開口箭醇提物抗慢性咽炎活性研究

鄔昊洋 周 園 李諾飛 賀海波 鄒 坤

（1.三峽大學天然產物研究與利用湖北省重點實驗室，湖北宜昌 443002；2.宜昌市婦幼保健院，湖北宜昌 443000；3.三峽大學 中醫臨床醫學院，湖北宜昌 443000）

慢性咽炎主要為咽黏膜慢性炎癥，其病變主要在咽部粘膜層，粘膜慢性充血，粘膜及粘膜下層結締組織增生，粘液腺肥大，粘液分泌增多，其主要臨床表現為咽部不適感，如干燥、發癢、灼熱，以及異物感等.慢性咽炎病變部位特殊，病因復雜，纏綿難愈，給患者的工作和生活帶來很大影響［1］.西醫大多采用抗生素類藥物治療或輔以地塞米松等激素類制劑，但療效不佳，易反復發作；中醫藥對慢性咽炎治療具有毒副作用小、作用緩和持久的特點.很多學者、醫家從中醫整體觀念出發，辨證論治，取得了比較好的療效［2］.開口箭（Tupistra chinensis Bak.）為百合科鈴蘭族開口箭屬植物，具有清熱解毒、祛風除濕、散瘀止痛的功效，主治咽喉腫痛，白喉，風濕痹痛，跌打損傷，胃痛，癰腫瘡毒，毒蛇、狂犬咬傷等［3］.開口箭在民間作為清咽利喉藥已有悠久歷史，在前期的臨床和實驗研究證實開口箭對急、慢性咽炎有較好的療效［3－4］.為進一步探討其作用機制，進行了開口箭醇提物對慢性咽炎大鼠血清IL－1β及TNF－α等指標影響的實驗研究.

1 材料與方法

1.1 動物

Wistar大鼠（SPF級）：48只，體重（200±20）g，由湖北省疾病控制中心實驗動物中心提供，合格證：SCXK（鄂）2008－0005.

1.2 藥品及試劑

開口箭醇提物：由天然產物研究與利用湖北省重點實驗室提供；西瓜霜含片：桂林三金制藥有限公司生產；氨水（濃度25%～27%）：洛陽市化學試劑廠；IL－1β和TNF－α：北京東亞免疫技術研究所.

1.3 方法

1）慢性咽炎動物模型的建立.實驗采用Wistar大鼠作為研究對象，用喉頭噴霧器將25%的氨水向其咽部噴霧，每日2次，上、下午各1次，每次噴3下（約0.5 mL），連噴40d.氨水是堿性刺激物質，高濃度局部噴霧能刺激咽部粘膜，使之充血腫脹，形成慢性炎癥.

2）動物的分組及給藥.將48只Wistar大鼠隨機分為6組：正常組、模型組、西瓜霜組、開口箭醇提物劑低、中、高劑量組.后5組動物按上法造模40d后，于第40～47d分別用喉頭噴霧器給大鼠咽部噴蒸餾水、西瓜霜含片液（1.14g／kg）、開口箭醇提物低劑量組（0.16g／kg）、開口箭醇提物中劑量組（0.24g／kg）、開口箭醇提物高劑量組（0.32g／kg）.

3）檢測方法.實驗第47d各組動物給藥結束后，股靜脈取血，3 000rpm／min離心15min，取血清檢測IL－1β和TNF－α含量.然后立即取咽部粘膜及粘膜下組織進行病理形態學觀察.具體方法如下：組織固定48h后取出，切為2mm厚度，按常規脫水、透明、石蠟包埋、切片、HE染色，于光學顯微鏡下觀察、攝片.

2 結 果

2.1 一般狀態

從造模第2d開始，大部分大鼠逐漸出現搔抓口部、頻飲水而量多、口腔分泌物增多、納食減少、自發活動減少、咽部充血呈鮮紅色、腫脹等癥狀與體征；第3～7d癥狀較明顯，半月后大鼠明顯適應，癥狀稍減退；正常對照組則未出現上述情況；開口箭醇提物高劑量組、西瓜霜組治療7d后，上述癥狀、體征基本恢復正常，中、低劑量組恢復稍差；模型對照組的上述癥狀、體征則仍然存在.

2.2 血常規指標變化

與正常組相比，模型組白細胞和粒細胞數目顯著升高（P＜0.01）；開口箭醇提物可使其數目降低，與模型組比較具有顯著性差異（P＜0.01），其改善作用隨劑量的增加而增強，而且開口箭醇提物高劑量組效果優于西瓜霜組（見表1）.

表1 開口箭醇提物對慢性咽炎大鼠血常規的影響，n＝8）

表1 開口箭醇提物對慢性咽炎大鼠血常規的影響，n＝8）

與正常組比較：＃P＜0.05，＃＃P＜0.01；與模型組比較：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01.

組別 劑量／（g·kg－1）白細胞數／（109·L－1）粒細胞數／（109·L－1－－ 5.73±0.5 0.4±0.1模型組 －－ 11.40±0.9＃＃2.6±0.2＃＃開口箭醇提物低劑量組 0.16 9.35±0.3＊＊ 0.6±0.1＊＊開口箭醇提物中劑量組 0.24 5.63±0.6＊＊ 0.5±0.1＊＊開口箭醇提物高劑量組 0.32 7.49±0.5＊＊ 0.5±0.1＊＊西瓜霜組 1.40 5.90±0.5＊＊ 0.9±0.1正常組）＊＊

2.3 開口箭醇提物對慢性咽炎大鼠血清IL－1β和TNF－α含量的影響

與正常相比，模型組血清中IL－1β和TNF－α含量顯著升高（P＜0.05 ＆P＜0.01）；開口箭醇提物可使血清中IL－1β和TNF－α含量降低，與模型組比較具有顯著性差異（P＜0.05 ＆P＜0.01），其改善作用隨劑量的增加而增強，而且開口箭醇提物高劑量組效果優于西瓜霜組（見表2）.

表2 開口箭醇提物對慢性咽炎大鼠血清IL－1β和TNF－α含量的影響（，n＝8）

表2 開口箭醇提物對慢性咽炎大鼠血清IL－1β和TNF－α含量的影響（，n＝8）

與正常組比較：＃P＜0.05，＃＃P＜0.01；與模型組比較：＊P＜0.05，＊＊P＜0.01.

組別 劑量／（g·kg－1）IL－1β／（pg·mL－1）TNF－α／（pg·mL－1）正常組 －－ 6.66±0.12 22.44±0.27模型組 －－ 9.87±0.30＃＃ 27.88±1.87＃開口箭醇提物低劑量組 0.16 8.22±0.15 22.78±0.67＊開口箭醇提物中劑量組 0.24 8.46±1.11 26.54±1.95＊＊開口箭醇提物高劑量組 0.32 7.71±0.61＊＊ 23.97±0.13＊＊西瓜霜組 1.40 7.90±0.56＊＊ 25.34±0.16＊＊

2.4 開口箭醇提物對慢性咽炎大鼠咽部組織形態學的影響

HE染色結果顯示：正常組可見黏膜上皮層多為未角化復層扁平上皮；固有層多為致密結締組織，內有少量血管，未見有血管擴張，水腫，炎性細胞浸潤及纖維組織增生；黏膜下層、肌肉層結構正常，均未見明顯炎性改變.模型組：大部分動物咽部黏膜上皮層可見明顯增生；固有層內見血管擴張及大量炎性細胞浸潤，纖維組織增生；黏膜下層可見腺體肥大、增生、萎縮等，其周圍見血管數量增多、血管擴張、炎性細胞密集性浸潤及纖維組織增生；與模型組比較，開口箭醇提物和西瓜霜治療后大部分大鼠咽部未見角化復層扁平上皮；固有層內充血輕，未見明顯纖維增生，部分動物結締組織緊密接近正常組；黏膜下層混合腺未見明顯肥大、增生、萎縮等（如圖1所示）.

圖1 開口箭醇提物對慢性咽炎大鼠咽部組織形態學的影響

3 討 論

氨水是堿性刺激物質，局部噴霧能刺激咽部黏膜，使之充血腫脹，形成急性炎癥，反復刺激，形成慢性炎癥.在實驗中，選用 Wistar大鼠為研究對象，造模后，白細胞和粒細胞數目顯著升高；炎性細胞因子IL－1β和TNF－α含量顯著升高；病理切片結果顯示：模型動物咽部黏膜上皮層可見明顯增生、炎性細胞浸潤，纖維組織增生及腺體肥大、增生、萎縮等.上述病理特征的變化基本符合臨床上慢性咽炎診斷標準［5－6］.醫書記載：開口箭以根狀莖入藥，具有清熱解毒、祛風除濕、散瘀止痛的功效［7］，現代藥理實驗研究表明其具有較強的抗腫瘤、抗炎［3］、抑菌、醒酒等活性.本實驗研究發現：在用開口箭醇提物治療后，開口箭醇提物在改善大鼠一般狀態，降低白細胞和粒細胞數目及IL－1β、TNF－α含量，改善病理組織形態學方面顯示出較好的療效和優勢.本實驗證實開口箭醇提物在改善咽部炎性癥狀，改變咽部病理組織形態方面，具有獨特優勢.其治療咽炎的主要機制是：減少炎性細胞因子生成，對抗過量細胞因子，減緩對炎性細胞的趨化與激活，從而達到對抗咽部炎癥.

［1］ 唐大軒，葛 麟，王 莉，等.甘桔冰梅片防治咽炎作用研究［J］.中藥藥理與臨床，2010，26（5）：137－139.

［2］ 徐蘭蘭，鄒 坤，汪鏨植，等.開口箭提取物治療急性咽炎的實驗研究［J］.江蘇中醫藥，2008，40（8）：78－79.

［3］ 中華人民共和國衛生部.中藥新藥臨床研究指導原則［M］.北京：人民衛生出版社，1993：308.

［4］ 林 慧，梅全喜.中藥制劑治療急性咽炎的研究進展［J］.時珍國醫國藥，2007，10（4）：2448.

［5］ 廖華軍，馬 赟，彭國平.勝紅薊治療慢性咽炎有效部位的篩選［J］.中華中醫藥學刊，2010，28（1）：185.

［6］ 賈 敏，袁 琨.慢性咽炎患者咽部細菌調查分析［J］.中華醫院感染學雜志，2010，20（13）：1883.

［7］ 王 停，荊 魯，魯獻斌，等.玉樞含片對急性咽炎大鼠血清白介素－6及腫瘤壞死因子等指標的影響［J］.北京中醫藥大學學報，2002，25（4）：31－33.