大球蓋菇菌絲生長適宜氮源研究*

黃春燕，萬魯長，張柏松，張海蘭，郭惠東，宮志遠

（山東省農業科學院農業資源與環境研究所，山東 濟南 250100）

大球蓋菇Stropharia rugoso-annulata又名皺環球蓋菇，是一種色澤艷麗、清香脆甜、肉質嫩滑的優質珍稀食用菌，含有豐富的蛋白質、維生素、礦物質和多糖。上世紀60年代，德國最早進行人工馴化栽培，現在波蘭、美國及荷蘭也進行了人工栽培。上世紀90年代，我國開始引種栽培[1]，它是目前國內具有良好發展前景的珍稀食用菌之一。近幾年國內也有許多學者對大球蓋菇的特性、制種及栽培技術等進行了研究，但各研究者報道的適宜大球蓋菇菌絲生長的氮源種類差別較大，甚至互相矛盾[2，3，5]。為了掌握大球蓋菇菌絲生長特性，更好地開發這一資源，筆者對大球蓋菇菌絲生長適宜的氮源進行了研究，以期為大球蓋菇的高產栽培提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

大球蓋菇DQ-12（本所篩選）。

1.2 供試培養基

活化培養基：馬鈴薯200 g、葡萄糖20 g、蛋白胨1 g、磷酸二氫鉀1.5 g、MgSO4·7H2O 0.5 g、復合維生素B1片10 mg、瓊脂粉20 g，水1 000 mL。

基礎培養基：葡萄糖20g、磷酸二氫鉀1.5g、MgSO4·7H2O 0.5 g、復合維生素B1片10 mg、瓊脂粉20 g，水1 000 mL。

1.3 試驗處理

將上述基礎培養基分別添加酵母浸粉、蛋白胨、硫酸銨、硝酸銨、尿素和硝酸鉀為氮源，根據各氮源的不同含氮量，分別設5個濃度梯度；以不加氮源為空白對照，共31個處理，每一處理重復3次，每一重復做5個培養皿。常規方法制作培養基，用試管定量分裝25 mL，滅菌后傾倒于直徑90 mm的培養皿中，制成培養基平板，供實驗用。

1.4 接種培養

取供試保藏菌種，挑取一小塊于活化培養基斜面上，適溫下培養，待長滿管時，轉接至相同的平板培養基上，置于適宜的溫度下培養，當菌落直徑長至6 cm～7 cm時，在菌落邊緣打取直徑為5 mm的菌圓片，接種于各處理培養基平板上，置25℃恒溫培養箱培養。

1.5 數據測定與統計

各處理于恒溫培養箱培養12 d后，測量菌落半徑，計算菌絲日均生長速度并觀察菌絲長勢。

2 結果與分析

2.1 不同濃度酵母浸粉對大球蓋菇菌絲生長的影響

不同濃度酵母浸粉對大球蓋菇菌絲生長的影響，結果見表1。

表1 不同濃度酵母浸粉對大球蓋菇菌絲生長的影響

由表1可以看出，添加不同濃度的酵母浸粉對大球蓋菇菌絲生長影響較大，添加酵母浸粉后，菌絲擴張速度變慢，但菌絲分支增多，當酵母浸粉濃度為0.13%時，菌絲致密，長勢較強，但菌絲擴張速度與對照相比差異不顯著。當酵母浸粉濃度為0.26%時，菌絲致密，長勢較強，菌絲擴張速度與對照相比差異極顯著。當酵母浸粉濃度大于0.39%時，不但菌絲擴張速度與對照相比差異極顯著，菌絲長勢也變弱。

2.2 不同濃度蛋白胨對大球蓋菇菌絲生長的影響

不同濃度蛋白胨對大球蓋菇菌絲生長的影響見表2。

表2 不同濃度蛋白胨對大球蓋菇菌絲生長的影響

由表2可以看出，隨蛋白胨濃度的增加，菌絲生長速度逐漸變慢，但與無氮對照相比菌絲生長速度無顯著性差異，而加入蛋白胨可促進菌絲分支，長勢增強。

2.3 不同濃度硫酸銨對大球蓋菇菌絲生長的影響

不同濃度硫酸銨對大球蓋菇菌絲生長的影響見表3。

表3 不同濃度硫酸銨對大球蓋菇菌絲生長的影響

由表3可以看出，加入硫酸銨可極顯著的影響大球蓋菇菌絲的生長，使生長速度變慢，長勢亦比較微弱。

2.4 不同濃度硝酸銨對大球蓋菇菌絲生長的影響

不同濃度硝酸銨對大球蓋菇菌絲生長的影響見表4。

表4 不同濃度硝酸銨對大球蓋菇菌絲生長的影響

由表4可以看出，微量硝酸銨可以促進大球蓋菇菌絲生長，當濃度大于0.06%時即可抑制菌絲生長。

2.5 不同濃度尿素對大球蓋菇菌絲生長的影響

不同濃度尿素對大球蓋菇菌絲生長的影響見表5。

表5 不同濃度尿素對大球蓋菇菌絲生長的影響

由表5可以看出，微量尿素可以促進大球蓋菇菌絲生長，但隨濃度增大，菌絲生長速度變慢，當濃度大于0.13%時，長勢也變弱。

2.6 不同濃度硝酸鉀對大球蓋菇菌絲生長的影響

不同濃度硝酸鉀對大球蓋菇菌絲生長的影響見表6。

由表6可以看出，添加不同濃度的硝酸鉀可顯著影響大球蓋菇菌絲生長，使菌絲生長速度變慢，長勢也比較弱。

3 結論與討論

氮源是大球蓋菇菌絲生長的主要營養源之一。據劉勝貴等[2]報道，大球蓋菇營養生長所需最適氮源以硫酸銨為最好，其余依次為蛋白胨、硝酸銨、尿素，在酵母膏為氮源的培養基中不生長；顏淑婉[4]研究認為最適氮源為酵母浸膏；而張世敏等[5]報道認為最佳氮源為尿素，其次為蛋白胨和酵母膏。閆培生等[3]研究認為，最適有機氮源是豆粉，其次是酵母膏，牛肉膏和蛋白胨不宜做氮源，無機氮中以NH4NO3最佳。

表6 不同濃度硝酸鉀對大球蓋菇菌絲生長的影響

而本研究表明大球蓋菇菌絲生長最適宜氮源是尿素，其適宜濃度是0.026%；蛋白胨次之，其適宜濃度是0.1%；硫酸銨最差。大球蓋菇菌絲生長對氮源濃度極敏感，在無氮源的情況下，大球蓋菇菌絲能快速生長，但長勢極微弱。低濃度氮源可促進菌絲分支，長勢強，高濃度氮則顯著抑制菌絲生長；有機氮源優于無機氮源。

文獻報道中對最佳氮源的研究結果之所以差異巨大，可能與研究者所采用的研究方法有關，劉勝貴、張世敏、顏淑婉、閆培生等的研究均只測定了供試氮源的一個濃度，未做梯度試驗，通常情況下，如果研究對象對氮源濃度不敏感，采用常用濃度篩選最佳氮源對結果影響不大，但如果研究對象對氮源濃度非常敏感，不做梯度試驗可能會導致試驗結果差異較大。

[1]黃年來.大球蓋菇的分類地位和特征特性[J].食用菌，1995，17(6)：11.

[2]劉勝貴，呂金海.大球蓋菇生物學特性的研究[J].農業與技術，1999，19(2)：19-22.

[3]閆培生，李桂舫，蔣家慧，等.大球蓋菇菌絲生長的營養需求及環境條件[J].食用菌學報，2001，8(1)：5-9.

[4]顏淑婉.大球蓋菇的生物學特性[J].福建農林大學學報：自然科學版，2002，31(3)：401-403.

[5]張世敏，和晶亮，邱立友，等.不同碳氮營養源和培養溫度對大球蓋菇菌絲生長的影響[J].微生物學雜志，2005，25(6)：32-34.