雙參素膠囊抗大鼠心肌缺血再灌注損傷的機制

劉 兵 楊春梅 曲紹春 于曉風 睢大筼 (吉林大學藥學院藥理教研室，吉林 長春 3002)

雙參素膠囊是從五加科人參屬植物人參及西洋參莖葉中提取得的雙參葉皂苷有效部位。臨床前藥理學研究已經證實，該藥對小鼠的神經系統、呼吸系統及心血管系統均無明顯的影響，且本課題組前期研究表明，雙參素膠囊對大鼠心肌缺血再灌注損傷具有明顯保護作用〔1〕，本文進一步探討其保護大鼠心肌缺血再灌注損傷的作用機制。

1 材料與方法

1.1 動物及分組 60只Wistar大鼠，雌雄各半，體重220～250 g，購自吉林大學實驗動物中心，合格證號SCXK-(吉)2007-0003。將大鼠隨機分為假手術組、心肌缺血再灌注(I/R)組、陽性對照組(福辛普利20 mg/kg)及17.5、35.0、70.0 mg/kg雙參素膠囊組，每組10只大鼠。

1.2 藥品與試劑 雙參素膠囊原料粉(吉林省人參研究院天然藥物化學研究室，批號：20091015);陽性對照藥福辛普利片(上海施貴寶公司，批號：20101120)，兩者均以0.5%羧甲基纖維素鈉配制成所需濃度;6-酮-前列腺素F1α(PGIα)放及血栓素B2(TXB2)放免試劑盒購于中國人民解放軍總醫院東亞免疫技術研究所。

1.3 給藥、造模及檢測指標 各組大鼠均自由進食和飲水，各藥物組給予不同劑量藥物灌胃，1次/d，連續給藥7 d后開始造模及檢測指標。大鼠心肌I/R模型制作參照文獻〔2〕結扎左前降支冠狀動脈，30 min后松開結扎線對心臟進行再灌注，24 h之后腹腔麻醉，腹主動脈取血，檢測全血及血漿黏度、PGIα、TXB2。剖取大鼠心臟，在結扎點以下區域取缺血區心肌及非缺血區心肌各100 mg，用一次提取比色法測心肌FFA含量。

2 結果

2.1 雙參素膠囊對心肌I/R損傷大鼠全血及血漿黏度的影響與假手術組比較，I/R組大鼠全血低切、中切、高切及血漿黏度均明顯增加(P＜0.05或P＜0.01)。與I/R組比較，雙參素膠囊35、70 mg/kg組均能明顯降低全血低切、中切、高切及血漿黏度(P＜0.05或P＜0.01)，見表1。

表1 各組大鼠全血及血漿黏度( s，n=10，mPa/s)

表1 各組大鼠全血及血漿黏度( s，n=10，mPa/s)

與假手術組比較：1)P＜0.05，2)P＜0.01;與 I/R組比較：3)P＜0.05，4)P ＜0.01，下表同

血漿黏度組別 劑量(mg/kg)全血黏度－ 10.50±2.12 5.02±0.85 3.74±0.42 1.22±0.21 I/R組 － 14.83±2.982)6.19±1.641)4.57±0.811)1.75±0.472)陽性對照組 20 10.86±3.233) 5.04±1.023)3.89±0.513)1.37±0.543)雙參素膠囊17.5 13.56±4.18 5.78±1.14 4.19±0.87 1.65±0.63 35.012.01±2.533)5.36±1.52 3.87±0.553)1.35±0.263)70.011.22±2.823)5.10±0.873)3.83±0.423)1.30±0.194)120/s假手術組10/s 40/s 120/s

2.2 雙參素膠囊對心肌缺血再灌注損傷大鼠血漿前列環素及TXA2水平的影響 與假手術組相比，I/R組大鼠血漿TXA2水平明顯升高，前列環素水平及前列環素/TXA2比值明顯降低(P＜0.05或 P＜0.01)。與 I/R組比較，雙參素膠囊 35、70 mg/kg組均可明顯降低心肌I/R損傷大鼠血漿TXA2水平，增加血漿前列環素水平及前列環素/TXA2比值(P＜0.05或P ＜0.01)，見表2。

2.3 雙參素膠囊對心肌I/R損傷大鼠心肌FFA含量的影響與假手術組相比，I/R組大鼠心肌梗死區及非梗死區FFA水平均明顯增加(P＜0.05或P＜0.01)。與I/R組比較，雙參素膠囊35、70 mg/kg組均可明顯降低心肌I/R損傷大鼠梗死區及非梗死區FFA水平(P＜0.05或P＜0.01)，見表3。

表2 各組大鼠血漿前列環素及TXA2水平(s，n=10，pg/ml)

表2 各組大鼠血漿前列環素及TXA2水平(s，n=10，pg/ml)

組別 劑量(mg/kg)前列環素 TXA2前列環素/TXA2－ 481.23±57.30 134.98±32.03 3.57±0.52 I/R組 － 413.87±42.461)214.52±55.652)1.93±0.682)陽性對照組 20 480.37±58.563)159.28±41.333)3.08±0.684)雙參素膠囊 17.5 437.71±67.92 198.37±48.09 2.21±0.79 35.0 466.21±50.763)160.76±38.213)2.78±0.424)70.0 475.42±62.123)153.16±36.473)3.10±0.744)假手術組

表3 各組大鼠心肌FFA含量(s，n=10，μEq/L)

表3 各組大鼠心肌FFA含量(s，n=10，μEq/L)

－ 625.47±108.68 705.85±106.52再灌I/R組 － 989.35±219.722) 841.24±117.821)福辛普利組 20 730.48±130.524) 710.41±123.873)雙參素膠囊 17.5 856.37±238.14 815.57±121.38 35.0 786.20±125.643) 725.28±120.143)70.0 737.52±124.174) 713.60±116.383)梗死區 非梗死區假手術組組別 劑量(mg/kg)

3 討論

多數情況下，缺血后再灌注可使組織器官功能得到恢復，損傷的結構得到修復，患者病情好轉康復;但有時缺血后再灌注不僅不能使組織、器官功能恢復，反而加重組織、器官的功能障礙和結構損傷。心肌I/R的發生機制尚未徹底闡明。目前認為自由基的作用、細胞內鈣超載、血管內皮細胞功能異常、能量代謝異常及血流動力學異常等均與心肌I/R的發生密切相關。心肌缺血時，細胞便開始無氧代謝，提供能量減少，同時卻產生乳酸、FFA、脂酰CoA、肉毒堿CoA等大量有害代謝產物，本實驗結果表明，心肌I/R后，心肌細胞梗死區和非梗死區內FFA均明顯增加。高FFA血癥可增加心肌耗氧量而加重心肌缺血，擴大缺血或梗死范圍〔3〕。另外，體內I/R時，體內的氧自由基生成增加，同時清除障礙故在體內大量堆積，增多的氧自由基可以導致抑制前列腺素合成酶、激活血小板環化酶，生成大量TXA2;本實驗結果證明I/R組大鼠血漿TXA2水平明顯升高，TXA2通過抑制腺苷酸環化酶，使血小板和血管平滑肌細胞內cAMP減少，從而促進血小板聚集和局部血管收縮，加重內皮損傷。因此TXA2與前列環素的平衡失調是心肌缺血或心肌壞死的主要原因〔4〕。本文結果提示可能通過糾正前列環素與TXA2之間失衡失調發揮抗心肌I/R損傷作用。

心肌I/R損傷時，膜磷脂大量降解，產生前列環素、TXA2、白三烯等炎癥介質，引起毛細血管通透性增加，導致紅細胞壓積明顯增高，血液黏度升高。由于血液濃縮，使得血漿蛋白濃度相對升高，尤其是纖維蛋白原濃度的升高能明顯增加血漿黏度〔5〕。雙參素膠囊能明顯降低全血黏度及血漿黏度，提示可能通過改善血流狀態防止血栓形成，對于降低冠心病患者發生心肌I/R損傷的危險性具有益處。

1 劉 兵，楊春梅，于曉風，等.雙參素膠囊對大鼠實驗性心肌I/R損傷的保護作用〔J〕. 武警醫學，2008;19(8)：713-6.

2 翟玉榮，于小鳳，曲紹春，等.苦碟子總黃酮對大鼠心肌缺血/再灌注損傷的保護作用〔J〕.中國藥理學通報，2010;26(2)：276-7.

3 王 宏，曲紹春，于曉風，等.血栓心脈寧片對急性血瘀I/R大鼠血小板功能及血液流變學的影響〔J〕.中國老年學雜志，2010;30(22)：3335-7.

4 王絢卉，于曉風，曲紹春，等.洋參二醇皂苷注射液對大鼠急性心肌梗死的影響及其機制研究〔J〕.中國中藥雜志，2009;34(24)：3281-5.

5 曲紹春，睢 誠，于曉風，等.人參Rb組皂苷對大鼠實驗性心肌I/R損傷的保護作用〔J〕.吉林大學學報(醫學版)，2007;33(5)：849-52.