嬰幼兒喘息性疾病轉歸和誘導痰細胞組份EC、IL-5、ECP水平相關性的臨床研究

彭福梅 胡新菊 白羽

哮喘的發病與環境及遺傳因素有關，但其發病率在發展中國家的顯著上升顯然不能單以遺傳因素來解釋，環境因素發揮重要的影響作用。呼吸道病毒感染、過敏原暴露、環境污染以及被動吸煙等均是哮喘發生的危險因素。嬰幼兒期反復呼吸道感染，尤其是毛細支氣管炎對嬰幼兒哮喘發病及遷延至兒童時期均有很大影響。毛細支氣管炎是嬰幼兒時期，尤其6個月以下嬰兒常見的下呼吸道感染性疾病，也是兒童時期發生哮喘的危險因素。本研究通過對毛細支氣管炎患兒痰EC、IL-5、ECP檢測，預測嬰幼兒喘息性疾病的轉歸。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇我院2008～2010年收治的1個月至3歲的毛細支氣管炎(毛支)、喘息性肺炎(喘肺)112例，分為二組，其中第一次發作毛支、喘肺組84例，年齡(7.2±5.1)個月(1～24個月)，男49例，女35例，發作≥2次組28例，年齡(16.1±7.9)個月(3～36個月)，男17例，女11例，支氣管肺炎(無喘息癥狀)28例為第三組，年齡(14.6±11.2)個月(1～36個月)，男41例，女31例。

1.2 方法

1.2.1 誘導痰的采集及制備 讓患者吸入沙丁胺醇400μg，10 min后用超聲霧化器對受檢者進行不同梯度高滲鹽水霧化，共計30 min。鹽水濃度從3%增加到4%、5%。霧化10 min后，每5 min囑患者清潔口腔和咽部，然后用力深咳，將咳出的痰液收集于容器中。

1.2.2 實驗方法 如痰樣鏡檢中見鱗狀上皮細胞占有核細胞比例＜20%，則認為樣本是合格的。加等量生理鹽水于合格痰樣中，漩渦振蕩5 min，4℃以3000 r/min速度離心10 min，留取上清液于-30℃凍存待測。①EC、ECP的檢測:藥盒購于瑞典法瑪西亞公司，采用CAP系統以熒光免疫法測定。②IL-5的檢測:采用酶聯免疫法測定(深圳Jingmei Boitech公司試劑盒)。

1.2.3 統計學方法 所有數值以均數±標準差表示，組間比較采用方差分析，以P＜0.05為差異有顯著性，應用SPSS 10.0統計軟件進行t檢驗及相關性統計學分析。

2 結果

哮喘組誘導痰細胞組份EC、IL-5、ECP水平與毛支組和對照組之間比較，具有非常顯著性差異(P均＜0.001)，結果見表1。由表1可見，喘肺患者誘導痰中EC IL-5和ECP濃度分別明顯高于毛支組，肺炎組濃度，差異具有顯著性(P＜0.001)。毛支組，肺炎組誘導痰中EC IL-5和ECP濃度無差異性(P＞0.05)。

表1 各組誘導痰夜EC、IL-5、ECP水平(±s)

表1 各組誘導痰夜EC、IL-5、ECP水平(±s)

注:△表示哮喘組與毛支組比較有顯著性差異(P＜0.001);▲表示哮喘組與肺炎組比較有顯著性差異(P＜0.001)

組別 例數 EC(%) IL-5(ng/L) ECP(μg/L)喘肺組 28 37.76±16.58△▲ 98.23±7.83△▲ 358.0±176.8△▲＜0.001 ＜0.001 ＜0.001毛支組 84 18.45±5.98 43.1±25.32 58.6±37.5肺炎組 28 16.54±9.23 36.27±19.46 46.7±22.7 t值 △9.11 ▲9.07 △11.56 ▲15.61 △4.28 ▲9.24 P

3 討論

在嬰幼兒期，發作性的喘息和咳嗽是常見的臨床癥狀，但并非所有的嬰幼兒喘息都是哮喘。隨著對支氣管哮喘發病機制研究的深入，現已證實，哮喘發病時活化的嗜酸性粒細胞脫顆粒后可釋放多種生物活性蛋白，其中以ECP最為重要，被認為是反映嗜酸性粒細胞活化的特異性標志。ECP具有很強的細胞毒性，可引起支氣管上皮細胞損傷、脫落，從而改變黏膜的通透性，并使感覺神經纖維暴露，導致氣道高反應性。T淋巴細胞激活后釋放的IL-5不僅可作用于嗜酸性粒細胞前體促進其增殖和分化，并向氣道趨化和粘附，還可刺激嗜酸性粒細胞釋放白三烯(LT)、血小板激活因子(PAF)和ECP等炎性介質，IL-5在哮喘發病中起關鍵作用。嬰幼兒時期的免疫系統和呼吸道發育均不成熟，容易罹患呼吸道病毒感染。嬰幼兒時期病毒感染與哮喘的發生密切相關，病毒可以直接導致哮喘或作為觸發因素導致哮喘的發生。毛支炎是嬰幼兒時期，尤其6個月以下嬰兒常見的下呼吸道感染性疾病，也是兒童時期發生哮喘的危險因素。嬰幼兒期哮喘較年長兒哮喘的診斷難度明顯增加，且缺乏有效的客觀指標來預測其轉歸。為提高嬰幼兒期哮喘早期診斷，早期干預，本課題通過對毛支組，哮喘組，支氣管肺炎組誘導痰做EC、IL-5、ECP檢測，結果顯示，哮喘組誘導痰液中EC、IL-5、ECP明顯高于毛支組及對照組。因此，若患兒誘導痰液中EC、IL-5、ECP明顯升高，可能發展為哮喘，是早期干預的對象，并結合家族史與特應質史，對患兒做出早期診斷，及時地按照GiNA方案進行治療，避免可能發生的氣道重塑及不可逆的肺功能損害，也可避免診斷過度。

通過本研究的結果分析，我們認為EC、ECP和IL-5在嬰幼兒喘息性疾病中起著十分重要的作用，為有哮喘發展傾向的患兒提供了一個早期診斷、早期干預的依據。誘導痰檢查作為一種無創性的檢查方法較其他有創性方法具有更多的優點，在臨床上推廣應用具有較大的價值。