獸用生物制品支原體檢驗項近5年抽檢情況分析

劉軼秋，徐 磊，張瑞婷

(中國獸醫藥品監察所，北京 100081)

近幾年，隨著獸藥市場需求的不斷加大，獸用生物制品的產量和品種也在持續增長。支原體污染是獸用生物制品生產中的一個常見問題，監督抽檢對保障產品質量有著重要作用。為了解全國獸用生物制品支原體污染情況，筆者匯總了近5年(2007-2011年)中國獸醫藥品監察所抽檢的全國26家企業生產的22個品種141批制品的支原體檢驗情況，并對抽檢結果進行了分析，提出了提高生物制品支原體質量監測工作的幾點建議。

1 總體抽檢結果

1.1 各年度生物制品支原體檢驗項合格率 各年度合格率見表1。抽檢的141批生物制品中支原體檢驗項合格批數為113批，不合格28批，合格率為80.1%。

表1 各年度生物制品支原體檢驗項抽檢情況

1.2 不同品種生物制品支原體檢驗項合格率 抽檢的22種生物制品中有16種支原體檢驗抽檢合格率100%，占抽檢品種的72.7%(表2)。

表2 不同品種生物制品支原體檢驗項的抽檢情況

1.3 各年度生物制品企業支原體檢驗項抽檢情況被抽檢的26家企業生產的141批生物制品中，有8家生產企業存在支原體檢驗不合格項，不合格企業占被抽檢企業總數的30.8%。

2 結果分析

2.1 支原體檢驗抽檢合格率逐年提高 2007-2011年，中監所抽檢的生物制品企業覆蓋了全國17個省、市、自治區，包括北京、河北、山東、遼寧、黑龍江、吉林、江蘇、浙江、江西、湖北、湖南、四川、重慶、甘肅、福建、青海、新疆。2007-2010年抽檢的生物制品中，均有不同批次的支原體檢驗項不合格制品，尤以2008年合格率最低，為63.3%。2009年開始合格率有所提高，2009年、2010年、2011年制品合格率分別為75.0%、86.4%、100%。

2.2 支原體檢驗抽檢覆蓋面有待提高(表3) 目前檢驗項目中涉及支原體檢驗的生物制品共82種，而2007-2011年共抽檢品種22種，抽檢品種僅占全部品種的26.8%。各年度抽檢產品種類不多，禽、豬、羊和犬用疫苗抽檢比例不均衡，且有很多種類產品多年未進行監督抽檢。

表3 生物制品抽檢品種統計 個

2.3 支原體檢驗不合格品種較為集中 抽檢的141批生物制品中，禽用疫苗54批，全部合格。豬用疫苗37批，14批不合格;羊用疫苗14批，9批不合格;其他制品36批，5批不合格。支原體檢驗不合格制品集中在豬用疫苗、羊用疫苗和其他類制品上，共計6個品種:狂犬病活疫苗、水貂犬瘟熱活疫苗、豬乙型腦炎活疫苗、山羊痘活疫苗、豬偽狂犬病活疫苗(SA215株)、豬傳染性胃腸炎-流行性腹瀉二聯活疫苗(圖1)。因此，應對此類制品加強監督抽檢。

圖1 6種不合格制品抽檢批數與合格批數比例圖

2.4 企業越來越重視生物制品支原體污染問題2007年開始出現不合格制品企業，被抽檢的6家企業中有1家企業存在不合格制品;2008年被抽檢的14家企業中有6家企業存在不合格制品，不合格企業占抽檢企業的42.8%，達到近幾年的最高峰。生物制品污染支原體會給企業帶來巨大的經濟損失，越來越多的企業開始重視支原體污染問題。故自2008年之后被抽檢的生物制品不合格企業成下降趨勢，2009年不合格企業占被抽檢企業的40%，2010年不合格企業占被抽檢企業的12.5%，直至2011年被抽檢的10家企業中，不合格企業為0家。

3 建議

3.1 制定合理的監督計劃，加強監督抽檢力度為了更好的監測生物制品質量，應制定科學的抽檢計劃，加大抽檢的覆蓋面，使生物制品抽檢率上升到3%～5%。增加抽檢產品的種類，使抽檢覆蓋品種達到80%以上。加強獸用生物制品流通環節的監督抽檢。對抽檢不合格的企業重點監督，對不合格的產品加大抽檢數量。定期召開全國生物制品監督抽檢結果分析會議，分析抽檢工作中存在的問題，充分發揮監督工作的技術效能。

3.2 建立并完善生物制品信息溯源監督機制 將國內各生物制品企業信息、生產基本情況組成獸藥監管信息發布平臺，將產品抽檢結果及時在網上公布。對不合格產品、抽檢存在不合格產品的企業在網上公示，為生物制品行業提供及時準確的監控信息，及時反映全國獸用生物制品的整體質量狀況，為增強政府宏觀調控能力提供參考。

3.3 提高獸用生物制品質量，防止支原體污染 生物制品的支原體污染［1］是生產中比較常見的問題，常給企業帶來巨大的經濟損失。引起支原體污染的原因很多，如原材料本身受到污染、人員操作不慎、實驗室交叉污染等因素。實驗室應制定嚴格的管理制度，定期對質檢部門檢驗人員進行培訓，不斷提高檢驗水平操作技能，強化無菌意識，嚴格按照GMP規定和實驗室規范進行操作。

3.4 開展檢驗新方法的研究 根據《中國獸藥典》規定，支原體檢驗采用培養法［2-3］，此種方法是目前的“金標準”，但其檢驗周期較長，為29 d，操作也較繁瑣。因此很多生物制品企業在做相關產品檢驗時，為了等待檢驗結果，而不得不影響產品的銷售時間。為了使支原體檢驗更及時、準確，還應不斷開展其他方法的研究與驗證。目前可供參考的方法如 DNA 熒光染色法［4-5］、PCR 法［6］、瓜氨酸檢驗法［7］等，這些方法各有利弊，最終哪一種方法更及時、準確，適于操作，并能最終取代培養法，還需進行大量的實驗研究來確證。

［1］朱慶虎，劉蘭剛，康二勇.生物制品中的支原體污染［J］.畜牧獸醫科技信息，2010，6:9-11.

［2］中國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典二○○五年版三部［S］.

［3］中國獸藥典委員會.中華人民共和國獸藥典二○一○年版三部［S］.

［4］李晶梅，張 萍，秦紅剛，等.DNA熒光染色和 PCR技術在PRRSV凍干疫苗中支原體檢測的應用［J］.中國預防獸醫學報，2011，33(12):957-960.

［5］余 華，杜永鳳，嚴玉寶，等.DNA熒光染色法和培養法在支原體檢測中的比較［J］.安徽農業科技，2010，38(8):4039-4041.

［6］李菁竹.支原體污染的巢氏PCR檢測法的摸索及其初步驗證［D］.武漢:武漢生物制品研究所，2010.

［7］梁少東，黃小樂，嚴 媛，等.一種快速判定細胞培養中支原體污染的方法——瓜氨酸測定法［J］.生物技術通訊，2008，19(6):892-894.