附子、瓜蔞合煎薄層指紋圖譜研究

趙海峰 張蓉娟 張 萌 鄭 杰 崔春利 陜西中醫學院（咸陽712046）

中藥十八反是一個爭議最多的理論課題，其中認為附子反瓜蔞，兩藥合用一直視為配伍禁忌，直至現行的中國藥典也這樣記載。但是附子、瓜蔞合用產生相互作用的機制并不清楚。十八反藥對合煎其化學成分是否會發生變化，或是某些成分溶出度增加。趙海峰、張蓉娟等人證實了附子和川貝母、附子和浙貝母.附子和平貝母合煎其化學成分有明顯變化，且有新成分的出現［1］［2］［3］。那么附子和瓜蔞是否發生如此現象，我們通過應用薄層色譜法比較附子瓜蔞合煎與單煎化學成分的變化，為附子、瓜蔞相互作用的機制提供實驗依據。

1 實驗儀器與試藥 儀器試藥 UV－2550型紫外分析儀（上海京科實業公司生產），硅膠G（青島海洋化工集團干燥廠產品），制附子、瓜蔞購于西安飲片廠及西安、咸陽各藥店，試劑均為分析純。

2 供試品溶液制備 2.1 水煎液的制備 2.1.1 瓜蔞單煎液：稱取瓜蔞10g，浸泡30min，煎煮30min，倒出煎煮液，殘渣加水再煎20min，合并兩次煎煮液，煎煮液標記為A。

2.1.2 合煎液：稱取制附子、瓜蔞各10g，附子加入開水先煎30min，再加入浸泡30min的瓜蔞，合煎30mn，倒出合煎液，殘渣加水煎20min，合并煎煮液，煎煮液標記為B。

2.1.3 制附子單煎液：稱取制附子10g，加入開水煎煮60min，倒出煎煮液，殘渣加水再煎20min，合并兩次煎煮液，煎煮液標記為C。

2.2 樣品制備：將上述制備好的水煎液A、B、C分別依次用石油醚（30－60℃）、正丁醇萃取各2次，每次30mL，乙醚萃取液，正丁醇萃取液，分別水浴蒸干，各用甲醇2mL使溶解，得石油醚（30－60℃）樣品A1、B1、C1正丁醇樣品：A2、B2、C2。

3 薄層分析方法 3.1 石油醚（30－60℃）萃取液的薄層分析 照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部附錄ⅥB）試驗，吸取上述A1、B1、C1供試品溶液各10μL分別點于同一羧甲基纖維素納為粘合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇－乙酸乙酯－水（4︰1︰5，上層）為展開劑，展開，展距大于12cm，取出，晾干，在紫外光燈（365nm）下檢視。圖譜如下。

3.2 正丁醇萃取液的薄層分析 照薄層色譜法（《中國藥典》2010年版一部［2］附錄ⅥB）試驗，吸取上述A2、B2、C2供試品溶液各10μL分別點于同一羧甲基纖維素納為粘合劑的硅膠G薄層板上，以正丁醇－乙酸乙酯－水（4︰1︰5，上層）為展開劑，展開，展距大于15cm，取出，晾干，噴10%硫酸乙醇烘3min，在紫外光燈（365nm）下檢視。

4 結果 經過5個不同批次的藥材多次重復實驗，薄層色譜顯示合煎液色譜明顯較單煎液不同，有新的斑點出現，有些成分班點明顯變大。同批次藥材實驗重復性較好，不同批次藥材實驗重復性特別差。

5 討 論 經過薄層分析附子和瓜蔞合煎其化學成分發生變化，而且二藥合煎后有些成分溶出度增加。不同批次藥材進行實驗，重復性特別差，有些根本不能重復，這可能與藥材的產地和采收季節不同，存放條件不同，所含化學成分的不同引起。這一實驗結果給十八反的研究提示了一個新的研究方向：十八反毒性成分是否為新生化合物引起或有些毒性成分溶出度增加引起，有待進一步研究。

［1］趙海峰.附子及浙貝母合煎薄層指紋圖譜研究［J］.陜西中醫，2009，30（4）：480－481.

［2］趙海峰.附子及川貝母合煎薄層指紋圖譜研究［J］.陜西中醫，2010，31（9）：1228－1229.

［3］張蓉娟.附子及平貝母合煎薄層指紋圖譜研究［J］.現代中醫藥，2011，31（1）：64－65.