鄭州市2006－2011年腹瀉病人沙門菌血清型和耐藥譜分析＊

沙門菌是一種重要的人獸共患病病原體，是引起人類感染性腹瀉和食物中毒的重要致病菌，其所致細菌性食物中毒爆發起數和發病人數多年來居我國首位［1］。沙門菌不僅感染人畜還會污染食品，其危害性日益受到人們重視。國內外研究表明，全球沙門菌感染有上升趨勢［2－3］。為了解鄭州市感染性腹瀉沙門菌的血清型分布情況和耐藥性。我們收集2006－2011年腹瀉病監測點感染性腹瀉病例標本中分離出的196株沙門菌進行結果分析。

1 材料與方法

1.1 標本收集 收集鄭州市人民醫院，鄭州市中心醫院，鄭州市第三人民醫院，鄭州市第二人民醫院，鄭州市兒童醫院等5家腹瀉病監測點感染性腹瀉病人，符合每日排便3次或3次以上，且大便呈稀便水樣便、粘液便或膿血便者作為采集對象。采集感染性腹瀉病人糞便標本1～2g立即保存到Cary－Blair運送培養基中，及時送達實驗室。

1.2 試劑 質控菌株大腸埃希氏菌（ATCC25922）購于中國生物制品檢定所；營養肉湯、營養瓊脂、SS瓊脂、麥康凱瓊脂、雙糖鐵瓊脂、MIU瓊脂、Mueller－Hinton瓊脂均購自廣東環凱微生物科技有限公司；API20E為法國梅里埃公司生產；沙門菌多價O血清及多價H血清購自泰國S＆A公司；藥敏紙片為英國Oxoid公司產品。

1.3 方 法

1.3.1 分離和鑒定 按《感染性腹瀉病原檢測技術》進行；生化鑒定采用法國梅里埃API20E產品。

1.3.2 血清凝集試驗

1.3.2.1 符合菌株接種于哥倫比亞瓊脂平板及軟瓊脂平板表面中央，36±1℃培養過夜，分別進行O多價、O因子血清凝集和H相多價、H單價血清凝集。H1相凝集陽性者，采用Swarm Agar瓊脂誘導H2相。

1.3.2.2 根據 Kauffman－White沙門菌抗原表檢索和報告血清分型結果。

1.3.3 藥敏試驗 采用 K－B紙片擴散法，按照2007版美國臨床實驗室標準化研究所（CLSI）文件標準判定藥敏實驗結果。

1.4 統計分析 用 WHONET5.4軟件對藥敏試驗結果進行數據分析。

2 結 果

2.1 血清群分布 2006－2011年從3 266份腹瀉病人糞便標本中共分離出沙門菌株196份，主要分布于10個血清群，其中以B群為主，占33.67%，其次為D1群，占32.14%（表1）。

表1 鄭州市2006－2011年沙門氏菌血清群分布Tab.1 Distribution of Salmonellaserogroup in Zhengzhou City，2006－2011

2.2 血清型分布 196株沙門菌中共鑒定出36個血清型，其中9株未定型；以腸炎沙門菌為主，共檢出58株，占29.59%，其次為鼠傷寒沙門菌，檢出39株，占19.90%。湯卜遜沙門菌和德爾卑沙門菌分別為6.63%和5.10%，阿貢納沙門菌和山夫登堡沙門氏菌為3.06%，其余血清型均為3.0%以下。

2.3 藥敏試驗結果 藥敏試驗結果顯示，196株菌對12種抗生素都有不同程度的耐藥，其中對氨芐西林、萘啶酸、復方新諾明和四環素的耐藥率分別為44.90%、42.34%、34.18%和32.14%；對頭孢西丁、頭孢他定和頭孢噻肟輕度耐藥，耐藥率分別為0.51%、1.53%和6.12%（表3）。

3 討 論

沙門菌感染性腹瀉遍布全球，在我國感染性腹瀉中占據第3位。許多沙門菌可在人、動物、食品和外環境之間相互傳播，導致人和動物腹瀉。鄭州市2006－2011年自感染性腹瀉病例中分離的196株沙門菌菌株血清群和血清型分布與我國其他省份相關報道大致符合［5］，只是在優勢血清型分布順序上略顯差別［2－4］。另外，我市分離的沙門菌株中除常見的腸炎、鼠傷寒、阿貢納、德爾卑、倫敦、湯卜遜、豬霍亂、紐波特等沙門菌外，另有21個罕見血清型也在我市相繼出現，分別為諾里季、徹斯特、巴基斯坦、里地烏、巴布亞、貝塔、羅森、安德萊赫特、金斯敦、拉古什、田納西、桑克馬克斯、欽科、朗根薩爾查、阿木提夫、旺茲沃思、阿伯丁、科瓦利斯、舒卜拉、斯坦利和肯塔基沙門菌，該新菌型的檢出豐富了我市感染性腹瀉病原譜的構成。

表2 196株沙門菌對12種抗生藥物耐藥性試驗結果Tab.2 Drug resistance results on 196strains of Salmonellastrains to 12antibiotics

從鄭州市2006－2011年感染性腹瀉病人所分離沙門菌主要菌型檢出率觀察到，2006年和2007年鼠傷寒沙門菌為鄭州市腹瀉病人的優勢病原菌，而2008年、2009年和2010年腸炎沙門菌逐漸超過了鼠傷寒沙門菌，成為鄭州市腹瀉病人的優勢病原菌。值得注意的是，鄭州市2011年的優勢菌株為湯卜遜沙門菌。優勢菌型的逐年變遷的流行病學意義需要進一步監測研究。

抗生素在臨床中的普遍使用，使沙門菌的耐藥及毒副作用問題日益嚴重，可導致新生兒感染性腹瀉病死率升高。本研究藥敏試驗結果顯示，對12種抗生素都有不同程度的耐藥，其中所有菌株耐藥集中在氨芐西林、萘啶酸、復方新諾明和四環素4種抗菌藥物，其中鼠傷寒沙門菌耐藥率最高，腸炎沙門菌，嬰兒沙門菌、德爾卑沙門菌耐藥率有明顯上升趨勢，多重耐藥率也有不同程度的提高。監測結果提示，臨床上應進一步加強抗生素應用管理，避免和減少選擇性壓力造成的耐藥性基因傳播。

［1］Chui HL，Zhang XL，Liao XG，et al.Salmonellaserotype distribution and antibiotic susceptibility analysis from raw foods in Zhengzhon city，2008［J］.Chin J Zoonoses，2010，26（3）：292－293.（in Chinese）炊慧麗，張秀麗，廖興廣，等.2008年鄭州市生肉類食品中沙門菌血清型分布和抗生素藥物敏感性分析［J］.中國人獸共患病學報，2010，26（3）：292－293.

［2］Xu XB，Gu BK，Jin HM，et al.Epidemiological characteristics of serotypes ofSalmonellaisolated in Shanghai［J］.Chin J Zoonoses，2009，25（2）：156－158.（in Chinese）許學斌，顧寶柯，金匯明，等.上海市沙門氏菌血清型流行特征［J］，中國人獸共患病學報，2009，25（2）：156－158.

［3］Wang XQ，Jiao XA，Liu XW，et al.Characterization of multidrugresistantSalmonellaserovarsisolated from meats and human samples in some regions of Jiangsu［J］.Acta Microbiol Sinica，2007，47（2）：221－227.（in Chinese）王曉泉，焦新安，劉曉文，等.江蘇部分地區食源性和人源性沙門氏菌的多重耐藥性研究［J］.微生物學報，2007，47（2）：221－227.

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［5］Xia S，Hendriksen RS，Xie Z，et al.Molecular characterization and antimicrobial susceptibility ofSalmonellaisolates from infections in humans in Henan Province，China［J］.J Clin Microbiol，2009，47（2）：401－409.DOI：10.1128/JCM.01099－08