肝復康膠囊對氨基半乳糖所致小鼠肝損傷的療效研究

劉彥雙，楊貴真

（河北醫科大學，河北 石家莊 050200）

肝復康膠囊對氨基半乳糖所致小鼠肝損傷的療效研究

劉彥雙，楊貴真

（河北醫科大學，河北 石家莊 050200）

目的 探討肝復康膠囊對氨基半乳糖所致小鼠肝損傷的療效。方法 將肝復康膠囊灌胃給予，腹腔注射氨基半乳糖致小鼠肝損傷。用半自動生化分析儀測小鼠血清丙氨酸氨基轉移酶（ALT）和天冬氨酸氨基轉移酶（AST）活性，取小鼠肝臟做病理形態學觀察。結果 給予肝復康膠囊（0.9、1.8、3.6 g/kg·d）可顯著降低氨基半乳糖肝損傷小鼠血清ALT和AST活性，并使肝病理損傷有不同程度減輕。結論 肝復康膠囊對小鼠急性肝損傷有明顯治療作用。

肝復康膠囊；氨基半乳糖；肝損傷

肝復康膠囊是復方中草藥制劑，主要由當歸、鱉甲、白芍、三七、厚樸、茵陳、豬苓等中草藥組成，具有活血化淤、清熱利濕、扶正祛邪和滋養肝腎之功效。為進一步了解肝復康膠囊的藥理作用和臨床應用價值，我們應用氨基半乳糖所致急性肝損傷的動物模型，研究本品的護肝作用。

1 材料

1.1 藥品

肝復康膠囊，70毫克/粒，由河北醫科大學科技總公司提供。聯苯雙酯滴丸，由北京協和藥廠生產，1.5毫克/粒。

1.2 動物

昆明小鼠60只，雌雄各半，體重18～22 g，由河北醫科大學實驗動物中心提供。

1.3 試劑

氨基半乳糖用生理鹽水配成10%溶液。丙氨酸氨基轉移酶（ALT）試劑盒和天冬氨酸氨基轉移酶（AST）試劑盒，由石家莊試劑廠生產。

1.4 儀器

可見／紫外分光光度儀，半自動生化分析儀，恒溫水浴箱。

2 方法

2.1 氨基半乳糖肝損傷動物模型的制備[1，2]

取昆明小鼠60只，隨機分成空白對照組、氨基半乳糖肝損傷模型組（簡稱模型組）、肝復康膠囊3個劑量組（0.9、1.8、3.6 g/kg·d）、陽性對照藥聯苯雙酯組（200 mg/kg·d），每組 10 只。聯苯雙酯組及肝復康膠囊3個劑量組每天灌胃給藥一次，模型組和空白對照組以等容積自來水灌胃，連續7天，于末次給藥后1小時，除空白對照組外，其余各組均腹腔注射10%氨基半乳糖800 mg/kg（生理鹽水配制），空白對照組則腹腔注射等量生理鹽水，24小時后測定指標，摘取眼球取血，分離血清，按試劑盒說明測定血清ALT和AST活性。采血完畢，斷頭處死小鼠，取肝左葉部位約0.5 cm3固定于Bone氏液中，包埋，修塊，切片，HE染色，做病理形態學觀察。小鼠處死前自由飲水，禁食12小時。

2.2 統計學處理

采用EXCEL軟件處理的兩組間t檢驗和方差分析方法。

3 結果

3.1 病理形態學觀察

空白對照組肝小葉結構清晰，肝細胞結構正常，肝細胞索結構清晰，圍繞中央靜脈呈放射狀排列（見圖1）。模型組可見肝臟正常結構被破壞，肝小葉排列紊亂，肝細胞邊界不清楚，胞漿疏松，肝竇受壓變窄，肝細胞大量變性壞死，有氣球樣變或嗜酸性變，匯管區大量淋巴細胞浸潤且有大量的膠原纖維增生（見圖2）。肝復康膠囊大劑量組可見肝小葉結構大致正常，肝細胞變性壞死情況較輕，與模型組比較肝臟病理改變有顯著改善（見圖3）。

圖1 空白對照組肝臟病理形態（HE 染色×160）

圖3 肝復康膠囊大劑量組肝臟病理形態（HE染色×160）

3.2 對血清ALT、AST的影響

實驗結果表明:與空白對照組比較，模型組小鼠的血清ALT和AST活性顯著升高。與模型組比較，肝復康膠囊3個劑量組及聯苯雙酯組小鼠的血清ALT和AST活性均明顯降低（見表1）。

表1 肝復康膠囊對氨基半乳糖所致急性肝損傷小鼠血清 ALT、AST 活性的影響（n=10，±s，d）

表1 肝復康膠囊對氨基半乳糖所致急性肝損傷小鼠血清 ALT、AST 活性的影響（n=10，±s，d）

注：與模型組比較*P<0.01

劑量（g/kg） ALT（U/L） AST（U/L）空白對照組模型組聯苯雙酯組肝復康膠囊組__0.2 0.9 1.8 3.6 32.1±4.6*195.0±13.2 56.2±6.4*154.8±12.9*140.8±24.1*180.3±15.1*296.4±15.2*367.0±18.2 308.6±17.4*323.2±31.1*320.5±18.4*323.6±16.9*

4 討論

肝損傷是多因素參與的復雜過程，自由基和脂質過氧化反應在肝損傷及肝疾病中起十分重要的作用。氨基半乳糖是肝細胞的磷酸尿嘧啶核苷的干擾劑，進入機體后與磷酸尿苷（UDP）結合形成UDP-半乳糖胺，致使磷酸尿苷耗竭，從而使依賴其生物合成的核酸、糖蛋白、脂糖等物質合成受抑制，限制了細胞器及酶的生成和補充，細胞器受損，膜損害，造成肝細胞變性壞死[3]。本實驗證實氨基半乳糖可使小鼠血漿轉氨酶活力明顯提高。中醫認為：肝臟疾病毒邪是致病的基本因素，正虛是發病和邪氣滯留的關鍵，血淤是病證的主要特點。臨床常見證型是：熱毒熾盛和濕熱熏蒸，氣滯血淤和肝淤氣滯，脾胃不足和肝腎虧虛。治療往往多藥聯合應用。肝復康膠囊是一種復方中藥制劑，具有活血化淤，清熱利濕，扶正祛邪之功效。鱉甲既可軟堅散結，又可滋陰潛陽。當歸、三七養血活血，行氣祛淤。本實驗同時證實聯苯雙酯有明顯的保肝降酶作用，而肝復康膠囊具有相似的治療效果，這為肝復康膠囊的臨床應用提供了一定的藥理學依據。

[1]Hu H.Proxidaftion mechanism and Protective effect of zine on D-galactosmine induced liver injury in rats[J].Chin J Pharmacol and Toxicol，2003（7）:81.

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[3]黃曉菡，曾文鋌，朱科倫，等.丹芪活肝膠囊對D-氨基半乳糖致大鼠肝損傷的保護作用[J].廣州醫藥，2009，40（5）：44～47.

R285.5

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1671-1246（2012）07-0111-02