袁學軍,陳永敢,陳光宙,陳忠蔭,李艷麗
(瓊州學院生物科學與技術學,海南 三亞 572000)
靈芝的生物活性成分十分豐富,豐富的生物活性成分決定了它功能的多樣性[1]。據有關研究表明,目前已分離到靈芝的150余種活性成分,有多糖類、核苷類、生物堿類、氨基酸、蛋白質類、三萜類和礦質元素等[2],具有抗腫瘤、保肝解毒、預防心血管系統疾病、抗過敏、抗衰老、抗神經衰弱、治療高血壓、慢性支氣管炎、支氣管哮喘等作用[3]。除醫學外,靈芝在食品、飲品以及保健品產業都占有一定的市場與地位,具有較高的觀賞價值及經濟價值[4]。
靈芝既不同于一般藥物對某種疾病起治療作用,亦不同于一般營養保健食品只對某一方面營養素的不足進行補充和強化,它的獨特之處主要在于它是在整體上雙向調節人體機能平衡、調動機體內部活力、調節人體新陳代謝、提高自身免疫能力,促使全部的內臟或器官機能正?;?,從而從根本上達到治病強身保健的目的[3]。目前,國內外學者已經對藥用靈芝中活性成分進行不同的研究:靈芝活性蛋白[5-8]、靈芝多糖[9-11]、靈芝三萜[12-14]和靈芝酸[15-17]等。到目前為止,還沒有關于不同光照和栽培基質對靈芝活性成分的影響。
1.1.1 材料
靈芝采收后及時將污物清理干凈,在60℃的條件下在干燥箱內干燥24 h,然后用20目的粉碎機粉碎,最后用帶拉鏈的塑料帶密封備用。
1.1.2 藥品
葡萄糖由廣州化學試劑廠提供;熊果酸和香草醛由上海晶純試劑有限公司提供;牛白蛋白和考馬斯亮藍G250由國藥集團化學試劑有限公司提供;活性炭、蒽酮、三氯甲烷、磷酸、冰乙酸、氯化鈉、硫酸銨、碳酸氫鈉、鹽酸、氫氧化鈉、無水乙醇、硫酸和高氯酸均為分析純。
栽培料用直徑15 cm、長20 cm印度紫檀的木段,發菌結束后進行3種不同的光照處理。全陽:棚不加遮陽網;半蔭:棚加1層遮陽網;全蔭:棚加2層遮陽網,其他條件均相同。發菌結束后進行4種不同的基質栽培:椰糠、沙土、沙土+紅土、壤土,其他條件均相同。
靈芝多糖的測定參考蒽酮-硫酸法[18],用葡萄糖做的標準曲線為:y=0.7622x+0.0122,R2=0.998。
靈芝蛋白的測定參考考馬斯亮藍 G-250法[18],用牛血清白蛋白做的標準曲線為:y=0.6643x+0.0009,R2=0.999。
靈芝三萜的測定參考直接光度法測定法[19],用熊果酸做的標準曲線為:y=0.4144x-0.01,R2=0.9934。
用南京農業大學王韶華教授發明的stst軟件進行統計分析。
不同光照對靈芝活性成分的影響見表1。

表1 不同光照對靈芝活性成分的影響
結果顯示,多糖的含量3個處理之間差異極顯著,其中半蔭處理多糖含量最高,全陽處理多糖含量最低。因此,光照中等有利于多糖的合成;蛋白的含量3個處理之間差異極顯著,其中全陽處理蛋白含量最高,全蔭處理蛋白含量最低,強光照有利于蛋白的合成;三萜的含量3個處理之間差異極顯著,其中半蔭處理三萜的含量最高,全陽處理三萜的含量最低,光照中等有利于三萜的合成。
不同栽培基質對靈芝活性成分的影響見表2。
結果顯示,多糖的含量4個處理之間差異極顯著,其中椰糠處理多糖含量最高,可能是由于椰糠中主要是木質素、纖維素、半纖維素等,分解后產生糖,靈芝菌絲吸收糖后有利于靈芝本身糖的合成,沙土處理多糖含量最低,多糖含量又高到低的順序為椰糠、沙土+紅土、壤土、沙土;蛋白的含量4個處理之間差異也極顯著,其中椰糠處理蛋白的含量最高,其它由高到低順序依次是沙土+紅土、壤土、沙土;三萜的含量4個處理之間差異極顯著,其中沙土處理三萜的含量最高,其它由高到低順序依次是沙土+紅土、椰糠、壤土。多糖和蛋白的含量,4種處理排序相同,但三萜的含量與此排序基本相反。
靈芝多糖、蛋白、三萜類化合物是靈芝中的主要活性物質,也是衡量靈芝質量的重要指標[20]。不同的光照對靈芝活性成分影響的研究,到目前為止還沒有文獻報道,無法與其他類似的試驗數據比較。本實驗研究的結果表明,中等光照有利于多糖和三萜的合成,光照較強有利于蛋白的合成。本試驗不同栽培基質對靈芝活性成分影響的研究表明,椰糠有利于多糖和蛋白的合成,可能是椰糠中有機物豐富的緣故,但沙土有利于三萜的合成。因此,活性成分的含量受基質的影響較大,同一基質對不同活性成分的影響也不完全相同,有的甚至相反。本研究為提高目的活性成分含量的栽培技術提供技術支持。
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