家兔低血壓狀態下靜脈注射多巴胺致TNF－a、IL－6的表達及局部病理改變的研究

陶明 肖祖碧 孫全林 左娟 田林 王菁 李溁戎 楊忠嫻

（1.遵義醫學院附屬醫院心內科，貴州 遵義563003；2.遵義醫學院機能實驗室）

多巴胺在臨床應用極為廣泛，靜脈注射多巴胺引起的組織損傷與防治受到高度關注。有動物實驗證明幼兔安全使用多巴胺時間為4h［1］，較多臨床報道也認為持續使用多巴胺的病人更換注射部位的安全時間為2～4h或更長［1－4］。然而有部分病人使用多巴胺后約30min開始出現沿血管走向皮膚發白現象［2］，以低血壓病人居多。目前尚未見有關低血壓狀態與正常血壓狀態下靜脈注射多巴胺致組織損傷的發生時間及反應程度是否存在差異的研究報道。為此，本實驗將低血壓與正常血壓家兔在使用多巴胺后不同時間做血清炎性因子測定與局部組織病理學觀察，探討低血壓狀態下靜脈注射多巴胺機體炎癥反應發生的時間、損傷程度，為臨床安全使用多巴胺提供實驗依據。

1 材料與方法

1.1 實驗動物與分組 由遵義醫學院動物實驗中心提供的健康成年家兔72只，體重2.3～3.3kg。隨機分為A、B、C三組。A組：直接靜脈輸入生理鹽水；B組：靜脈輸入20mg多巴胺加100ml生理鹽水；C組：低血壓狀態下靜脈輸入20mg多巴胺加100ml生理鹽水。

1.2 實驗主要藥物 多巴胺由江蘇亞邦強生藥業有限公司出產，規格20mg／支（2ml）。

1.3 實驗方法 按照4ml／kg體重經耳緣靜脈注射25%烏拉坦全麻后固定，于對側耳緣靜脈另建實驗用藥通道。C組行頸總動脈插管，連接多導生理監護儀后采用放血法制作低血壓休克模型：15min內放血至平均動脈壓（40±5）mmHg。實驗中如動物死亡或液體滲漏均被剔除。

1.4 標本采集與保存

1.4.1 血液標本 每組分別于用藥后四個時間段即0.5h、1h、2h、4h采集動脈血2ml，血液凝固后放入4 000轉速離心機中離心10min，取上清液置－80℃冰箱保存。

1.4.2 組織標本 在各時間段采集完血液標本后，立即以靜脈穿刺點為中心采集長0.25cm、寬0.25cm含注射血管的組織于4%甲醛液溶液中固定。

1.5 測量儀器及觀察指標 采用中科大中佳公司提供的GC－2010γ計數器、北京普爾偉業生物科技有限公司提供的試劑盒進行血清炎性因子（TNF－a、IL－6）放射免疫測定。血管及周圍組織經HE染色后作光鏡病理學觀察炎癥反應情況，把血管擴張充血、慢性炎細胞浸潤、嗜酸性粒細胞浸潤、可疑血栓形成、組織疏松水腫、灶狀出血作為病理學觀察指標。

2 結果

2.1 不同時間三組TNA－F、IL－6的比較（表1）

表1 不同時間三組血清炎性因子的表達（±s，ng／ml）

表1 不同時間三組血清炎性因子的表達（±s，ng／ml）

注：＊與A組有差異，P＜0.05；＃與B組有差異，P＜0.05；▲與0.5h有差異，P＜0.05；△與1h有差異，P＜0.05；◆與2h有差異，P＜0.05

組別 0.5h TNF－a IL－6 1h TNF－a IL－6 2h TNF－a IL－6 4h TNF－a IL－6 A組 15.51±2.12 0.027±0.009 16.48±3.07 0.030±0.004 15.67±2.75 0.026±0.00916.16±2.59 0.027±0.009 B組 16.25±4.50 0.030±0.004 15.62±1.80 0.035±0.004 16.25±2.85 0.045±0.005▲△ 30.82±1.76＊▲△ 0.049±0.004＊C組 14.82±1.46 0.032±0.006 15.84±2.59 0.037±0.006 36.21±6.02＊▲△ 0.048±0.019＊＃▲△ 43.781±3.41＊＃▲△◆ 0.055±0.004＊▲△◆

2.2 不同時間三組局部組織及血管病理學陽性率比較（表2）

表2 不同時間三組局部組織及血管病理學陽性率比較n（%）

3 討論

TNF－a、IL－6是介導炎癥反應最重要的細胞因子［3］，根據其濃度變化可以幫助判斷炎癥反應發生、發展過程及反應程度。本實驗結果組間比較提示，在0.5h、1h時間段機體未通過 TNF－a、IL－6表達多巴胺誘發的炎癥反應；于2h開始C組TNF－a濃度明顯高于A、B兩組，至4h呈顯著上升趨勢（P＜0.05）。組內比較顯示，B組于4h炎性因子濃度明顯高于其他時間段（P＜0.001），C組各時間段比較均有差異（P＜0.05），提示正常血壓組于4h出現炎癥反應，低血壓組于2h出現。三組病理學觀察示總體有差異性（P＜0.001），其中C組總陽性率及相同時間內陽性率均高于B組（P＜0.05），B組總陽性率及相同時間內陽性率均高于A組（P＜0.05）。以上結果表明，向正常血壓與低血壓狀態的家兔靜脈注射多巴胺都可以使機體產生炎癥反應，但低血壓組時間早、程度重。

低血壓組與正常血壓組比較存在炎癥反應差異可能與以下因素有關：首先是低血壓狀態下組織缺氧，當多巴胺興奮血管的α受體后產生的縮血管作用加重了局部缺血缺氧而誘發炎癥反應；其次是低血壓狀態下血流相對緩慢，藥液在局部不斷積聚、濃度升高，致血管內壓力升高，部分血漿成分滲出血管壁，這些成分中有較大濃度的多巴胺興奮毛細血管α受體，使血管收縮，加重血管壁及周圍組織缺血；再次是多巴胺本身對血管具有刺激性，在組織本身缺氧狀態下可誘發機體產生炎癥反應，炎癥又可以使血管壁通透性增加［3］，從而加重多巴胺從血管內滲出而引起周圍組織損傷。

本實驗結果及較多臨床報道提示，在肉眼可見的異常情況出現前，多巴胺對血管及周圍組織的炎癥刺激就持續存在，且隨著時間有延長損傷程度加重。結合國外文獻報道［4］高劑量與低劑量多巴胺都會引起組織損傷，護士應高度重視無滲漏情況下由多巴胺引起的組織損傷。一旦使用多巴胺就要高度重視炎癥損傷的早期預防，尤以低血壓狀態下損傷發生更早。本實驗中50%的動物于用藥30min時發生病理改變陽性反應。因此，提示護士為低血壓病人使用多巴胺應從開始用藥就同步干預，用藥過程中密切觀察，避免藥物損傷給病人帶來痛苦以及發生醫患糾紛。

本實驗因研究時間較短、樣本例數較少等原因，未完整地測定炎癥因子表達及組織病理學改變的動態變化；未能復制出臨床上常見的肉眼可見的異常改變；需在以后的研究中繼續探索，同時尋求更好防治損傷的方法。

［1］ 夏淳和，陳麗萍，許敬，等.多巴胺、多巴酚丁胺靜脈注射對幼兔外周靜脈及周圍組織的影響［J］.中華護理雜志，2001，36（11）：805－807.

［2］ 陶明，肖祖碧，鄧宗琴，等.輸注多巴胺后出現局部皮膚顏色改變的觀察及處理［J］.遵義醫學院學報，2009，32（6）：614－616.

［3］ 李玉林.病理學［M］.北京：人民衛生出版社，2010：60.

［4］ Chen－JL，O＇Shea－M.Extravasation injury associated with lowdose dopamine［J］.The annals of pharmacotherapy.1998，32（5）：545－548.