尿肺炎鏈球菌抗原檢測兒童肺炎鏈球菌性肺炎的研究

王 青 李文杰

1 山東省青島市市立醫(yī)院檢驗(yàn)科 266011； 2 青島婦女兒童醫(yī)院新篩室

肺炎鏈球菌是社區(qū)獲得性肺炎的主因，并且可能是不明原因社區(qū)獲得性肺炎的重要致病原［1，2］。肺炎球菌性肺炎的病死率高達(dá)30%，這取決于菌血癥、年齡和潛在性疾?。?］，常見于5歲以下兒童。由于做血培養(yǎng)時(shí)肺炎鏈球菌是苛養(yǎng)菌，營養(yǎng)要求高，所需時(shí)間長，陽性率低。但肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）是一種薄膜免疫層析試驗(yàn)，用于檢測人類尿液中肺炎球菌的可溶性抗原，為肺炎鏈球菌性肺炎提供了一種簡便快速的診斷方法，旨在探討它對血培養(yǎng)陽性的肺炎鏈球菌的診斷價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 研究對象 2011年5月－2012年5月我院兒科5歲以下呼吸道感染的276例患兒中，男152例，女124例。

1.2 標(biāo)本采集與處理 將所有患兒尿液分別收集在標(biāo)準(zhǔn)容器中。收集后，24h內(nèi)測定，室溫保存（15～30℃）。此外，將尿液在2～8℃保存或冷凍保存，可存放14d。硼酸可用作防腐劑。對所有患兒分別靜脈采血2～5ml置于血培養(yǎng)瓶中，然后放入自動(dòng)血液培養(yǎng)儀內(nèi)，按照儀器要求進(jìn)行培養(yǎng)鑒定。

1.3 儀器與試劑 尿肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法），試劑由Binax NOW公司（英維利斯醫(yī)療器械北京有限公司），BD血培養(yǎng)瓶，全自動(dòng)血液培養(yǎng)儀（美國BD公司）。

1.4 實(shí)驗(yàn)原理 肺炎鏈球菌抗原檢測試劑盒（膠體金法）是一種薄膜免疫層析試驗(yàn)，用于檢測人類尿液中肺炎球菌的可溶性抗原。兔抗肺炎鏈球菌抗體被吸附到硝酸纖維素膜上作為樣本線，對照抗體作為另一條線吸附到同一膜上。結(jié)合有可視粒子的兔抗肺炎鏈球菌抗體和抗種抗體干燥結(jié)合到惰性纖維支持物上，形成的結(jié)合物墊和帶條紋的膜結(jié)合到一起組成檢測條。檢測條和放拭子標(biāo)本的孔位于一個(gè)書形鉸鏈狀檢測卡的兩側(cè)。

1.5 檢測方法 將患兒尿液和液體對照品放至室溫（15～30℃），輕輕混勻。測試前從包裝袋中取出檢測卡平放。將1根Binax樣本拭子浸入尿液中，完全浸沒拭子頭。取出時(shí)拭子不能滴水，將拭子插入檢測卡底部的孔中。向底部的孔中加A試劑3滴，立即揭去黏附襯封閉檢測卡，15min后在窗口判斷結(jié)果。陽性結(jié)果（取決于標(biāo)本中存在的抗原濃度）在15min讀數(shù)時(shí)，會檢測出樣本線和對照線。陰性結(jié)果，15min讀數(shù)時(shí)只出現(xiàn)對照線，表示標(biāo)本中未檢測到肺炎鏈球菌抗原。如果對照線未出現(xiàn)，不管標(biāo)本線出現(xiàn)與否，都視為無效結(jié)果。

1.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS13.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，率的比較采用χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

尿肺炎鏈球菌抗原與血培養(yǎng)的檢測結(jié)果：尿肺炎鏈球菌抗原的陽性率為16.3%（45／276），血培養(yǎng)的陽性率9.4%（26／276），兩者有明顯差異（P＜0.05）。以血培養(yǎng)經(jīng)過分離鑒定實(shí)驗(yàn)作為診斷兒童肺炎鏈球菌性肺炎的臨床標(biāo)準(zhǔn)［3］，測得尿肺炎鏈球菌抗原的敏感性、特異性和準(zhǔn)確度分別為88.5%（23／26），91.2%（228／250）和90.9%［（23＋228）／276］。結(jié)果見表1。

表1 尿肺炎鏈球菌抗原與血培養(yǎng)的檢測結(jié)果

3 討論

肺炎鏈球菌性疾病（PDs）已成為全球一個(gè)重要的公共衛(wèi)生問題。肺炎鏈球菌始終是導(dǎo)致嬰幼兒腦膜炎、菌血癥、肺炎等嚴(yán)重疾病的首要病原菌，也是引起鼻竇炎和急性中耳炎的最常見原因［4］。根據(jù)WHO 2005年的估計(jì)，全球每年約有160萬人死于PDs，5歲以下兒童有70～100萬人，其中多數(shù)生活在發(fā)展中國家［5］，在亞太地區(qū)，每小時(shí)約有49名兒童死于肺炎球菌性肺炎［6］。肺炎鏈球菌為鏈球菌屬細(xì)菌，是一種常見的菌血癥的病原體，由于它可產(chǎn)生自溶酶及對營養(yǎng)的要求高，導(dǎo)致它的分離率不高［7］。通過全自動(dòng)血液培養(yǎng)儀來培養(yǎng)肺炎鏈球菌，雖然能提高檢測的陽性率，但它要經(jīng)過分離、培養(yǎng)、鑒定需要2～3d，很難及時(shí)滿足臨床的要求。膠體金法是以尿液為檢測對象，特異性、靈敏度較好［8］。對276例患兒檢測敏感性為88.5%，特異性為91.2%和準(zhǔn)確度分別為90.9%，說明此法的真實(shí)性良好，穩(wěn)定性較強(qiáng)。肺炎鏈球菌陽性組尿肺炎鏈球菌陽性率88.5%明顯高于陰性組8.8%，而且膠體金法測定尿肺炎鏈球菌抗原所用的檢測樣本為尿液，尿液的收集、儲存和運(yùn)輸都非常方便，試驗(yàn)簡便、靈敏、快速，15min出結(jié)果，大大節(jié)省時(shí)間，為臨床診斷兒童肺炎球菌性肺炎提供了一定的參考價(jià)值，同時(shí)爭取了更多寶貴的治療時(shí)間。

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［3］陸權(quán)，余宏杰，王輝.兒童肺炎鏈球菌性疾病防治技術(shù)指南（2009年版）〔J〕.中華兒科雜志，2010，48（2）：104－109.

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