藏藥材冬葵果的質量標準研究

翟隨民 謝平 白央 次德吉

西藏自治區食品藥品檢驗所，西藏 拉薩 850000

藏藥材冬葵果的質量標準研究

翟隨民 謝平 白央 次德吉

西藏自治區食品藥品檢驗所，西藏 拉薩 850000

目的:對具有清熱利尿、消腫效果的藏藥材冬葵果(藏語名稱:瑪寧江巴)進行質量標準研究。方法:采用基源考證、藥材顯微鑒別和薄層色譜鑒別方法。結果:冬葵果呈扁球狀盤形，宿萼鐘狀，黃綠色或黃棕色，有的微帶紫色，種子腎形，棕黃色或黑褐色，氣微，昧澀。宿萼表面觀下表皮星狀，壁稍厚;腺毛頭部橢圓形。上表皮單細胞非腺毛細長，彎曲或平直，壁薄或稍厚。上下表皮氣孔均為不等式。葉肉薄壁細胞含草酸鈣簇晶，棱角較尖。外果皮橫切面為一層長方形表皮細胞，壁稍厚，外被角質層。中果皮由類圓形薄壁細胞和一層含草酸鈣棱晶的細胞組成，薄壁組織中有大型黏液細胞散在，含晶細胞類圓形，壁厚且木化。中果皮與內果皮間呈環狀排列。粉末為灰褐色。外果皮為長方形，外被角質層，中果皮、內果皮為類圓形。花粉粒淡黃色，單個或數個聚合在一起。單個花粉粒頂面觀呈網球形，側面觀呈盔形、橢圓形，外壁具刺狀突起，萌發孔及孔溝均不明顯。建立冬葵果薄層色譜鑒別方法。結論:所確定的鑒別方法可作為冬葵果的鑒別依據。

冬葵果;顯微鑒別;薄層鑒別

冬葵果(藏語名稱:瑪寧江巴)為錦葵科植物中華錦葵Malva veticillata L．var．chinensis(Miller)S．Y．HU或圓葉錦葵Malva rotundifolia L．的干燥成熟果實。夏、秋二季果實成熟時采收，除去雜質，陰干。冬葵果主要化學成分為:蘋果酸等［1－4］。該藥材是藏藥制劑中常用藥材，具有清熱利尿、消腫的效果。圓葉錦葵藥材生于海拔3200～4000米的公路邊、山坡草地、村寨旁常見;西藏區內主要產于札達縣、江孜縣、仁布縣、拉薩市、南木林縣等地，同時亦分布于我國南北各地;亞洲至歐洲亦有分布。中華錦葵西藏區內主要產于普蘭縣、申扎縣、札達縣、莎迦縣、林周縣、南木林縣、聶拉木縣、拉薩市、波密縣、林芝縣、米林縣等地。始載于《四部醫典》中［3］。《字妥本草》云:“本品生于田地中，葉蔥郁，葉柄多數，整株約有一肘長，果實呈輪狀。”《晶珠本草》云:“江巴分為三種:破江、莫江、瑪寧江巴。本品即為后者，生于地勢較低的地方，葉形與其他江巴相似;花粉色，向陽旋轉;果實亦與其他江巴相似，呈環形密排。”《甘露本草明鏡》云:“為一年生的藥用植物，根如圓竹，淺黃色，細而長被有胡須狀的稀疏白毛;莖呈淺綠色，細而直立，常有4根左右無分枝的枝條共生于主干上，長短因產地不同而各異;葉深綠色，葉片厚，圓形，葉背被有稀疏的白毛，葉緣處具五個淺裂，葉柄長，單獨互生;花粉紅色，花體小，具五瓣，于葉柄基部生出;果實淺綠色，呈環形密排，邊緣有薄膜包裹。”藏醫多以破江和瑪寧江巴入藥，而很少以莫江人藥。據查，瑪寧江巴為錦葵科植物冬葵。目前，未見該藥材鑒別的相關報道，因此，建立該藥材的鑒別，通過研究為藥材的開發利用和臨床應用提供相關科學依據。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

冬葵果藥材來源于西藏自治區藏藥廠、西藏自治區雄巴拉曲藏藥廠、西藏自治區藏醫學院藏藥廠、西藏自治區藏醫學院藏藥研究所。以上四個單位提供的冬葵果藥材，經本所格桑索朗副主任藥師鑒定，均為冬葵果正品。

1.2 儀器與主要試劑

1.2.1 儀器系統顯微鏡(型號:BX51日本奧林巴斯);電子天平(型號:AE200瑞士梅特勒);電熱恒溫干燥箱(型號:GZX–DH.500–BS–Ⅱ上海躍進醫療器械廠);三用紫外分析儀(型號:ZF－2上海市安亭電子儀器廠);數控超聲波清洗器(型號:KQ－500D昆山市超聲波儀器廠)。

1.2.2 主要試劑乙醇(AR)、環己烷(AR)、乙酸乙酯(AR)、丙酮(AR)、羧甲基纖維素鈉(CR)、硅膠G(CR)、苯(AR)、石油醚(30－60℃)(AR)、石油醚(60－90℃)(AR)、冰乙酸(AR)、硫酸(AR)、香草醛等。試驗用水均為純化水，符合《分析實驗室用水規格和試驗方法》(GB/T6682－2008)及《中國藥典》2010年版二部純化水的要求。

2 性狀

冬葵果呈扁球狀盤形，直徑4～7mm。外被膜質宿萼，宿萼鐘狀，黃綠色或黃棕色，有的微帶紫色，先端5齒裂，裂片內卷，其外有條狀披針形的小苞片3片。果梗細短。果實由分果瓣10～12枚組成，在圓錐形中軸周圍排成1輪，分果類扁圓形，直徑1．4～2.5mm。表面黃白色或黃棕色，具隆起的環向細脈紋。種子腎形、棕黃色或黑褐色。氣微、昧澀。

3 顯微特征鑒別

3.1 冬葵果宿萼表面觀下表皮星狀毛由2～8個(多由4～8個)細胞組成，單個細胞長50～1140μm，直徑約75μm，壁稍厚;腺毛頭部橢圓形，5～7個細胞，直徑25～38μm。上表皮單細胞非腺毛細長，彎曲或平直，長約至1190μm，壁薄或稍厚。上下表皮氣孔均為不等式。葉肉薄壁細胞含草酸鈣簇晶，直徑6～25μm，棱角較尖。

3.2 冬葵果果皮橫切面外果皮為一層長方形表皮細胞，壁稍厚，外被角質層。中果皮由2～3層類圓形薄壁細胞和一層含草酸鈣棱晶的細胞組成。薄壁組織中有大型黏液細胞散在。含晶細胞類圓形，壁厚且木化。中果皮與內果皮間有10余束纖維束，呈環狀排列。內果皮為一列徑向延長的石細胞，呈柵欄狀，側壁及內壁甚厚，木化。見圖1，2。

圖1 冬葵果種子橫切面顯微照片

圖2 冬葵果種子橫切面顯微照片

3.3 冬葵果粉末為灰褐色。外果皮為長方形，外被角質層，中果皮、內果皮為類圓形。腺毛，星狀毛由2～6個(多由4～6個)細胞組成，單個細胞長50～1140μm，直徑約75μm，壁稍厚;無柄腺毛頭部橢圓形有5～7個細胞，花粉粒淡黃色，單個或數個聚合在一起。單個花粉粒頂面觀呈網球形，側面觀呈盔形、橢圓形，直徑約為60～110μm，外壁具刺狀突起，萌發孔及孔溝均不明顯，含草酸鈣方晶。見圖3。

圖3 冬葵果粉末顯微照片

4 薄層色譜鑒別

取冬葵果細粉1.0g，加石油醚(60－90℃)10ml，超聲處理30分鐘，過濾，濾液濃縮至1ml，作為供試品溶液;另取冬葵果對照藥材，同法制成對照藥材溶液。照薄層色譜法(《中國藥典》2010年版一部附錄VI B試驗)，吸取上述兩種溶液各10μl，點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以苯－乙酸乙酯(8.5:1.5)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以30%硫酸乙醇溶液，置105℃加熱至斑點清晰。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點。

5 小結

通過實驗表明，冬葵果宿萼表面觀下表皮星狀毛壁稍厚，腺毛頭部橢圓形，;上表皮單細胞非腺毛細長，彎曲或平直，壁薄或稍厚。上下表皮氣孔均為不等式。葉肉薄壁細胞含草酸鈣簇晶。外果皮橫切面為一層長方形表皮細胞，壁稍厚，外被角質層。中果皮由類圓形薄壁細胞和一層含草酸鈣棱晶的細胞組成，薄壁組織中有大型黏液細胞散在，含晶細胞類圓形，壁厚且木化。中果皮與內果皮間呈環狀排列。內果皮為徑向延長的石細胞，呈柵欄狀，側壁及內壁甚厚，木化。粉末為灰褐色，外果皮為長方形，外被角質層，中果皮、內果皮為類圓形。花粉粒淡黃色，單個或數個聚合在一起。單個花粉粒頂面觀呈網球形，側面觀呈盔形、橢圓形，外壁具刺狀突起，萌發孔及孔溝均不明顯，含草酸鈣方晶。薄層色譜斑點分離清晰，無拖尾現象，專屬性強、重現性好。見圖4。

圖4 冬葵果薄層色譜檢視圖

6 討論

薄層色譜點樣量的選擇在試驗過程中，分別選取1μl、2μl、5μl、10μl及20μl進行點樣量選篩，試驗表明，冬葵果藥材薄層點樣量為10μl時，能明顯檢出有效斑點。

薄層色譜展開劑的選擇試驗過程中，分別以石油醚(30－60℃)－乙酸乙酯(8∶1)、石油醚(30－60℃)－乙酸乙酯(9:1)、乙醚、苯－乙酸乙酯(8.5∶1.5)等為展開劑，其中，以苯－乙酸乙酯(8.5∶1.5)為展開劑，展開得到的薄層色譜圖分離度較好，其主斑點Rf值分別為:0.57、0.61、0.90。

薄層色譜顯色劑的選擇試驗過程中，以30%硫酸乙醇溶液為顯色劑，置105℃加熱至斑點清晰，靈敏度較好。

本項研究建立的鑒別方法簡便、重現性好，可用于冬葵果藥材的質量控制，能夠為該藥材的進一步的開發利用和臨床應用提供相關科學依據。

［1］ 國家藥典委員會編．中華人民共和國藥典(一部)［M］．北京:中國醫藥科技出版社，2010．

［2］ 王曙．常用藏藥理化鑒別與含量測定［M］．四川科學技術出版社，2002．

［3］ 國家中醫藥管理局《中華本草》編委會．中華本草藏藥卷［M］．上海科學技術出版社，2002．

［4］ 青海省藥品檢驗所、青海省藏醫藥研究所．中國藏藥(第一卷)［M］．上海科學技術出版社，1996．

［5］ 王寶琴．中成藥質量標準與標準物質研究［M］．中國醫藥科技出版社，1994．

［6］ 宇妥·元丹貢布．四部醫典［M］．陜西師范大學出版社．

［7］ 帝瑪爾·丹增彭措．晶珠本草［M］．西藏藥王山藏文木刻版．

R284.1

A

1007－8517(2012)15－0015－02

2012.05.26)