燒傷方對實驗性燙傷大鼠的實驗研究*

劉心亮 曾小粵 溫志鵬 熊益群 王重陽 徐紹鋼 穆桂萍

（廣州中醫藥大學附屬深圳醫院，廣東 深圳 518033）

燒傷作為一種常見的外傷，近年來其發生率逐漸上升［1-2］。燒傷治療中存在創面疼痛、進行性壞死、易感染、瘢痕愈合四大難題。近年來，中藥在治療燒傷的作用日益受到人們的重視，我們通過動物實驗探討燒傷方在燙傷創面愈合、水腫抑制、中樞調控鎮痛以及機體抗氧化防衛系統的作用。現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 SD大鼠60只，雌雄各半，體質量（200±20）g，由廣州中醫藥大學實驗動物中心提供。

1.2 藥物與試劑 燒傷方由黃柏、苦參、蒼術、防風、荊芥穗、雄黃、甘草等中藥水煎提純制成，含生藥量450 g/L，冷藏備用（深圳市中醫院制劑室制備）；京萬紅軟膏，由天津達仁堂制藥二廠生產。腦啡肽（ENK）試劑盒，由上海西唐生物科技有限公司提供；超氧化物歧化酶（SOD），由南京建成生物工程研究所提供。

1.3 主要儀器 日本島津UV-1700型紫外可見分光光度計；德國Hettich UNIVERSAL 32臺式高速冷凍離心機；美國BIOTEK ELX800型酶標儀；日本島津AUY120電子分析天平。

1.4 分組與造模 60只SD大鼠隨機分3組：模型組、燒傷方組、京萬紅組，每組20只。全部大鼠在實驗期間均正常飲水，普通飲食，于試驗前24 h背部脫毛約2 cm2。各組用80℃恒溫水通過一玻璃圓筒分別燙傷大鼠背部脫毛處皮膚，造成Ⅱ度燙傷模型。

1.5 給藥方法 燒傷方組每日給大鼠燙傷部位外敷燒傷方4次，每次約2 mL，連續7 d；京萬紅組每日給大鼠燙傷部位外敷京萬紅軟膏4次，連續7 d；模型組每日給大鼠燙傷部位外敷生理鹽水4次，連續7 d。

1.6 標本采集與檢測 末次給藥后隔日每組10只大鼠抽取全血、處死留取燙傷組織以及尾側亞核。（1）剩余的大鼠繼續觀察燙傷面成痂時間、創面愈合時間、創面修復情況。（2）留取燙傷部位皮膚8 mm×8 mm稱質量。（3）取大鼠尾側亞核，稱質量，置于1 mL 100℃生理鹽水中煮沸3 min，取出加入0.1 mol/L鹽酸0.5mL進行勻漿，將勻漿液收集在1.5mL離心管中，加入0.1 mol/L的氫氧化鈉0.5 mL，混勻，4℃ 12000 r/min離心30 min，取上清液測定ENK含量，檢測方法嚴格按操作說明書進行。（4）全血離心后用血漿檢測SOD，方法嚴格按操作說明書進行。

2 結 果

2.1 燒傷方對燙傷大鼠創面結痂、愈合時間的影響 見表1。燒傷方組及京萬紅組創面結痂時間及愈合時間均短于模型組（P＜0.05或0.01），且燒傷方組優于京萬紅組（P＜0.05）。

表1 各組大鼠創面結痂、愈合時間及皮膚質量比較（）

表1 各組大鼠創面結痂、愈合時間及皮膚質量比較（）

與模型組比較，*P＜0.05，**P＜0.01；與京萬紅組比較，△P＜0.05。下同。

組別 n 創面結痂時間（d） 創面愈合時間（d） 皮膚質量（mg）模型組 10 0.93±0.16 16.1±1.45 105.86±8.83燒傷方組 10 0.51±0.11**△ 11.5±1.22**△ 75.23±10.42**京萬紅組 10 0.72±0.14* 13.6±1.38* 84.75±9.35*

2.2 燒傷方對燙傷大鼠水腫的抑制作用 見表1。燒傷方組和京萬紅組抑制水腫作用明顯，皮膚質量輕于模型組（P＜0.01），并且燒傷方組優于京萬紅組。

2.3 燒傷方對燙傷大鼠側亞核組織中ENK含量的影響 見表2。燒傷方組和京萬組側亞核組織中ENK含量都明顯升高（P＜0.05或0.01）；燒傷方組和京萬組相比較，ENK含量未見明顯差異（P＞0.05）。

表2 各組大鼠尾側亞核組織ENK含量及血漿SOD含量比較（）

表2 各組大鼠尾側亞核組織ENK含量及血漿SOD含量比較（）

組別 n ENK（mg/g） SOD（U/mL）模型組 10 1.18±0.32 148.02±11.48燒傷方組 10 2.03±0.47** 170.54±11.76**京萬紅組 10 1.95±0.41* 168.58±11.48*

2.4 燒傷方對實驗性燙傷大鼠機體抗氧化防衛系統SOD的影響 見表2。燒傷方組和京萬組SOD含量較模型組都升高（P＜0.05或0.01）；燒傷方組和京萬組相比，SOD含量未見明顯差異（P＞0.05）。

3 討 論

燒傷，中醫學又稱為“火燒傷”、“燙火傷”、“燙火瘡”、“湯潑火”等。其病因是火（熱）毒，機體受熱力突然襲擊而致肌膚經絡損傷，引起氣滯血瘀，故可見肌膚紅腫熱痛；津液輸布失常則出現滲出腫脹；熱盛則出現肌膚腐爛潰瘍等癥。這與現代醫學對燒傷和局部微循環的改變，即毛細血管擴張、充血、紅細胞聚集、血流瘀滯的病理是一致的。根據燒傷的病理變化，我們應用具有清熱解毒、燥濕止痛功效的燒傷方［3］外敷燒燙傷創面，療效顯著。藥理研究證實，黃柏、苦參、雄黃、甘草有清熱解毒功效［4］；黃柏、苦參、防風、蒼術、雄黃有燥濕功效［4］；苦參、防風、荊芥穗具有抗炎、抑菌、鎮痛、鎮靜作用［4］；調和諸藥，尚可解雄黃之毒。

實驗結果顯示，燒傷方組在創面成痂時間、創面愈合時間均優于京萬紅組。我們認為燒傷方最有效的作用是減少燒傷創面液體滲出，其機理主要是使燒傷區及周圍或深層組織的毛細管收縮，通透性降低。燒傷方還使創面成痂快，且痂皮易干燥、韌性較好，而干燥的痂一般不易發生感染［5］。藥理研究證實，黃柏具有很廣的抗菌范圍，并使血小板不易破碎，外用還可促進皮下滲血的吸收［6］，黃柏、苦參、防風、雄黃可預防真菌感染［6］；蒼術含蘿卜素，維生素 B1等［6］；甘草有解毒作用，又可抗炎、抗過敏，對黏膜、潰瘍面還有保護作用［6］；荊芥穗可促進創面愈合［6］。上藥協同作用，能促進創面表皮增生、瘸下愈合及肉芽生長的功效，從而縮短療程。

ENK與-β內啡肽、強啡肽等合稱內源性阿片肽。ENK廣泛存在于神經系統的各級水平和部位，有學者用放射免疫分析法測定人腦各部位ENK含量，發現在尾核、蒼白球、中腦黑質和殼核中含量較高［7］。ENK涉及到許多生理活動的調節，如參與中樞神經系統痛覺信息調制和外周的傳入神經末梢疼痛調節作用［8］。內源性ENK主要作用于δ受體參與構成內源性痛覺調制系統，發揮鎮痛功能［9］，而受體主要位于中樞神經系統中和調控疼痛相關的解剖部位。因此，這些部位也是免疫反應性ENK水平最高的部位。中腦導水管周圍灰質是內源性痛覺調制系統的重要結構，最新研究發現［10］，大鼠延髓背角ENK可能通過抑制含鈣結合蛋白的傷害性感受神經元來調節燒傷部位疼痛信息的傳遞。大鼠腦室約200 ng的ENK即可產生明顯的鎮痛效應［11］。ENK-干擾素融合蛋白具有外周鎮痛作用，ENK可以通過外周阿片類受體發揮鎮痛作用。

SOD是體內催化歧化反應的一種抗氧化保護酶，對機體的氧化和抗氧化平衡起著重要的作用，此酶能清除超氧陰離子自由基（O2-）保護細胞免受損傷［12］。試驗結果表明，與模型組比較，燒傷方組SOD升高（P＜0.05），說明燒傷方具有明顯的抗氧化能力，使大鼠的細胞膜免受損傷，增強了清除和抑制氧自由基的能力。因此，燒傷方如能應用于臨床上由超氧陰離子自由基過多引起的各種類型的燒傷患者，將有很大的應用前景。

燒傷方由中藥組成，無副作用，成本較低，制備簡單，能促進燒燙傷創面愈合、抑制水腫、對中樞調控發揮鎮痛作用，能提高機體抗氧化防衛系統能力，值得臨床推廣。

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