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山東產(chǎn)部分品種大棗活性成分含量比較

2012-11-20 02:22:10張永清
中國醫(yī)藥指南 2012年7期
關鍵詞:黃酮

張 采 李 佳 張永清

(山東中醫(yī)藥大學,山東 濟南 250355)

大棗既是著名的水果,也是傳統(tǒng)中藥,藥用歷史已長達2000余年。具有補中益氣、養(yǎng)血安神等功效,用于治療中氣不足、脾胃虛弱、體倦乏力、食少便溏、血虛萎黃、婦女臟躁等病癥?,F(xiàn)代研究證明,大棗含有多糖、黃酮類、皂苷類、三萜類、生物堿類、環(huán)磷酸腺苷等活性物質(zhì),具有增強免疫、抗氧化、抗腫瘤、抗衰老等藥理作用。大棗原產(chǎn)我國,自古以來就被列為“五果”(桃、李、梅、杏、棗)之一。據(jù)統(tǒng)計,全球大棗種質(zhì)資源的98%以上、總產(chǎn)量的近100%都集中在我國。山東作為我國大棗主產(chǎn)區(qū)之一,品種眾多,著名的地方品種有金絲小棗、圓鈴棗、大馬牙、小馬牙、短果長紅、亞腰長紅等[1]。不同品種大棗的形狀、大小、顏色、甜度等具有明顯差異,但其藥用價值有無差異至今報道甚少。為了評價不同品種大棗的藥用質(zhì)量,我們分析比較了山東產(chǎn)8個品種的總黃酮、齊墩果酸、熊果酸等活性成分含量。

1 材料與方法

1.1 大棗樣品

2009年9~10月份,采摘各地不同品種大棗近成熟果實,曬干,去核粉碎前50℃烘干。各品種大棗及采集地點見表1。

表1 各品種大棗及采集地點

1.2 儀器與試劑

紫外-可見分光光度計;電子分析天平;超聲震蕩儀。蘆?。ㄙ徸陨綎|省藥品檢驗所);齊墩果酸(購自四川省維克奇科技有限公司);熊果酸(購自四川省維克奇科技有限公司)。95%乙醇;亞硝酸鈉;三氯化鋁;氫氧化鈉;甲醇;香草醛;冰醋酸;高氯酸;乙酸乙酯。均為分析純。

1.3 方法

采用分光光度法[2-4]。

1.3.1 總黃酮含量測定

1.3.1.1 標準曲線制作

精密稱取干燥至恒重的蘆丁對照品9.3mg,置25mL容量瓶中,加60%乙醇溶解,定容至刻度,搖勻,既得對照品溶液。精密吸取對照品溶液0mL、0.3mL、0.5mL、0.8mL、1.0mL、1.3mL、1.5mL、1.8mL、2.0mL,分別置10mL容量瓶中,加60%乙醇至5.0mL,精密加入5%亞硝酸鈉溶液0.3mL,搖勻,放置6min,再精密加入10%三氯化鋁溶液0.3mL,搖勻,放置6min,再加入4%氫氧化鈉溶液4.0mL,放置10min,最后加60%乙醇至刻度,搖勻,放置10min,以試劑空白做參比,在510nm處測吸光度值(A),以吸光度為縱坐標,蘆丁對照品溶液濃度(C)為橫坐標,繪制標準曲線,得出回歸方程:A=12.6C+0.0144(R=0.9997)。

1.3.1.2 樣品測定

準確稱取樣品1.0000g,置于100ml錐形瓶中,加入60%乙醇30mL,浸泡24h,超聲處理1h,過濾,洗滌,濾液置50ml容量瓶中,60%乙醇定容,得樣品提取液。按照標準曲線制備方法操作,測定吸光度,帶入下列公式,計算總黃酮的含量。

總黃酮含量(mg/g)=(A-0.0144)/12.6M

(M為樣品質(zhì)量,單位g)

1.3.2 齊墩果酸含量測定

1.3.2.1 標準曲線制作

精密稱取齊墩果酸對照品5mg,置于25mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,即得200μg/mL齊墩果酸對照品溶液。分別吸取上述溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL置于試管中,揮去溶劑后,準確加入5%香草醛冰醋酸溶液0.4mL,高氯酸1.6mL,混勻,置70℃恒溫水浴中加熱5min,冷卻至室溫,并轉(zhuǎn)移至10ml容量瓶中,加乙酸乙酯稀釋至刻度,搖勻,在560nm處測定吸光度(A)。以吸光度為縱坐標,齊墩果酸對照品溶液濃度(C)為橫坐標,繪制標準曲線,得出回歸方程:A=24.393C+0.0177(R=0.9991)。

1.3.2.2 樣品測定

精密稱取樣品粉末1g,置于三角瓶中,加入95%甲醇10mL,在常溫下超聲提取30min,過濾,濾渣再提取1次,合并2次濾液,以95%甲醇定容至25mL。取1mL濾液,用95%甲醇來稀釋到25mL,作供試品溶液,按照標準曲線制備方法操作,測定吸光度,帶入下列公式,計算齊墩果酸的含量。

齊墩果酸含量(mg/g)=(A-0.0177)(25×25)/24.393M(M為樣品質(zhì)量,單位:g)

1.3.3 熊果酸含量測定

1.3.3.1 標準曲線制作

精密稱取熊果酸對照品6mg,置于50ml容量瓶中,加無水乙醇溶解,并定容至50mL,配成0.12mg/mL對照品溶液。分別取對照品溶液0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL、1.2mL,置于試管中,水浴揮干溶劑,分別加5%香草醛-冰醋酸溶液0.5mL,高氯酸0.8mL,置于60℃水浴中12min,冰浴冷卻2min,加冰醋酸5ml,搖勻,在顯色5~60min內(nèi)于548nm處測定吸光度,以熊果酸毫克數(shù)(N)為橫坐標,吸光度(A)為縱坐標,繪制標準曲線,得出回歸方程:A=0.8723N+0.0282(R=0.99965)。

1.3.3.2 樣品測定

精密稱取樣品粉末1g,置于三角瓶中,加入95%甲醇10mL,在常溫下超聲提取30min,過濾,濾渣再提取1次,合并2次濾液,用95%甲醇定容至25mL。取1mL濾液,用95%甲醇來稀釋到25mL,作供試品溶液,按照標準曲線制備方法操作,測定吸光度,帶入下列公式,計算熊果酸的含量。

熊果酸含量(mg/g)=(A-0.0282)×25/M

(M為樣品質(zhì)量,單位:g)

2 結(jié)果與分析

經(jīng)測定,山東產(chǎn)部分品種大棗中的總黃酮、齊墩果酸與熊果酸含量如表2所示。

表2 山東產(chǎn)部分品種大棗中的活性成分含量(mg/g)

表2結(jié)果顯示,不同品種大棗中的總黃酮、齊墩果酸及熊果酸含量差異明顯??傸S酮含量以躺棗含量最高,達1.469mg/g,最低者是仲秋紅,為0.373mg/g,最高者是最低者的3.94倍;齊墩果酸含量以金絲新四最高,達10.754mg/g,最低者是磨盤棗,為6.883mg/g,最高者是最低者的1.56倍;熊果酸含量以磨盤棗最高,達14.409mg/g,最低者是長棗,為7.081mg/g,最高者是最低者的2.03倍;三類活性成分總量以冬棗最高,達23.947mg/g,最低者是長棗,為17.671mg/g,最高者是最低者的1.36倍。

3 討論與小結(jié)

大棗所以能夠藥用,是因為其中含有能夠治療疾病的活性成分。現(xiàn)代研究表明,黃酮類化合物可抗菌、消炎、抗突變、降壓、清熱解毒、鎮(zhèn)靜、利尿,在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方面也有顯著效果;齊墩果酸、熊果酸屬于三萜酸類,具有抑菌、保肝、降脂、升白細胞、增強肌體免疫等重要生理功能[6-9]。因此,大棗中總黃酮、齊墩果酸、熊果酸的含量高低,對其臨床治療效果會有顯著影響,可作為大棗藥材質(zhì)量控制的指標。本試驗結(jié)果表明,不同品種大棗總黃酮、齊墩果酸、熊果酸含量差異顯著,說明其藥材質(zhì)量明顯不同。以現(xiàn)有試驗結(jié)果進行判斷,在山東產(chǎn)8個品種大棗中,以冬棗、圓棗的藥用價值較高。因此,藥用大棗的品種問題應予以重視,但目前該領域的研究工作甚少,必須予以加強。

[1]郭裕新,單公華.中國棗[M].上海:上海科學技術(shù)出版社,2010:17.

[2]宋元清,王艷平,毛遠菁.分光光度法測定蘆筍中總黃酮的含量[J].化學分析計量,2005,14(4):52-53.

[3]王自軍,王國衛(wèi),齊譽.白芥子中總黃酮的微波提取與含量測定[J].時珍國醫(yī)國藥,2005,16(6):512-513.

[4]蔣紅芝.乙醇提取密蒙花總黃酮工藝研究[J].廣西輕工業(yè),2008(8):13-14.

[6]肖坤福,廖曉峰.黃酮類化合物研究進展及應用[J].食品研究與開發(fā),2003,23(4):14-18.

[7]劉淑海,韓淑英.蕎麥種子總黃酮對糖尿病高脂血癥大鼠血脂、血糖及脂質(zhì)過氧化的影響[J].中成藥,2003,25(8):662-663.

[8]李潔,梁月琴,郝一彬.苦蕎麥黃酮降血脂作用的實驗研究[J].山西醫(yī)科大學學報,2004,35(6):570.

[9]汪得清,沈文梅,田亞平,等.總黃酮對羥自由基所致哺乳動物細胞損傷的防護作用[J].中國中藥雜志,1995,20(4):240-242.

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