UF-1000i尿沉渣分析儀假陽(yáng)性結(jié)果分析

劉常軍 劉 婷 董 矜 姜 輝 田亞平*

(1.中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院生化科，北京 100853;2.吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院，吉林 130000)

近年來(lái)，隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，用于尿液成分檢查的方法和手段不斷更新，尿沉渣分析儀現(xiàn)已成為臨床實(shí)驗(yàn)室不可缺少的儀器之一。由于全自動(dòng)尿沉渣分析儀具有操作規(guī)范化、檢測(cè)速度快、重復(fù)性好、一次可以檢測(cè)多個(gè)參數(shù)等優(yōu)點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于臨床。

UF-1000i尿液有形成分分析儀能快速篩選異常樣本，并對(duì)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、上皮細(xì)胞、管型、細(xì)菌等主要參數(shù)進(jìn)行定量報(bào)告，可將結(jié)晶、類酵母細(xì)胞、小圓細(xì)胞、管型、黏液等作為標(biāo)記參數(shù)，輸出標(biāo)記信息，而且能夠提供血尿的來(lái)源［1］。為尿液檢驗(yàn)的統(tǒng)一、標(biāo)準(zhǔn)化提供了條件，從而減少了顯微鏡檢查時(shí)人員差異造成的結(jié)果誤差。但是在臨床工作中發(fā)現(xiàn)此儀器的檢測(cè)結(jié)果存在一定的假陽(yáng)性，需要引起檢驗(yàn)人員及臨床醫(yī)生的注意，下面本研究就著重分析一下出現(xiàn)假陽(yáng)性的原因。

1 對(duì)象和方法

1.1 標(biāo)本來(lái)源

采用抽簽法隨機(jī)收集中國(guó)人民解放軍總醫(yī)院住院患者尿液標(biāo)本500例。

1.2 儀器與試劑

日本SYSMEX公司UF-1000i全自動(dòng)尿沉渣分析儀、德國(guó)Roche公司URISYS 2400尿液干化學(xué)分析儀、日本奧林巴斯光學(xué)顯微鏡、中國(guó)北京儀和方圓科技有限公司IEC CL40離心機(jī)。試劑均為UF-1000i和URISYS 2400配套試劑，由北京巴瑞公司提供。

1.3 方法

每天早晨做標(biāo)本前對(duì)UF-1000i進(jìn)行陰性、陽(yáng)性質(zhì)控物測(cè)試，確保質(zhì)控通過(guò)后再進(jìn)行標(biāo)本的檢測(cè)。所有送檢標(biāo)本均使用一次性清潔尿管收集晨尿15～18 mL，并立即進(jìn)行UF-1000i尿沉渣檢測(cè)、干化學(xué)檢測(cè)及顯微鏡鏡檢(離心后鏡檢)，所有超過(guò)UF-1000i分析儀參考范圍而鏡檢正常者視為假陽(yáng)性結(jié)果(UF-1000i分析儀正常參考范圍如下:紅細(xì)胞:0～27/μL;白細(xì)胞:0～36/μL;管型:0 ～1/μL;上皮細(xì)胞:0 ～15/μL;精子:0 ～1/μL)［2］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，計(jì)數(shù)資料用例數(shù)和百分?jǐn)?shù)表示，行敏感度，特異度和Kappa系數(shù)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 陽(yáng)性、假陽(yáng)性結(jié)果統(tǒng)計(jì)分析

以鏡檢為標(biāo)準(zhǔn)，分別統(tǒng)計(jì)UF-1000i檢測(cè)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、管型、上皮細(xì)胞的假陽(yáng)性率。500份樣本中，有178份陽(yáng)性樣本(RBC 83例、WBC 61例、管型13例、EC 21例)，其中有20份樣本UF-1000i的主要檢測(cè)項(xiàng)目均出現(xiàn)假陽(yáng)性，其中RBC、WBC、管型、EC分別有9例、5例、3例、3例出現(xiàn)了假陽(yáng)性結(jié)果，假陽(yáng)性率分別為 10.8%、8.2%、23.1%、14.3%，詳見(jiàn)表 1。

表1 UF-1000i檢測(cè)結(jié)果Tab.1 Positive and false positive rate of UF-1000i results

2.2 假陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果的干擾物分析

尿液標(biāo)本中攜帶污染、患者服用某些藥物、留取標(biāo)本的容器不清潔以及儀器本身的靈敏性等都會(huì)使得RBC、WBC、管型、EC等檢測(cè)指標(biāo)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果，假陽(yáng)性檢測(cè)結(jié)果的干擾物主要有結(jié)晶、細(xì)菌、真菌孢子、大量黏液絲、陰道毛滴蟲(chóng)等，詳見(jiàn)表2。

表2 假陽(yáng)性干擾物統(tǒng)計(jì)Tab.2 Substances list which may cause false positive result

2.3 UF-1000i的靈敏度，特異性分析

以尿液鏡檢結(jié)果為金標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)UF-1000i尿液沉渣流式自動(dòng)分析儀的靈敏度，特異性、及Kappa系數(shù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，詳見(jiàn)表3。

靈敏度 =真陽(yáng)性/(真陽(yáng)性 +假陰性)=158/(158+5)=96.93%;特異性=真陰性/(真陰性+假陽(yáng)性)=317/(317+20)=94.07%;Kappa系數(shù)為0.933(P ＜0.05)。

表3 鏡檢與UF-1000i尿液沉渣分析儀結(jié)果陰陽(yáng)性符合率Tab.3 The accuracy of microscopic analysis and UF-1000i urinary sediment analyzer (%)

3 討論

由于尿沉渣分析儀并不對(duì)標(biāo)本作任何處理，所以對(duì)尿中細(xì)胞造成破壞有限，基本上保持了細(xì)胞的完整的形態(tài)，從而提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性［3-4］。但是，由于其基本原理是分析尿液有形成分的大小，且尿沉渣成分復(fù)雜，所以在尿沉渣檢測(cè)中難于避免假陽(yáng)性結(jié)果，其用途和結(jié)果仍然只是進(jìn)行人群篩選［5］。經(jīng)過(guò)本研究總結(jié)，引起假陽(yáng)性的原因可能有:

1)標(biāo)本污染問(wèn)題:WBC、RBC增多，而干化學(xué)WBC、RBC陰性或弱陽(yáng)性，此時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)化的顯微鏡復(fù)檢，發(fā)現(xiàn)標(biāo)本可能是污染嚴(yán)重、容器不夠潔凈或有大量磷酸鹽、尿酸鹽結(jié)晶、特別是草酸鈣結(jié)晶、細(xì)菌等有形物質(zhì)增多所致。標(biāo)本室溫放置時(shí)間過(guò)長(zhǎng)可能會(huì)有大量細(xì)菌繁殖，從而影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)盡快進(jìn)行尿液的相關(guān)檢測(cè)，避免假陽(yáng)性結(jié)果的出現(xiàn)，發(fā)現(xiàn)干化學(xué)與流式分析儀結(jié)果不一致時(shí)要及時(shí)鏡檢。

2)敏感度問(wèn)題:尿沉渣分析儀對(duì)紅細(xì)胞檢測(cè)比人工鏡檢敏感，但敏感性高會(huì)將形態(tài)類似于紅細(xì)胞的大量結(jié)晶(主要是圓形草酸鈣結(jié)晶)、非晶形鹽類、真菌孢子、細(xì)菌、脂肪滴等［6］誤判為紅細(xì)胞。當(dāng)尿中類酵母細(xì)胞增多且紅細(xì)胞計(jì)數(shù)也增高時(shí)，本研究顯示紅細(xì)胞計(jì)數(shù)為假陽(yáng)性增多，主要是由于類酵母細(xì)胞中橢圓形孢子增多，分析儀會(huì)將其誤認(rèn)為紅細(xì)胞而導(dǎo)致假陽(yáng)性。因此，儀器靈敏度提高的同時(shí)假陽(yáng)性率也有所增加，所以當(dāng)儀器提示類酵母細(xì)胞增多時(shí)，有必要進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的顯微鏡復(fù)檢加以區(qū)別

3)尿液自身問(wèn)題:當(dāng)尿中上皮細(xì)胞增多時(shí)，干化學(xué)的WBC、RBC會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性率增高，而流式尿分析儀的WBC、RBC計(jì)數(shù)不高，2者結(jié)果不符時(shí)，臨床實(shí)驗(yàn)室工作人員要及時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)化的顯微鏡復(fù)檢標(biāo)本，排除假陽(yáng)性結(jié)果［7］。檢查結(jié)果有管型標(biāo)記，此時(shí)用標(biāo)準(zhǔn)化的顯微鏡復(fù)檢為尿中黏液絲、白細(xì)胞團(tuán)等增多所致，少數(shù)女性尿中為白帶增多也可引起。偶見(jiàn)真菌大量出現(xiàn)引起管型假陽(yáng)性。因此，臨床實(shí)驗(yàn)室工作人員在出具檢查報(bào)告時(shí)一定要注明未見(jiàn)管型，以免引起臨床醫(yī)生的誤診。

根據(jù)前向散射光脈沖測(cè)定管型的長(zhǎng)度，熒光脈沖測(cè)定管型內(nèi)含物，電阻抗脈沖測(cè)定管型的外形［8］。由于尿液中含有多種有形成分，形態(tài)各異，以至產(chǎn)生與管型相似的前向散射光脈沖和熒光脈沖寬度，被儀器誤認(rèn)為管型而產(chǎn)生假陽(yáng)性結(jié)果。造成尿沉渣分析儀管型假陽(yáng)性的原因可能有以下幾種情況:① 大量的上皮細(xì)胞:當(dāng)部分上皮細(xì)胞發(fā)生黏連成一體時(shí)，其分布寬度和散射寬度均增大，被儀器誤認(rèn)為病理管型，這種情況多見(jiàn)于女性的尿中。② 成團(tuán)的膿細(xì)胞:成團(tuán)的膿細(xì)胞在鞘液中易形成串珠排列，使前向散射光寬度和熒光脈沖寬度均增強(qiáng)，而被儀器誤認(rèn)為管型［9］。③黏液絲:大部分黏液絲黏附細(xì)菌或細(xì)胞等而被熒光染色后，發(fā)出強(qiáng)的前向散射光脈沖，在大小和外形上接近病理管型而被儀器誤認(rèn)。④ 其他:如大量的磷酸鈣結(jié)晶，其外形與管型相似而被誤認(rèn)為是管型，此外尿液中的真菌、細(xì)菌和其他雜質(zhì)也可能造成尿液檢查管型呈假陽(yáng)性，應(yīng)多加注意。

隨著檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展，尿液分析儀日新月異，不斷更新?lián)Q代，尿沉渣分析儀準(zhǔn)確性、精密度、分析速度等都優(yōu)于人工，特別是在診斷血尿來(lái)源方面。儀器的方便，準(zhǔn)確，干擾小等特性，為臨床檢驗(yàn)提供了很好的診斷依據(jù)［10］。但在臨床工作過(guò)程中，UF-1000i型尿沉渣分析儀仍存在一些不足，對(duì)雜質(zhì)含量較少的標(biāo)本其分析結(jié)果均比較準(zhǔn)確，可用于尿液標(biāo)本的快速篩查檢測(cè)，但對(duì)含雜質(zhì)多，如結(jié)晶、非結(jié)晶型鹽類多的標(biāo)本，其出現(xiàn)假陽(yáng)性的比率較高。因標(biāo)本中雜質(zhì)太多容易引起機(jī)器的誤判，造成假陽(yáng)性率增高，值得檢驗(yàn)醫(yī)師的關(guān)注，以避免因儀器檢測(cè)造成的某些誤診或漏診情況的發(fā)生。所以，UF-1000i儀器的檢查只能是作為篩查，不能完全取代人工鏡檢。

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