婦炎散的質量標準研究

李惠珍 蘇松柏

貴陽中醫學院第一附屬醫院，貴州 貴陽 550001

婦炎散的質量標準研究

李惠珍 蘇松柏

貴陽中醫學院第一附屬醫院，貴州 貴陽 550001

目的:建立婦炎散的質量標準。方法:采用薄層色譜法鑒別黃柏、姜黃、蒼術等藥材，采用高效液相色譜法測定婦炎散中鹽酸小檗堿的含量。結果:該方法薄層色譜斑點清晰，陰性對照無干擾，鹽酸小檗堿進樣量在0.1015～1.015μg范圍內呈良好線性關系(r=0.9999)，平均加樣回收率為97.97%。結論:所建標準可用于婦炎散的質量控制。

婦炎散;質量標準

盆腔炎是威脅女性健康的十大疾病之一，新藥物的開發研制和新治療途徑的探索將為該癥的治療提供更為有效的手段。由于目前對盆腔炎的發病機理仍缺乏足夠的了解，每年有成千上萬的患者因得不到及時徹底的治療而留下一系列后遺癥。中藥及中藥成分對盆腔炎的治療具有一定的優勢，通過標本兼治可達到抗菌消炎，提高機體免疫力及改善組織微循環的教果，具有廣闊的發展前景。“婦炎散”為大黃、當歸、丹參、黃柏等二十三味中藥組成的復方制劑;通過多年來的臨床應用、對制劑的留樣觀察和質量控制，結果表明我院自制的“婦炎散”療效明確，性質穩定，發揮了我院中醫中藥的特色，傳承了祖國醫學精髓，取得較好的社會效益和經濟效益。本文主要研究婦炎散的薄層色譜定性鑒別和含量測定研究，為臨床提供安全、有效、可控的藥品提供可靠保障。

1 儀器和試藥

1.1 儀器

Agilent 1100高效液相色譜儀，AB－265型電子天平(德國Mettler－Toledo Group公司);超聲清洗器(上海冠特超聲儀器有限公司，型號:SG1200H);恒溫電熱烘箱(上海躍進醫療器械廠，型號:GZX－DH－3035);電熱恒溫水浴鍋(上海科析試驗儀器廠，型號:DZKW－4)。

1.2 試藥

鹽酸小檗堿對照品(批號:110713－－200910)，黃柏對照藥材(120937－201007)，姜黃對照藥材(110823－201004)，蒼術對照藥材(0932－9803)，從中國藥品生物制品檢定所購進，乙腈、甲醇均為色譜純，其他試劑為分析純，水為重蒸餾水。黃柏、姜黃等藥材均購于貴州濟仁堂藥業有限公司。

2 方法與結果

2.1 薄層

2.1.1 黃柏的薄層鑒別

取三批婦炎散粉末各2g，加甲醇溶液20mL，于水浴鍋上回流半小時，濾過，濾液濃縮至2 mL，作為供試品溶液，另取黃柏對照藥材0.1g，加甲醇溶液10mL，于水浴鍋上回流半小時，濾過，濾液濃縮至2 mL，作為對照藥材溶液，同法制成黃柏的陰性對照溶液。吸取上述三種溶液各5 μL，分別點于同一以0.5%CMC－Na為黏合劑的硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯—丁酮—甲酸—水(10∶6∶1:1)為展開劑，展開，取出，晾干。在紫外燈(365 nm)下檢視。經三批樣品實驗，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，而且陰性對照無干擾。薄層色譜圖見圖1。

圖1 黃柏的薄層色譜圖

2.2 姜黃的薄層鑒別

取三批婦炎散粉末各4g，加無水乙醇100 mL，超聲15min，濾過，蒸干，加2 mL甲醇溶解，作為供試品溶液，另取姜黃對照藥材0.2g，加無水乙醇20mL，超聲15min，濾過，蒸干，加2 mL甲醇溶解，作為對照藥材溶液，同法制成姜黃的陰性對照溶液，吸取上述三種溶液各5μL，分別點于同一以0.5%CMC－Na為黏合劑的硅膠G薄層板上，以三氯甲烷—甲醇—甲酸(96∶4∶0.7)為展開劑，展開，取出，晾干。在紫外燈(365 nm)下檢視。經三批樣品實驗，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點，而且陰性對照無干擾。薄層色譜圖見圖2。

圖2 姜黃的薄層色譜圖

2.3 蒼術的薄層鑒別

取三批婦炎散粉末各4g，加入正己烷20 mL，超聲提取15 min，濾過，濾液蒸干，殘渣加1 mL甲醇溶解，作為樣品供試品溶液。另取蒼術對照藥材2 g，按樣品供試液的制備方法制備對照藥材溶液。同法制成蒼術的陰性對照溶液。照藥典附錄ⅥB薄層色譜法試驗。吸取上述三種溶液各10μL，分別點于同一以0.5%CMC－Na為黏合劑的硅膠G薄層板上，以石油醚－氯仿－乙酸乙酯(20∶6∶1)為展開劑，展開，取出，晾干。噴以5%對二甲基酚的10%硫酸乙醇試液，在105℃下烘至顯色。經三批樣品實驗，供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的斑點，而且陰性對照無干擾。薄層色譜圖見圖3。

圖3 黃柏的薄層色譜圖

2.4 梔子苷的含量測定

2.4.1 鹽酸小檗堿測定色譜條件色譜柱:Diamonsil C18(4.6 mm×200 mm，5μm);柱溫:30℃;流速1 mL/min;流動相:乙腈－0.1%磷酸溶液(50:50)(每100 mL加十二烷基磺酸鈉0.1g);檢測波長為265 nm;進樣量:5μL。理論塔板數按鹽酸小檗堿計算應不低于4000。對照品、樣品、陰性色譜圖見圖4。

圖4 婦炎散HPLC圖

2.4.2 對照品溶液的制備及線性關系考察

精密稱取干燥至恒重的鹽酸小檗堿對照品適量，用甲醇配制成濃度分別為203μg/m l的對照品溶液。將對照品溶液液制成一系列不同濃度的對照品溶液，按上述兩色譜條件進樣分析，以峰面積A對進樣量C(mg)進行回歸分析，得梔子苷回歸方程:A=2989.1C，r=0.9999。結果表明，梔子苷在0.1015－1.015μg范圍內線性關系良好。

2.4.3 供試品及陰性對照溶液的制備

精密稱取婦炎散劑2 g，置于100 mL容量瓶中，加流動相80 mL，超聲40分鐘，放冷，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液用0.45μm微孔濾膜濾過，作為供試品供鹽酸小檗堿含量測定;精密稱取缺黃柏的婦炎散劑2 g，按供試品的制備方法制備，作為陰性對照溶液。

2.4.4 精密度的測定

精密吸取濃度0.1015 mg·mL－1的鹽酸小檗堿對照品溶液10μL，按上述兩色譜條件重復進樣6次，測得其峰面積，鹽酸小檗堿峰面積RSD值為0.09%，結果表明儀器精密度良好。

2.4.5 重復性的考察

取6份婦炎散，每份精密稱取4g，按2.3供試品的制備方法，平行制備六份，按上述鹽酸小檗堿的色譜條件測定其峰面積，鹽酸小檗堿的含量為0.26%g·g－1，RSD為0.82%，結果表明重復性良好。

2.4.6 穩定性的考察

精密吸取供試品溶液5μL在0、2、4、8、12h進樣，測得其峰面積，鹽酸小檗堿峰面積RSD值為0.41%，結果表明供試品在12h內穩定性良好。

2.4.7 加樣回收率測定

取已知含量婦炎散6份，精密稱取1 g，置于100 mL容量瓶中，分別添加3.045 mg的鹽酸小檗堿對照品，加流動相80 mL，超聲40分鐘，放冷，用流動相稀釋至刻度，搖勻，濾過，取續濾液用0.45μm微孔濾膜濾過，測定鹽酸小檗堿含量，結果見表1。

表1 鹽酸小檗堿加樣回收率試驗結果

2.4.8 樣品的測定

精密稱取三批婦炎散，按供試品的制備方法制備，按上述的色譜條件，測定的含量，結果見表2。

表2 梔龍散中梔子苷含量

3 討論

本文制劑婦炎散主要用于治療盆腔炎的治療，由于處方中藥味較多，其中分別對黃檗、丹參、大黃、姜黃、白芷和澤蘭等藥材進行了薄層鑒別研究，但因干擾較大，未能列入本文的正文中，含量測定選用了黃檗中有效成分鹽酸小檗堿為指標成分，分離效果好，且能很好的反映本方的均一性和穩定性。

Study of Quality Standards of Fu Yan San

LI Hui－zhen SU Song－bai
The First Affiliated Hospital of GuiYang college of Traditional Chinese Medicine，Guiyang 550001，China

Objective:To establish the quality standard of Fu Yan San．Methods:The thin layer chromatography(TLC)was used to identify Cork，Turmeric，Atractylodes herbs，determine the content of of berberine hydrochloride in Fu Yan San By high performance liquid chromatography method(HPLC)．Results:the methods TLC spots is clear and the negative control without interference，Berberine hydrochloride injection volume in the range of0．1015～1.015μg was good linear relationship(r=0.9999)，average recovery was 97.97%．Conclusion:Established standards can be used for quality control of Fu Yan San．

Fu Yan San;Quality standard;Berberine Hydrochloride;Turmeric;Atractylodes

R284.1

A

1007－8517(2012)15－0050－03

貴陽中醫學院院內課題貴中醫科院內［2010］29號:醫院制劑“婦炎散”質量標準提升研究。

李惠珍，女，學士，副主任藥師，主要從事中藥質量控制與新藥研究。E－mail:442126064@qq．com。

2012.05.23)