洋蔥中黃酮類化合物的提取與測定

胡震，于海蓮

（四川理工學院材料與化學工程學院，四川自貢643000）

洋蔥中黃酮類化合物的提取與測定

胡震，于海蓮*

（四川理工學院材料與化學工程學院，四川自貢643000）

采用乙醇提取洋蔥中的黃酮類化合物，用紫外-可見分光光度法測定提取的黃酮類化合物的質量?？疾煲掖紳舛取⒘弦罕?、提取時間、提取溫度對黃酮類化合物提取量的影響。結果表明，測定波長為504 nm，蘆丁檢測濃度在0.080 mg/mL~0.400 mg/mL范圍內與吸收度線性關系良好（R2＝0.9974）；用乙醇提取洋蔥中黃酮類化合物的工藝條件為乙醇濃度60%，料液比1∶18（g/mL），提取時間2.5 h，提取溫度77℃。在此工藝條件下，從6.00 g洋蔥中提取黃酮類化合物的量為25.40 mg。

洋蔥；黃酮；提取；測定；提取量

Abstract:Flavonoids were extracted by ethanol from onion,which was determined by UV-Vis spectrophotometry.The effect factors such as the concentration of ethanol,mass rate of onion to ethanol,extraction time,extraction temperature were investigated.The results showed that the optimum condition was thatthedeterminationwavelengthwas504nm.Goodlinearrelationshipwith the absorption was achieved when the detection concentration of rutin was within a range of 0.080 mg/mL-0.400 mg/mL(R2=0.9974).The concentration of ethanol was 60%,solid-liquid ratio was 1∶18(g/mL),extraction n time was 2.5 hours,and extraction temperature was 77℃.Under the optimum extraction conditions,25.40 mg flavonoids were extracted from 6.00 g onion.

Key words：onion;flavonoids;extraction;determination;extraction yield

洋蔥是百合科蔥，屬草本植物，以其豐富的營養價值，被譽為“蔬菜皇后”[1]。黃酮類化合物是洋蔥中重要的一類活性物質，其生理活性作用較為廣泛，具有抗癌、鎮痛、提高免疫能力等藥用保健功能[2-3]，還有降壓、降血脂、舒張血管降血壓、增強冠狀動脈血流量、降低血液黏度預防心肌梗塞、抑制腫瘤、強心和抗心律不齊等藥理作用[4]。近年來，洋蔥的保健功能引起了食品、營養、添加劑、農業和保健品行業的廣泛關注。目前，國內外洋蔥中黃酮類化合物的提取方法主要有水提法、超聲波法、微波提取法、超臨界提取法等[5-6]，其中水提法的提取率低，而且操作時間較長，另外超聲波法、微波提取法和超臨界提取法這3種方法雖然提取率高，提取時間短，但是由于操作條件比較苛刻，很難工業化，因此在工業化方面受到很大的局限性。本研究采用醇提取法[7]，該方法操作容易，而且也易于工業化。不僅能夠提取出較多的黃酮類化合物，也為洋蔥進行深加工，如加工飲品、酒等節省資金，為降低成本提供方法和數據。

1 材料與方法

1.1 試劑與儀器

1.1.1 試劑

無水乙醇、氫氧化鈉、硼酸、三氯化鋁、亞硝酸鈉、硝酸鋁，均為分析純。

1.1.2 儀器

HH-2型數顯恒溫水浴鍋：金壇市富華儀器有限公司；PHG-9075A電熱鼓風干燥箱：上海羽良電子科技有限公司；UV-1100型紫外-可見分光光度計：上海美譜達儀器有限公司；SHB-Ш循環水式多用真空泵：鄭州長城科工貿有限公司。

1.2 方法

1.2.1 洋蔥樣品的處理和提取

將洋蔥去皮、洗凈、切去多余的須，將其粉碎，把粉碎好的洋蔥粒放入90℃的電熱鼓風干燥箱中干燥，得到洋蔥粉末。取洋蔥末6.00 g于500 mL的三口燒瓶中，向其中加入一定濃度的的乙醇溶液和幾粒沸石，接上球形冷凝管，放入恒溫水浴鍋中加熱提取。提取完后將提取液進行減壓過濾，將減壓過濾得到的濾液加熱濃縮到10 mL左右，冷卻后將其用乙醇稀釋定容，得到黃酮類化合物溶液。

1.2.2 黃酮類化合物的分析

本實驗采取硝酸鋁法[8]，先用亞硝酸鈉溶液將黃酮類化合物還原，再加硝酸鋁溶液絡合，最后加氫氧化鈉溶液使黃酮類化合物開環，生成2-羥基查耳酮而顯色，并在最大吸收波長下測量其黃酮類化合物的含量。

1.2.3 測定波長的選擇和標準曲線的繪制

蘆丁標準溶液的吸收曲線在440 nm~560 nm之間只有一個波峰，最大吸光度在504 nm處，因此選擇504 nm為測定波長。

1.2.4 標準曲線的繪制

蘆丁溶液的標準曲線如圖1所示。

由圖1可知，當蘆丁溶液濃度在0.080 mg/mL~0.400 mg/mL之間時，吸光度和溶液濃度呈線性關系，其線性回歸方程為y=2.4675x+0.0126，R2=0.9974。

2 結果與討論

2.1 乙醇濃度對黃酮類化合物提取量的影響

稱取6.00g洋蔥粉末，料液比為1∶10，溫度為70℃，提取時間為2.0 h?？疾煲掖紳舛葘S酮提取量的影響，結果如圖2所示。

由圖2可知，黃酮類化合物的提取量隨乙醇濃度的增大而增大，但是當濃度增大到60%時，提取量就開始下降。其原因是起始時乙醇濃度增大，洋蔥中黃酮類化合物不斷地被提取出，而當濃度增加到60%時，洋蔥里其他更易溶于60%乙醇溶液的雜質開始溶解，溶液顏色變淺，雜質又不與顯色劑顯色，而乙醇的量是一定的，部分用于溶解其它雜質而不能繼續萃取出黃酮類化合物，造成了黃酮類化合物的提取量減小。因此選擇乙醇濃度為60%為宜。

2.2 料液比（洋蔥的質量與乙醇的體積比即g/mL）對黃酮類化合物提取量的影響

稱取洋蔥粉末6.00 g，按乙醇濃度為60%、溫度為70℃、提取時間為2.0 h。考察料液比對黃酮類化合物提取量的影響，結果如圖3所示。

由圖3 可知，當料液比從1∶6（g/mL）增大到 1∶18（g/mL）時，黃酮類化合物的提取量呈直線性增大，主要是因為較多的乙醇能夠有效地萃取洋蔥的黃酮類化合物。但當料液比達到1∶18（g/mL）以后，黃酮提取量幾乎不再增大，是由于黃酮類化合物基本被提取出，導致提取結果增加不明顯。因此選擇料液比為1∶18（g/mL）為宜。

2.3 提取時間對黃酮類化合物提取量的影響

稱取洋蔥粉末6.00g，按乙醇濃度60%、溫度70℃、料液比為1∶18（g/mL）。考察提取時間對黃酮類化合物提取量的影響，結果如圖4所示。

由圖4可知，當提取時間從1.0 h開始增大時，黃酮類化合物的提取量也逐漸增加，當提取時間達到2.5 h時黃酮類物質的提取量達到最大值，繼續增大提取時間，提取量反而開始下降。其原因是乙醇擴散至洋蔥內部，萃取出黃酮類化合物也需要一定時間才能擴散出來，導致其提取量較小。而隨著提取時間的增加，黃酮類物質不斷的被提取出，但經過較長提取時間時，由于洋蔥長時間浸泡在較高溫度的乙醇溶液當中，可能會造成局部的高溫，而使黃酮類物質分解，造成黃酮類化合物提取量的降低。因此選擇提取時間為2.5 h為宜。

2.4 溫度對黃酮類化合物提取量的影響

稱取洋蔥粉末6.00 g，按乙醇濃度為60%、料液比為1∶18（g/mL）、提取時間為2.5 h。考察溫度對黃酮類化合物提取量的影響，結果如圖5所示?？芍?，隨著提取溫度不斷地升高，黃酮類化合物的提取量基本按直線趨勢增大，其原因是溫度升高，加速了分子的熱運動，從而加快了黃酮類物質在相界面間的傳遞，同時溫度升高也有利于黃酮類物質溶解的進行。然而，乙醇的沸點約為78.4℃，因此提取溫度不能超過78.4℃，因此選擇提取溫度為77℃為宜。

3 結論

通過考察各個因素對黃酮類化合物的提取量的影響，得到最佳的提取條件：乙醇濃度60%、料液比為1∶18（g/mL）、提取時間為 2.5 h、提取溫度為 77 ℃。在該條件下，6.00 g洋蔥中黃酮類化合物的提取量25.40 mg。

[1]鄭建仙.功能性食品[M].北京:中國輕工業出版社,1995:434

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Study on Extraction and Analysis of Flavonoids from Onion

HU Zhen,YU Hai-lian*
(College of Material and Chemical Engineering，Sichuan University of Science&Engineering,Zigong 643000,Sichuan,China)

2011-11-28

胡震（1980—），男（漢），講師，碩士，主要從事功能材料和天然有效物提取研究。

*通信作者