清潔級成年SD 大鼠肝臟自發病變的組織病理學研究

黃佳寧，陳秀錦，林 澍

（1.福建省疾病預防控制中心，福建福州350001；2.福建省實驗動物質量檢測中心，福建福州350001；3.福州出入境檢驗檢疫局，福建福州350003）

SD大鼠常用于毒理學、營養學、內分泌學、傳染病、心血管疾病、神經病學、腫瘤等醫學研究［1-2］。肝臟是大鼠重要的代謝器官，也是許多化學、物理、生物致病因素的靶器官之一，大鼠肝臟病理變化的觀察是許多醫學研究觀察指標之一。自發性疾病指實驗動物未經任何有意識的人工處理，在自然情況下所發生的疾病［3］。對大鼠肝臟自發病理變化的了解，可以幫助我們更好地識別醫學研究中各種肝臟病理變化的成因，對研究結果評價起到了重要作用。目前對SD大鼠肝臟自發病理的研究報告幾乎沒有，此項研究對本實驗室2007年-2010年3 000只清潔級SD大鼠肝臟自發病理變化資料進行了分析總結。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 上海斯萊克實驗動物有限責任公司提供的清潔級SD大鼠3 000只，雌雄各半，4周齡，許可證號：SCXK（滬）2007-0005。

1.1.2 飼養環境 福建省疾病預防控制中心SPF級動物實驗室，許可證號：SYXK（閩）2007-0006。

1.1.3 儀器 SHANDON EXCELSIOR全自動密封脫水機，BM-VI生物組織冷凍包埋機，SHANDON Finesse325石臘切片機，CS-IV攤片烤片機，電熱鼓風干燥箱，OLYMPUS BX-51研究型生物顯微鏡。

1.1.4 試劑 100mL／L甲醛溶液，二甲苯，無水乙醇，蘇木素，伊紅，硫酸鋁鉀，碘酸鈉，丙三醇，冰醋酸，濃鹽酸，石蠟。

1.2 方法

1.2.1 實驗動物的處理 試驗期間動物單籠喂養，自由進食飲水，喂養30d（8周齡）后，頸椎脫臼處死，取出肝臟，100mL／L甲醛溶液固定，常規石蠟切片，HE染色，顯微鏡觀察。

1.2.2 試驗數據統計分析 試驗數據用SPSS軟件進行卡方檢驗，當T＜5時，選用Fisher精確檢驗。

2 結果

2.1 肝臟病理變化鏡檢特點

2.1.1 細胞水腫 包括細胞腫脹、顆粒變性及氣球變性，肝細胞腫大，胞質疏松，可出現紅染顆粒狀物質，隨著肝細胞水腫程度增大，細胞體積增大明顯，胞質幾乎完全透明，細胞由多角形變為圓形（圖1）。

2.1.2 脂肪變性 肝細胞胞質中出現大小不等的球形脂滴，呈空泡狀，大者可充滿整個細胞而將胞核擠至一側（圖2）。

2.1.3 炎癥細胞浸潤 在肝小葉和或匯管區出現以慢性炎癥細胞為主的小灶性炎癥細胞浸潤（圖3）。

2.1.4 肝竇擴張 肝臟充血，肝竇呈現輕到中度擴張（圖4）。

2.1.5 灶性壞死 肝細胞呈小灶性凝固性壞死，可伴或不伴炎細胞浸潤（圖5）。

2.1.6 肝內膽管增生 肝內膽管輕到中度增生，排列整齊，細胞無明顯異型性（圖6）。

2.1.7 囊腫 為孤立性肝囊腫，囊內含少量液體（圖7）。

2.1.8 肝細胞癌 癌細胞條索狀排列紊亂，核異型明顯，核增大，深染，核仁突出，胞漿嗜酸性較弱（圖8）。

圖1 細胞水腫（HE，200×）Fig.1 Cell edema（HE，200×）

圖2 脂肪變性（HE，200×）Fig.2 Fat degeneration（HE，200×）

圖3 炎癥細胞浸潤（HE，200×）Fig.3 Inflammatory cell infiltration（HE，200×）

圖4 肝竇擴張（HE，200×）Fig.4 Sinus hepaticus expansion（HE，200×）

圖5 灶性壞死（HE，200×）Fig.5 Focal necrosis（HE，200×）

圖6 肝內膽管增生（HE，200×）Fig.6 Intrahepatic bile duct hyperplasia（HE，200×）

圖7 囊腫（HE，200×）Fig.7 Cyst（HE，200×）

圖8 肝細胞癌（HE，200×）Fig.8 Hepatocellular carcinoma（HE，200×）

2.2 肝臟病理變化的發生率

8周齡SD大鼠肝細胞水腫發生率為4.20%，脂肪變性發生率為9.77%，炎細胞浸潤發生率為12.30%，肝竇擴張發生率為3.07%，灶性壞死發生率為0.23%，肝內膽管增生發生率為0.07%，肝囊腫發生率為0.10%，肝細胞癌發生率為0.03%（表1）。

2.3 肝臟病理變化的無性別差異

由表2可見，肝臟病理變化的性別差異無統計學意義（P＞0.05）。

表1 SD大鼠肝臟自發病理變化Table 1 The spontaneous histopathological lesions in livers of SD rats

表2 不同性別SD大鼠肝臟自發病理變化Table 2 The spontaneous histopathological lesions in livers of SD rats between different gender

3 討論

SD大鼠作為醫學研究最常應用的實驗動物之一，對SD大鼠肝臟自發病理變化的總結可以幫助我們更好地判別醫學研究中大鼠肝臟病理變化是自發還是某醫學研究過程引起的，對正確評價研究結果起到了重要作用［4-6］。大鼠壽命為2.5年～3年，一般20d～21d斷奶，6周齡～8周齡性成熟，本研究采用8周齡大鼠即為成年大鼠［7-8］。

本研究觀察到的成年SD大鼠肝臟的自發病理變化包括細胞水腫、脂肪變性、炎細胞浸潤、肝竇擴張、灶性壞死、肝內膽管增生、囊腫、肝細胞癌等。其中炎細胞浸潤、脂肪變性、細胞水腫、肝竇擴張發生率較高。細胞水腫是細胞損傷中最早出現的改變，系因線粒體受損，ATP生成減少，細胞膜Na＋-K＋泵功能障礙，導致細胞內鈉離子和水過多聚積。細胞水腫常由感染、缺氧、中毒引起［9］。本研究中考慮到飼養條件，缺氧、中毒可能性小，肝細胞水腫可能主要由感染引起。本研究中脂肪變性可能由營養過剩或營養不良引起。發生機制可能是：①肝細胞質內脂肪酸增多，如高脂飲食或營養不良時，體內脂肪組織分解，過多的游離脂肪酸經由血液入肝；②脂蛋白、載脂蛋白減少：營養不良時，肝細胞中脂蛋白、載脂蛋白合成減少，細胞輸出脂肪受阻而堆積于細胞內［9］。慢性炎癥細胞浸潤考慮為病源微生物的持續存在，灶性壞死也是感染的表現。肝竇擴張各例基本未伴有明顯炎癥細胞浸潤及纖維組織增生，慢性右心衰可排除，經分析與處死過程中動物掙扎有關。肝內膽管增生、囊腫、肝細胞癌發生率極低，考慮為動物基因突變等原發因素的可能性較大。

肝臟常見自發病理變化的性別差異無統計學意義（P＞0.05），說明成年SD大鼠肝臟自發病理變化不隨性別改變。本文為以成年SD大鼠為實驗動物的醫學研究提供了一定基礎資料。

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