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山藥不同炮制品對小腸收縮及對消化酶活性的影響

2012-11-20 03:18:50孔翠萍崔小兵
中國民族民間醫藥 2012年15期
關鍵詞:實驗

孔翠萍 柴 川 崔小兵

1.南京瑞爾醫藥有限公司,江蘇 南京 210000;2.南京中醫藥大學,江蘇 南京 210029

山藥不同炮制品對小腸收縮及對消化酶活性的影響

孔翠萍1柴 川2崔小兵2

1.南京瑞爾醫藥有限公司,江蘇 南京 210000;2.南京中醫藥大學,江蘇 南京 210029

目的:觀察山藥的不同炮制品對家兔小腸收縮及其對唾液淀粉酶活性的影響。方法:通過離體回腸法觀察山藥不同炮制品對小腸收縮作用的影響。以紫外分光光度法觀察山藥的不同炮制品其對消化酶活性的影響。結果:麩炒山藥對小腸收縮抑制作用最強,具有明顯的抑制小腸收縮作用。山藥不同炮制品對體外唾液淀粉酶活力的作用無顯著變化。說明麩炒山藥的健脾作用與唾液淀粉酶的活性無關。結論:麩炒山藥對小腸的收縮有明顯的抑制作用。

麩炒山藥,小腸收縮抑制,消化酶活性

山藥為薯蕷科多年生宿根蔓草植物山藥 (Dioscorea opposita Thunb.)的塊根,又名白苕、土薯、大薯、薯藥,具有補脾、益肺、固腎、益精的作用,原名薯蕷,首見于《神農本草經》,列為上品。《本草綱目》云:“山藥性溫味甘平無毒、健脾胃、益肺腎、止瀉痢,化痰涎,潤皮毛”。山藥的炮制方法有麩炒、清炒等,不同的炮制方法對山藥的活性有顯著影響。本文通過離體回腸及體外唾液淀粉酶的活性的測定,比較山藥生品、山藥麩炒品、山藥清炒品的作用機制,為山藥炮制提供了一個客觀的評價方法,同時為山藥焦香健脾理論提供實驗依據。

1 藥品與試劑

1.1 山藥的炮制[1]

依據中藥炮制的相關理論,本實驗將山藥 (Rhizoma Dioscoreae)加工為凈制山藥、炒山藥、麩炒山藥三個品種。

炒山藥 稱取適量凈制山藥片,置燒熱的平底鍋中,用文火加熱,炒至深黃色,有香氣,取出放涼。

麩炒山藥 稱取適量麥麩,置燒熱的平底鍋中,炒至冒煙,放入凈制山藥片,不斷翻炒,炒至深黃色,篩去麩皮,山藥和麩皮各冷涼備用。每100kg藥物,用麥麩10kg。

1.2 試劑

NaCl、 KCl、 NaH2PO4、 NaHCO3、 MgCl2、 CaCl2、NaOH、可溶性淀粉、Na2HPO、苯酸鉀、KI、KIO3、HCl都是AR級。

1.3 藥物水提液的制備

山藥水提液 凈制山藥,炒黃山藥,麩炒山藥各3g于燒杯中,加水 30ml,煮沸 0.5h,冷卻,過濾,留取上清液。

1.4 動物

大耳白家兔,清潔級,體重2.0-2.5 kg,2月齡,南京中醫藥大學實驗動物中心提供,生產許可證號:SCXK(滬)2007-0005。

1.5 儀器

多功能生理藥理記錄儀Power Lab,Power Lab/8s,澳大利亞AD儀器公司。水浴恒溫振蕩器,上海躍進醫療器械廠。754型紫外分光光度計,上海光譜儀器有限公司。

2 實驗方法

2.1 對小腸收縮作用的影響[2-3]

取禁食24h的家兔,以擊斃法處死,立即常規剖腹。取出回腸,去除附著的系膜或脂肪等組織。迅速浸入在4℃充氧 的 臺 氏 液[4](NaCl 8.00g,KCl 0.20g,NaH2PO40.05g,NaHCO31.00g,MgCl20.10g,CaCl20.20g,葡萄糖1.00g,定容至1L)溶液中。取回腸一段,懸掛于盛有臺氏液的麥氏浴槽中,一端系在L型通氣管上,加以固定,供給含有5%CO2的氧氣,另一端固定在壓力換能器上,基礎張力1g,浴槽溫度37.0℃,穩定1h。用Power lab進行描記。待自發性節律恢復后,描記基線,然后開始用藥,記錄張力均值,計算收縮百分率。

2.2 對唾液淀粉酶活性的影響[5]

取50ml刻度試管數只,a、b、c、d。一只作對照管,其余作測定管。各管內加0.04%可溶性淀粉溶液 (可溶性淀粉 0.2g,加蒸餾水 5ml,搖成混懸液,稱取無水Na2HPO413.3g,加蒸餾水250ml,煮沸后加入淀粉溶液,繼續煮沸1min,冷卻后加蒸餾水稀釋至500ml)5ml。將測定管置于37℃水浴內預溫5min。b及唾液淀粉酶溶液 (1∶1000)0.5ml混勻,c管加入待測樣品液0.1ml混勻,再置于37℃水浴15min后取出;于各管中加入0.01mol/L碘應用液(碘酸鉀3.56g及碘化鉀45g,置于1L容量瓶中,加蒸餾水約800ml,緩緩加入濃鹽酸9ml,搖勻,再加蒸餾水定容,使用時按1:10稀釋,盛于棕色瓶中保存)5ml,并用蒸餾水稀釋至50ml刻度;立即混勻,在570nm處進行比色測定,以PBS緩沖液 (NaH2PO4約8.0g,加生理鹽水至1L,用10%NaOH調PH值至8.0)校正光密度到零點,讀取各管光密度值。通過a管光密度值-b管光密度值計算酶的作用,通過-c管光密度值-d管光密度值比計算樣品溶液干預下酶的作用,比較兩次酶的作用效果,觀察樣品溶液對酶活性的響。

2.3 統計學方法 數據均以Excel統計,以±SD表示,進行t檢驗。

3 實驗結果

3.1 山藥的不同炮制品對小腸收縮作用的影響

參照2.1方法對山藥不同炮制品進行實驗,實驗結果見表1,柱狀分析圖見1。

表1 山藥不同炮制品水提液對離體小腸收縮作用的影響 (±SD,n=5)

表1 山藥不同炮制品水提液對離體小腸收縮作用的影響 (±SD,n=5)

注:*P<0.05。

組別 抑制收縮百分率 (%)1.1±0.9凈制山藥 1.47±0.29*炒黃山藥 1.54±0.24*麩炒山藥 1.8±1.1空白*

圖1 山藥不同炮制品水提液對離體小腸收縮作用的影響

實驗結果顯示:凈制山藥水提液、炒黃山藥水提液、麩炒山藥水提液對離體小腸有顯著抑制收縮作用 (*P<0.05)。麩炒后麥麩中健脾作用的物質可能轉移進入了山藥。

3.2 對消化酶活性的影響

參照2.2方法對山藥不同炮制品進行實驗,實驗結果見表2。

表2 不同山藥炮制品提取液對唾液淀粉酶活性的影響 ±SD,n=5)

表2 不同山藥炮制品提取液對唾液淀粉酶活性的影響 ±SD,n=5)

組別 酶活力抑制百分率 (%)15±10麩炒山藥 25±19炒黃山藥 31±21凈制山藥空白48±38

本實驗方案下,山藥不同炮制品對體外唾液淀粉酶活力的促進作用無顯著意義。說明麩炒山藥的健脾作用與體外唾液淀粉酶的活性無關。可能受實驗方法限制,是否有該方面功效仍待進一步實驗驗證。

4 結論

通過紫外分光測光度法觀察山藥麩炒前后對消化酶的活性的影響,用離體回腸法觀察其對小腸收縮作用的影響。結果提示山藥經麩炒后可增強其健脾作用,其健脾作用增強可能與調節小腸收縮作用有關;山藥不同炮制品對體外唾液淀粉酶活力的促進作用無顯著影響,說明麩炒山藥的健脾作用與體外唾液淀粉酶的活性無關。

[1]龔千鋒.中藥炮制學[M].北京:中國中醫藥出版社,2003:62.

[2]岳嶺,華永慶,崔小兵,李偉.炒焦麥麩健脾有效部位初探[J].時珍國醫國藥,2011,22(2):388-389.

[3]李偉,文紅梅,崔小兵,等.白術健脾有效成分研究[J].南京中醫藥大學學報,2006,22(6):366.

[4]徐叔云.藥理實驗方法學[M].第3版.北京:人民衛生出版社,2002:1834,1311.

[5]岳嶺,華永慶,崔小兵,李偉.不同炮制方法對麥麩健脾功效的影響[J].現代中藥研究與實踐,2010,24(3):41-44.

R965.2

A

1007-8517(2012)15-0062-02

南京中醫藥大學中藥學一級學科開放課題資助,項目編號:2011ZYX2-004;南京中醫藥大學基礎研究與重點培育專項基金資助,項目編號:10XJC07。

孔翠萍,女,主要從事藥物制劑研究。E-mail:kcp116@126.com。

崔小兵 (1975-),男,江蘇如皋人,博士,高級實驗師,主要從事新藥質量標準研究。E-mail:xiaobingcui@163.com。

2012.05.17)

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