婁詠崴,谷振環(huán)
(長(zhǎng)春市人民醫(yī)院 檢驗(yàn)科,吉林 長(zhǎng)春130051)
經(jīng)過(guò)國(guó)內(nèi)外學(xué)者近20年的研究,已經(jīng)證明人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染是宮頸癌的主要病因。HPV感染的檢測(cè)與分型是處理宮頸病變的重要依據(jù)之一,是篩查不可缺少的內(nèi)容[1]。本文通過(guò)PCR-反向點(diǎn)雜交法進(jìn)行HPV分型檢測(cè),分析吉林和黑龍江地區(qū)HPV感染情況,分析兩個(gè)地區(qū)感染率、亞型分布特征,為宮頸癌癌前篩查及預(yù)防提供依據(jù)。
1.1 研究對(duì)象 2010年2月至9月在艾迪康醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)所自愿檢測(cè)的患者共3485例,其中來(lái)自吉林省各醫(yī)院的自愿送檢患者1310例,來(lái)自黑龍江省各醫(yī)院的自愿送檢患者2175例,年齡從20歲-60歲
1.2 主要儀器和試劑 人乳頭瘤病毒基因分型(23型)檢測(cè)試劑盒(亞能公司),PCR擴(kuò)增儀,雜交儀由亞能公司生產(chǎn)。
1.3 采集方法 標(biāo)本采集采用亞能生物技術(shù)有限公司提供的宮頸脫落細(xì)胞采集器收集宮頸脫落細(xì)胞。用棉拭子擦去宮頸口的過(guò)多分泌物,將采集器置于宮頸口黏膜,單向旋轉(zhuǎn)4-5周,并停留2秒鐘,慢慢抽出,將采集器放入細(xì)胞保存液中,旋緊管蓋送檢。
1.4 檢測(cè)方法 通過(guò) HPV DNA的提取、擴(kuò)增、雜交、洗膜、顯色,結(jié)果判讀。檢測(cè)18種高危HPV16、18、31、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83;5種低危型 HPV6、11、42、43、81。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)進(jìn)行分析,率的比較采用χ2檢驗(yàn),P<0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 HPV感染情況 吉林地區(qū)1310例患者中感染人數(shù)659人,感染率50.3%;黑龍江地區(qū)2175例患者中感染人數(shù)733人,感染率33.7%。兩個(gè)地區(qū)的感染率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=94.8,P<0.05)。見(jiàn)表1。
2.2 高危型HPV感染情況 吉林地區(qū)1310例患者中感染高危型HPV人數(shù)462人,占35.3%,黑龍江地區(qū)2175例患者中感染高危型HPV人數(shù)534例,占24.6%。兩地區(qū)高危型病毒的感染率有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(χ2=45.79,P<0.05)。見(jiàn)表2。

表1 吉林地區(qū)、黑龍江地區(qū)HPV感染情況

表2 吉林地區(qū)、黑龍江地區(qū)高危型HPV感染情況
2.3 HPV亞型分布情況 在HPV陽(yáng)性標(biāo)本中,吉林地區(qū)與黑龍江地區(qū)HPV感染亞型分布占比基本相同,高危亞型感染前五位依次為:HPV 16、58、52、56、66,低危亞型感染前三位依次為 HPV 6、11、43。結(jié)果中單一亞型感染吉林地區(qū)占51.9%,黑龍江地區(qū)占61.9%,在多重亞型感染中,兩個(gè)地區(qū)都以2-3個(gè)亞型同時(shí)感染占比較多,分別為吉林37.3%,黑龍江32.3%。

表2 HPV感染亞型分布情況表
宮頸癌是婦科常見(jiàn)的惡性腫瘤之一,僅次于乳腺癌而位居第二[2]。近年來(lái),宮頸癌的發(fā)病率持續(xù)上升并呈年輕化趨勢(shì),而高危型人乳頭瘤病毒的持續(xù)感染與宮頸癌發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。至今已經(jīng)分離鑒定出超過(guò)100多種HPV病毒的亞型,其中有40多種基因型與婦女宮頸病變密切相關(guān)。而不同國(guó)家和地區(qū)HPV的流行亞型存在地域性差異。本文研究的吉林地區(qū)與黑龍江地區(qū)的高危型HPV感染率分別為35.3%、24.6%有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,這與其他地區(qū)的報(bào)道也有著很大的差異,也證實(shí)了HPV感染率地區(qū)之間的差異性。另研究中發(fā)現(xiàn)這兩個(gè)地區(qū)感染的亞型中高危亞型都以HPV16、58、52為主,低危亞型以HPV6、11為主。其他報(bào)道深圳地區(qū)主要流 行 的 HPV 亞 型 為 HPV-16 (44.3%)、HPV-58(16.4%)及 HPV-52(13.4%)[3]。HPV-16、58、18、31亞型是湘南地區(qū)浸潤(rùn)性宮頸癌最常見(jiàn)的感染類(lèi)型[4]。目前國(guó)內(nèi)大樣本涵蓋地區(qū)較廣的HPV感染的流行病學(xué)研究較少,而宮頸癌 HPV感染型別有著很大的區(qū)域性,中國(guó)地域?qū)拸V,人口眾多,HPV基因型分布復(fù)雜。
高危型HPV基因型的持續(xù)感染是宮頸癌形成的先決條件,但是,目前HPV持續(xù)感染的標(biāo)準(zhǔn)還很模糊。從時(shí)間上、感染的HPV基因型上來(lái)說(shuō)不同學(xué)者的研究有不同的觀點(diǎn)。由于90%HPV感染都可以在6個(gè)月內(nèi)被自身免疫機(jī)制所清除,檢測(cè)患者感染的HPV基因亞型可以監(jiān)測(cè)患者攜帶病毒的時(shí)間和患者機(jī)體清除病毒情況,對(duì)病毒持續(xù)感染有一定的提示價(jià)值。
目前HPV疫苗用于預(yù)防和治療HPV感染已成為研究的熱點(diǎn)。現(xiàn)已上市的HPV預(yù)防疫苗具有“型特異性”,僅對(duì)預(yù)防HPV-16和18型2種高危型的HPV感染有效。而不同HPV亞型對(duì)不同種族人群致癌性的強(qiáng)弱也明顯不同[5,6]。明確一個(gè)地區(qū)HPV流行的主要型別,對(duì)于宮頸癌的預(yù)防及設(shè)計(jì)基因疫苗提供可靠依據(jù)。
[1]郎景和.迎接子宮頸癌預(yù)防的全球挑戰(zhàn)與機(jī)遇[J].中華婦產(chǎn)科雜志,2002,37(3):129.
[2]王建捷,馮凌,靳家玉,等.雜交捕獲二級(jí)代法檢測(cè)人乳頭瘤病毒DNA在實(shí)驗(yàn)宮頸病變?cè)\斷中的價(jià)值[J].中國(guó)實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志,2006,22(1):51.
[3]韓定英,吳潔,姜碧卿,等.深圳市羅湖區(qū)1420例婦女生殖道人乳頭瘤病毒篩查結(jié)果分析[J].中國(guó)初級(jí)衛(wèi)生保健,2008,22(2):42.
[4]陳建輝,陳忠東.湘南地區(qū)浸潤(rùn)性宮頸癌 HPV基因分型的研究[J].中國(guó)現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志,2009,12(12):1852.
[5]崔 英,胥愛(ài)輝,蔡永娥,等.人乳頭瘤病毒致宮頸癌的分子機(jī)制研究[J].現(xiàn)代腫瘤醫(yī)學(xué),2008,16(1):143.
[6]Shi JF,Qiao YL,Smith JS,et al.Epidemiology and prevention of human papilloma virus and vervical cancer in China and Mongolia[J].Vaccine,2008,26S(12):M53.