參麥益氣合劑的研制及質(zhì)量控制

于良生 劉洪玲 王路平 李紅 梅涵

（青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院藥學(xué)部，山東 青島266003）

參麥益氣合劑是由人參、黃芪等藥味加工制成的中藥合劑，具有益氣活血、溫腎復(fù)脈之功效，能改善血液黏稠度、提高心率、加速房室傳導(dǎo)、改善心肌缺血、緩解心絞痛等。本品由我院資深心內(nèi)科專家和中藥制劑室共同研制而成，用于治療心血管疾病，取得了很好的效果。

1 參麥益氣合劑的研制

1.1 處方

人參10 g，麥冬15 g，五味子5 g，桂枝10 g，甘草5 g，當(dāng)歸10 g，黃芪10 g，淫羊藿15 g，苦參10 g，附子3 g，延胡索10 g，金銀花15 g。

1.2 制法

取上述藥味各100 倍量，置于提取器內(nèi)，加水100 000 mL浸漬1 h，加熱煎煮1.5 h，濾出藥液，藥渣再加水50 000 mL，加熱煎煮1 h，合并兩次藥液靜置12 h，取上清液濃縮至25 000 mL，分裝（每瓶25 mL），封口，116℃消毒40 min，貼標(biāo)簽即得。

2 急性毒性試驗(yàn)

2.1 藥品準(zhǔn)備

取本品250 mL，置70℃水浴，濃縮至37 mL(含生藥3.19 g/mL)。

2.2 給藥方法[1]

昆明種小鼠40 只（體重18 ～20 g，雌雄各半），在實(shí)驗(yàn)室動(dòng)物房飼養(yǎng)1 周后，分為實(shí)驗(yàn)組和空白對照組，采用最大給藥量法進(jìn)行急性毒性試驗(yàn)，給藥前禁食（不禁水）12 h，實(shí)驗(yàn)組給予藥品40 mL/kg 灌胃，空白對照組給予蒸餾水40 mL/kg 灌胃，間隔6 h 再次給藥，再次給藥前禁食2 h。給藥后4 h 內(nèi)密切觀察，此后每日上、下午各給藥1 次，連續(xù)觀察7 d，詳細(xì)紀(jì)錄。于第8 d 脫頸處死實(shí)驗(yàn)小鼠，大體解剖，肉眼觀察各臟器的改變。

2.3 結(jié)果

40 只小鼠給藥7 d 后，均健康生存，未見異常和中毒反應(yīng)，肉眼觀察各臟器無異常表現(xiàn)，測得最大耐受量為255.2 g/kg。

3 臨床應(yīng)用

3.1 一般資料

病人均為專科門診病人。其中206 例患者采用隨機(jī)方法分為治療組和對照組（單純西藥治療）。治療組104 例（男性58 例，占55.8%；女性46 例，占44.2%），年齡32 ～68 歲，平均年齡63.7 歲，病程短者半年，長者10 余年。對照組102 例（男性70 例，占68.6%；女性32 例，占31.4%），年齡48 ～76 歲，平均年齡64.7 歲，病程短者半年，長者10 余年。所有病例都經(jīng)過心電圖、心臟彩超、心電監(jiān)護(hù)等檢查確診，統(tǒng)計(jì)學(xué)處理提示，兩組患者治療前病情及心電圖表現(xiàn)無顯著差異性。

3.2 診斷標(biāo)準(zhǔn)

全部病例確診為冠心病心絞痛，輕重分級(jí)標(biāo)準(zhǔn)參照1979 年中西醫(yī)結(jié)合治療冠心病心絞痛及心律失常座談會(huì)制定的《冠心病心絞痛及心電圖療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)》[2]。

3.3 中醫(yī)辨證

參照國家中醫(yī)藥管理局1994 年6 月發(fā)布的《中華人民共和國中醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)·中醫(yī)病證診斷標(biāo)準(zhǔn)》，臨床見癥：胸痛、心胸窒悶或如物壓、氣短喘促、肢體沉重、脘痞痰多口黏、舌質(zhì)暗苔濁膩、脈滑。辨證分屬，痰濁痹阻、胸陽不振。

3.4 病例選擇

具有冠心病心絞痛主癥，診斷明確。屬輕中度，符合中醫(yī)辨證。每周發(fā)作2 次以上的冠心病勞累性心絞痛患者、重度患者不在本組觀察范圍之內(nèi)。

3.5 治療方法

治療組：口服參麥益氣合劑，每次1/2 瓶，每日2 次；同時(shí)應(yīng)用消心痛10 mg，每日3 次，腸溶阿司匹林75 mg，每日1 次。2 周為1 個(gè)療程。

對照組：除不服參麥益氣合劑，其他均相同。

3.6 觀察項(xiàng)目

詳細(xì)記錄治療前后心絞痛發(fā)作次數(shù)、程度、持續(xù)時(shí)間，是否需含硝酸甘油及所含數(shù)量；心電圖ST 段及T 波在治療前后的變化；治療前后血、尿常規(guī)及肝、腎功能。

3.7 療效評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)

顯效：心絞痛等主要癥狀消失或基本消失，體征明顯改善，心電圖恢復(fù)至正常范圍。

有效：心絞痛等主要癥狀減輕，體征部分改善，心電圖好轉(zhuǎn)。

無效：心絞痛等主要癥狀無改善，心電圖基本與治療前相同。

3.8 治療結(jié)果

治療組臨床療效和心電圖療效均優(yōu)于對照組（χ2檢驗(yàn)，χ2=10.36、5.13，P＜0.01，P＜0.05)，結(jié)果見表2。

表2 臨床療效及心電圖改變比較 （例）

4 質(zhì)量控制

4.1 儀器與試藥

高效液相色譜儀（美國Waters 公司）；綠原酸（批號(hào)：110753-200501）、人參皂苷Rg1（批號(hào)：110703-200016）、黃芪甲苷（批號(hào)：110781-200109）、當(dāng)歸對照藥材（批號(hào)：120927-200512）均購自原中國藥品生物制品檢定所；參麥益氣合劑（批號(hào)：030913、040621）由我院制劑室提供。

4.2 質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)

4.2.1 性狀 本品為淺棕色液體；氣微，味微苦。

4.2.2 鑒別

4.2.2.1 人參的鑒別 取本品30 mL，用三氯甲烷振搖提取2 次，每次30 mL，棄去三氯甲烷液，水溶液用正丁醇振搖提取3 次，每次30 mL，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2次，每次80 mL，取正丁醇液蒸干，殘留物加甲醇1 mL 使溶解，作為供試品溶液。另取人參皂苷Rg1對照品，加甲醇制成1 mg/mL 的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010 年版一部附錄ⅥB）試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 μL，點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15∶40∶22∶10）10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。分別置于日光和紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)或熒光斑點(diǎn)。

4.2.2.2 當(dāng)歸的鑒別 取本品30 mL，蒸干，殘留物加無水乙醇1 mL 使溶解，作為供試品溶液。另取當(dāng)歸對照藥材1 g，加石油醚（60 ～90℃）20 mL，超聲處理15 min，濾過蒸干，殘留物加無水乙醇1 mL 使溶解，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010 年版一部附錄ⅥB）試驗(yàn)，吸取上述2 種溶液各5 μL，點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以正己烷-乙酸乙酯（9∶1）為展開劑，展開，取出，晾干，置紫外光燈（365 nm）下檢視。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

4.2.2.3 黃芪的鑒別 取本品30 mL，蒸干，殘留物加2%氫氧化鉀甲醇溶液50 mL 使溶解，置水浴上加熱回流1 h，蒸干，殘留物加水30 mL 使溶解，移至分液漏斗中，用三氯甲烷-正丁醇（2∶1）50 mL 振搖提取，分取三氯甲烷-正丁醇層，用1%磷酸二氫鉀溶液50 mL 洗滌，棄去磷酸二氫鉀溶液，提取液蒸干，殘留物加甲醇1 mL 使溶解，作為供試品溶液。另取黃芪甲苷對照品，加甲醇制成0.6 mg/mL的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB）試驗(yàn)，分別吸取上述溶液10 μL 和5 μL，點(diǎn)于同一硅膠G 薄層板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（10∶20∶11∶5）10℃以下放置的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在110℃加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。

4.3 檢查

本品應(yīng)符合《中國藥典》2010 年版一部附錄ⅠJ 合劑項(xiàng)下有關(guān)規(guī)定。

4.4 含量測定

4.4.1 色譜條件 色譜柱為Thersil-Keystone C18（1 500 mm×4.6 mm）；流動(dòng)相為乙腈-0.4%磷酸溶液（10∶90）；流量為1 mL/min；檢測波長為327 nm。理論板數(shù)按綠原酸峰計(jì)算應(yīng)不低于20 000。

4.4.2 對照品溶液的制備 取綠原酸對照品適量，精密稱定，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成40 μL/mL 的溶液，即得。

4.4.3 供試品溶液的制備 精密稱取本品1 mL，置50 mL棕色量瓶中，加50%甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

4.4.4 綠原酸的含量測定 取10 個(gè)批號(hào)的參麥益氣合劑，按上述方法制得供試品溶液，分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μL 注入液相色譜儀，測定結(jié)果見表1。因每批樣品綠原酸含量均大于0.60 mg/mL，故擬定本品每毫升含綠原酸（C16H18O9）不得少于0.60 mg。

表1 參麥益氣合劑含量測定結(jié)果

4.5 功能與主治

益氣補(bǔ)血，溫腎復(fù)脈。用于冠心病、心律失常等。

4.6 用法與用量

口服。飯前半小時(shí)，每次1/2 瓶，每日2 次。

4.7 規(guī)格

每瓶裝。

4.8 貯藏

密封，置陰涼干燥處。

5 討論

5.1 方中人參、麥冬、五味子是“生麥散”的組成，益氣生津，斂陰止汗；桂枝、甘草溫通心陽，治心陽虛之心悸；當(dāng)歸、黃芪補(bǔ)氣生血；淫羊藿、延胡索增加冠脈流量；苦參、附子抗心律失常；金銀花抑制多種病原微生物。諸藥合用具有益氣補(bǔ)血，溫腎復(fù)脈之功。對冠心病、心律失常等有顯著療效。

5.2 選擇幾個(gè)具有代表性的成分通過薄層色譜法進(jìn)行定性鑒別，方法簡便易行，專屬性強(qiáng)。用高效液相色譜法對方中金銀花所含的綠原酸進(jìn)行含量測定，方法簡單準(zhǔn)確，可用于本品的定量控制。

5.3 參麥益氣合劑是我院資深醫(yī)師幾十年臨床經(jīng)驗(yàn)之總結(jié)，處方來源有很好的臨床基礎(chǔ)，開發(fā)成制劑并經(jīng)過注冊后，將成為我院心內(nèi)科常用藥品之一。

[1] 孫敬方.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方法學(xué)[M]. 北京：人民衛(wèi)生出版社，2001，359-364.

[2] 陳可冀，廖家楨，肖鎮(zhèn)祥.心腦血管疾病研究[M].上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社，1988，318-319.