S-100與大腸癌的相關性病理學研究

張建坤 龐國蓮 陳昊賓 羅賢勇

（云南省曲靖市第一人民醫院，云南 曲靖 655000）

大腸癌是我國常見的消化道惡性腫瘤之一，其發病率有逐年升高趨勢，且發病年齡年輕化，大腸癌的發生、發展與癌基因的激活、抑癌基因的失活、基因的突變或丟失及蛋白的過度表達等密切相關[1]。本文應用免疫組化方法檢測和分析S-100蛋白在大腸癌中的表達，旨在探討其與大腸癌發生發展的相關性。

1 材料與方法

1.1 研究對象

收集云南省曲靖市第一人民醫院病理科2009年9月至2011年6月期間有明確病理診斷的大腸癌手術標本46例。并收集該46例大腸正常組織標本作為對照組。年齡32歲～70歲，中位年齡51歲。

1.2 方法

采用鏈菌素親生物素-過氧化酶法（S-P法）：石蠟切片先經過二甲苯脫蠟，后梯度乙醇水化。再將切片置于10mmol/L檸檬酸鈉緩沖液（pH=6.0）內，高溫高壓抗原修復2min；一抗采用1∶100稀釋的S-100兔抗人多克隆抗體（購自福州邁新生物技術有限公司）。4℃溫育過夜。其余步驟按常規免疫組化S-P法進行，DAB顯色，蘇木素復染。乙醇梯度脫水，二甲苯透明，中性樹膠封片。陰性對照采用PBS液代替第一抗原，用已知陽性組織切片作陽性對照。所有對照均與實驗標本在相同條件下進行免疫組化染色。

1.3 結果判定

S-100蛋白表達定位于細胞核或細胞漿，呈棕黃色顆粒狀。每張切片根據染色強度進行評分：無色（-）為陰性；淺黃色（±）為弱陽性；黃色（+）為陽性；棕黃色（++）強陽性。對照組大腸正常粘膜組織亦根據染色強度進行評分。

1.4 統計學處理

應用spss 16.0 for windows對數據進行統計分析，χ2檢驗或作相關分析，以P＜0.05為差異顯著性標準。

2 結 果

2.1 S-100蛋白在不同部位表達情況

本試驗46例大腸癌組織中有38例S-100蛋白表達，陽性率82.61%（38/46）；46例大腸正常組織S-100蛋白均不表達，其陽性率為0.00%（0/46），大腸癌組織中S-100蛋白表達陽性率顯著高于大腸正常粘膜，二者相比具有顯著性差異（P=0.00）。

2.2 大腸癌組織中S-100蛋白表達與臨床病理特征的關系

本實驗18例高分化大腸癌病例中有6例S-100蛋白表達，陽性率為33.33%（6/18），28例中低分化大腸癌中有24例呈陽性，陽性率為85.71%（24/28），二者相比差異具有統計學意義（χ2=11.67，P=0.00）；在無淋巴結轉移的20例大腸癌中，S-100蛋白表達的為8例，陽性率為40.00%（8/20），在有淋巴結轉移的26例大腸癌中，有23例S-100蛋白表達陽性，其陽性率為88.46%（23/26），差異具有統計學意義（χ2=8.95，P=0.00）；在臨床分期中，判定為I+II期的24例大腸癌與判定為III期的22例大腸癌組織相比，差異無統計學意義（χ2=5.78，P=0.59）；在25例男性病例與21例女性病例中，差異無顯著性（χ2=0.12，P=0.67）；患者年齡＜51歲的19例大腸癌與患者年齡≥51歲的27例大腸癌組織相比，差異也無統計學意義（χ2=0.03，P=0.98）。

由上所知，S-100蛋白表達與大腸癌的分化程度和有無淋巴結轉移密切相關（P＜0.05），而與大腸癌的臨床分期、患者性別、年齡無相關性（P＞0.05）。

3 討 論

S-100蛋白是從牛腦中提取的一種可溶性、富含天門冬氨酸和谷氨酸的腦特異性的酸性蛋白，相對分子質量為20000～25000，因其能溶于100%的硫酸銨溶液，所以S-100蛋白被看作神經外胚葉腫瘤的一種很有用的抗原，與神經生理功能有關，是一組低分子量的鈣結合調節蛋白之一[2]。S-100蛋白有三種亞型，即S-100ao、S-100a、S-100b，在細胞周期過程、細胞分化、細胞骨架和膜相互作用中起作用[3]。S-100蛋白主要存在神經組織、垂體、頸動脈體、腎上腺髓質、唾液腺及少數間葉組織，主要用于星形細胞少突膠質瘤、室管膜瘤、神經母細胞瘤、神經鞘瘤、惡性黑色素瘤、脂肪肉瘤的診斷與鑒別診斷。

本研究對46例大腸癌組織標本及大腸正常組織中S-100蛋白檢測結果顯示，高分化癌組織中S-100蛋白陽性率為33.33%（6/18），中～低分化癌中陽性率為85.71%（24/28），二者相比差異具有統計學意義（χ2=11.67，P=0.00）；在無淋巴結轉移的病例中，S-100蛋白陽性率為40.00%（8/20），在有淋巴結轉移的病例中其陽性率是88.46%（23/26）。二者相比差異具有統計學意義（χ2=8.95，P=0.00），由此可見，S-100蛋白陽性表達在大腸癌組織中明顯高于在大腸正常組織中，并隨著大腸癌分化程度的降低S-100蛋白的表達逐漸升高；在有淋巴結轉移的病例中高于在無淋巴結轉移的病例，因此，大腸癌組織中S-100蛋白表達陽性率與分化程度、和有無淋巴結轉移具有相關性，而S-100蛋白表達水平與大腸癌臨床分期、患者性別、年齡、無相關性（P＞0.05）。

綜上所述，本實驗對S-100蛋白在46例大腸癌組織的表達檢測分析結果顯示，S-100蛋白在低分化的大腸癌中表達強陽性，因此可能對大腸癌的發生、發展具有重要的作用；S-100蛋白在有淋巴結轉移的大腸癌中的表達明顯，故認為S-100蛋白的表達情況可作為判斷大腸癌預后的指標之一。因此，S-100蛋白可作為判斷大腸癌分化程度和預后的參考指標，尤其對大腸癌惡性演進以及判斷預后具有重要意義，可作為新的生物標志物及治療大腸癌浸潤轉移的潛在靶目標。

[1]王金松,曾樹林.S100蛋白在大腸癌組織中的表達及其臨床意義[J].微循環學,2011,21(1):37-41.

[2]Lee GJ,Carter TE,Villagarcia MR.A major QTL conditioning salt tolerance in S-100 soybean and descendent cultivars[J].Theoretical Applied Genetics,2005,10(4):787-791.

[3]Magro G,Grasso S,Emmanuele C.Immunohistochemical distribution of S-100 protein and type IV collagen in human embryonic and fetal sympathetic neuroblasts[J].Histochemical J,1995,27(9):694-701.