常見白細胞五分類技術簡介

田亮 陳玲艷

(1.山東省萊蕪市人民醫院設備科; 2.山東省萊蕪市人民醫院招標辦公室 山東萊蕪 271100)

血球計數儀是醫院最為常見的檢驗設備。自上世紀90年代中期以來,國外許多廠家逐步開始研制和推出具有五分類或更多項白細胞分析技術的全自動型血液計數儀。2000年以來隨著國內經濟發展,各級醫院也開始普及五分類的血球計數儀。各廠家實現白細胞五分類的技術各不相同,各有特色。大體有以下幾種分類技術:

1 采用VCS探針技術進行白細胞的五分類

這種技術集合3種測定方法于一體,同時對一個細胞進行多參數分析的方法,是庫爾特公司的專利技術。其中V探針進行體積測量,采用的是傳統的電阻法原理,可將體積大小差異明顯的淋巴和粒細胞分開;S探針是檢測細胞的高頻電導性,該技術可檢測細胞內容物的復雜程度,辨別細胞體積相同而內部性質不同的細胞,可將體積大小類似的淋巴細胞和嗜堿性細胞區分開。S探針是采用激光照射細胞。激光可穿透細胞,探測細胞內核分葉狀況和顆粒情況,通過分析光散射信息對細胞內顆粒性進行分析,用于單核細胞和3種粒細胞的區分。通過綜合處理3個探針檢測到的數據,得到白細胞的五分類結果。

2 綜合采用阻抗法、激光散射法和熒光染色法進行五分類

這是日本希森美康公司常用的檢測方法。直流電阻抗法用于測量細胞體積大小。激光照射產生的前向散射光、側向散射光和側向熒光可用于探測測白細胞體積大小、細胞內容物的復雜情況,側向熒光可以反映細胞內部顆粒的復雜性。試劑中增加了針對DNA/RNA染色的熒光染料,激光照射后產生熒光信號,和側向散射光一道繪制成二維散點圖進行白細胞分類。

3 激光散射和細胞化學染色技術

采用該技術的儀器在白細胞分類上采用了雙通道設計,白細胞過氧化酶通道和嗜堿細胞通道。在過氧化酶通道內不同的粒細胞過氧化物酶含量不同,嗜酸性細胞具有最強的過氧化物酶,中性粒細胞含有較強的過氧化物酶,嗜堿粒細胞不含此酶。單核細胞含有較弱的過氧化物酶。淋巴細胞不含過氧化物酶。根據激光法散射光強度進行的細胞體積的測量同時也獲得了細胞大小的信息,除了嗜堿細胞外每個類型的細胞根據它們的大小及含過氧化酶的強度在散點圖上形成分類。在嗜堿細胞通道,采用嗜堿細胞試劑可將除嗜堿細胞以外的其他白細胞膜破壞,僅剩裸核。被激光照射后就可以區分不含過氧化物酶的淋巴細胞與嗜堿粒細胞。

目前各級醫院對五分類的血球計數儀要求逐步在提高,保證正常白細胞5項分類結果準確計數、全自動分析網織紅細胞等已經成為醫院檢驗科的基本需求。目前在血細胞形態學方面,無論是五分類還是更多的分類,甚至是具有專門幼稚細胞分析通道的儀器,仍然不能根本解決血液細胞形態學的問題,仍然不能完全以儀器分類結果徹底取代人工分類。檢驗人員在熟練掌握儀器的性能的前提下,仍需要掌握扎實的的顯微鏡下對血細胞形態學認知的基本功。