加甲醇溶解，并稀釋至刻度搖勻，得苯佐卡因對照品溶液(質量濃度為 100 μg/mL)。取苯佐卡因軟膏0.10 g，置50 mL容量瓶中，加甲醇30 mL，置超聲水浴中加熱溶解(水浴溫度40℃)，待溶液降至室溫，加甲醇至刻度搖勻，得供試品溶液。另吸取空白基質(除苯佐卡因外的軟膏基質)0.10 g，同法制備空白溶液。

2.3 波長選擇及專屬性試驗

取對照品溶液10 μL進樣，在200～400 nm波長范圍內掃描，得最大吸收波長。空白溶液和供試品溶液分別進樣10 μL。結果顯示苯佐卡因在291 nm波長處有最大吸收，而其他成分在該波長處無吸收，故選擇291 nm波長作為檢測波長，取空白基質和苯佐卡因沒有干擾。將空白基質和供試品按2.1項下操作所得溶液和對照品溶液，各取10 μL進樣，得色譜圖。由圖1可見，方法專屬性強，且雜質不影響主成分測定。

2.4 方法學考察

線性關系考察:分別進樣苯佐卡因對照品溶液2.5，5.0，10.0，15.0，20.0，30.0 μL，以對照品質量濃度 C(μg/mL)為縱坐標、峰面積 A為橫坐標進行線性回歸，得回歸方程 Y=1.19×106X －2.75 ×105，r=0.999886(n=6)。結果表明，苯佐卡因質量濃度在2.50～40.00 μg/mL范圍內與峰面積線性關系良好。

圖1 高效液相色譜圖

加樣回收試驗:精密稱取已知含量的樣品適量，6份，置具塞錐形瓶中，分別加入苯佐卡因對照品6份，按2.1項下條件測定供試品的苯佐卡因量，計算回收率。結果見表1。

表1 苯佐卡因加樣回收試驗結果(n=6)

精密度試驗:取同一批號樣品5份，用甲醇將樣品稀釋成含苯佐卡因約100 μg/mL的待測溶液，連續進樣6次，分別測定其峰面積。結果其 RSD小于0.14%，表明方法精密度良好。

2.5 樣品含量測定

取3批樣品，按照2.2項下供試品溶液的配制方法處理樣品，進樣10 μL，記錄峰面積值，計算樣品中藥物的標示量百分含量。結果批號分別為20091013，20100104，20100305的樣品標示百分含量分別為 100.08% ，101.30% ，99.96%。

3 討論

苯佐卡因軟膏為黑龍江省醫院制劑品種，筆者醫院制劑室生產該藥，療效得到了廣大醫療工作者的認可，檢測方法為永停滴定法，但該方法存在檢測靈敏度不好、誤差較大的不足。文獻[3]報道了苯佐卡因脂質體凝膠的檢測[3]。苯佐卡因軟膏有采用紫外分光光度法檢測的報道[1]，且有關苯佐卡因其他劑型的研究報道[2－3]，但未見苯佐卡因軟膏高效液相色譜法測定的報道。本試驗結果顯示，在本試驗條件下基質成分對苯佐卡因的檢測沒有影響，具有出峰時間適當，操作簡便、快速、準確的特點。因此，該方法可用于該制劑的含量測定。

[1]王 瑞，張 淼.紫外分光光度法測定苯佐卡因軟膏中苯佐卡因的含量[J].第一軍醫大學分校學報，2005，28(1):65－66.

[2]茅志安，姚健康，張 艷.高效液相色譜法測定炎痛凈乳膏中雙氯芬酸鈉和苯佐卡因的含量[J].中國現代應用藥學雜志，2002，19(2):149－150.

[3]單萍萍，郭 靜，申國慶.高效液相色譜法同時測定抗敏止癢水中兩組分含量[J].中國醫院藥學雜志，2007，27(9):1319－1320.