乙型肝炎免疫清除期肝組織炎癥分級和纖維化分期與輕度血清甲胎蛋白升高的相關性研究

周清霞 劉 婷 吳澤倩 鄔喆斌 柯偉民*

(1 廣東省江門市新會區人民醫院，廣東 江門 529100；2 廣州市中山大學附屬第二醫院，廣東 廣州 510120；

3 中山大學附屬第三醫院，廣東 廣州 510630）

良性肝病包括急性肝炎，慢性肝炎和肝硬化甲胎蛋白（α-fetoprotein,AFP）的水平可能正?；蜉p度升高[1]，約有77%慢性乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）感染并發肝細胞癌的患者AFP水平＞300μg/L，常作為協助肝細胞癌的敏感標志[2]。在慢性乙型肝炎的自然病程中，從免疫耐受期進入免疫清除期后，在不同的個體對HBV的清除免疫壓力存在不同，肝組織可表現不同程度的炎性反應，長期反復的炎性反應的積累，造成不同的肝組織纖維化[3]。為此，本文試圖弄清慢性乙型肝炎的自然病程中，免疫清除期不同的肝組織炎癥分級和纖維化分期與血清甲胎蛋白之間的關系，進一步闡明血清AFP水平在診斷乙型肝炎相關肝細胞癌的臨床診斷價值。

1 材料與方法

1.1 患者來源

106例HBeAg陽性發慢性乙型肝炎來自中山大學附屬第三醫院感染病科2008年1月至2010年6月住院患者，其中，男性90例，女性16例。所有患者沒有使用過核苷類似物、干擾素和胸腺素等抗病毒藥物，排除抗HBV藥物使肝組織炎癥和纖維化的緩解對血清AFP水平的影響。在106例乙型肝炎免疫清除期的患者，他們的肝組織炎癥分級以及他們所處的肝組織纖維化分期見表1。

表1 106例乙型肝炎免疫清除期患者的肝組織炎癥分級以及他們所處的肝組織纖維化分期

1.2 乙、丙型肝炎病毒血清標志物和血清AFP水平的檢測

HBsAg，抗-HBs，HBeAg和抗-HBe，抗-HBc的診斷試劑盒來自蘇州新波生物技術有限公司。抗-HCV-IgG的診斷試劑盒來自北京現代高達生物技術有限責任公司，采用酶聯免疫測定（ELISA）進行檢測。AFP試劑由（Siemens Medical Solutions Diagnostics）公司提供，正常值＜20μg/L。所有血清的收集、儲存、檢測和結果的判斷按照試劑說明書進行。

1.3 肝組織病理檢查

肝組織病理標本的采集，用Esaote Au4型彩色多普勒機（美國產品）做引導，使用其配套的16G活檢槍進行肝活檢切割大約20mm長度肝組織。肝組織標本用Bouin’s液固定和石蠟包埋，分別用蘇木素-伊紅（HE）染色和Masson法網狀纖維染色。由中山大學附屬第三醫院病理科醫師根據Desmet VJ慢性肝炎的分類進行肝組織炎癥分級和纖維化分期[4,5]。

1.4 統計學處理

使用SPSS 11.0統計軟件，多組之間資料的兩兩比較采用ANOVA檢驗進行分析，P＜0.05認為有統計學意義。

2 結 果

2.1 乙型肝炎免疫清除期肝組織炎癥分級1、2、3和4級和肝纖維化分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期的血清AFP水平見表2。

表2 肝組織炎癥分級1、2、3和4級和肝纖維化分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期的血清AFP水平

2.2 乙型肝炎免疫清除期肝組織炎癥分級1、2、3和4級和肝纖維化分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期血清AFP水平兩兩比較的統計學分析結果見表3。

表3 乙型肝炎免疫清除期肝組織炎癥分級1、2、3和4級和肝纖維化分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期血清AFP水平兩兩比較的統計學分析

3 討 論

與成年人感染HBV后大多數出現自限性感染不同，嬰幼兒或兒童期感染HBV后，大多數感染者處于免疫耐受狀態[5]，免疫耐受期可持續20～35年；患者血清HBsAg和HBeAg均陽性，HBV高水平復制，反而ALT水平正常，肝組織幾乎沒有病理改變[6]。

當慢性乙型肝炎的自然病程進入免疫清除期后，在細胞毒性T細胞（Cytotoxic T cell，CTL）的免疫介導下，表達HBV抗原的肝細胞發生凋亡，表現為HBV DNA載量波動，ALT反復升高，肝組織出現炎癥或壞死。在此同時，肝星狀細胞（Hepatic stellate cell，HSC）被激活，導致肝內彌漫性的、過量的細胞外基質（Extra cellular matrix，ECM）沉積，發生肝纖維化[7]，形成HBeAg陽性慢性乙型肝炎，結果造成肝組織病理變化上，同一肝組織炎癥分級患者的不同個體之中，可有不同的肝組織纖維化分期。不同肝炎癥分級與不同肝纖維化分期的肝細胞再生、異生以及癌變傾向可能存在不同，產生不同水平的AFP。為此，弄清慢性乙型肝炎的自然病程中，免疫清除期不同肝組織炎癥分級和肝組織纖維化分期與血清AFP水平的關系，將有助于客觀評價AFP在監測慢性乙型肝炎免疫清除期的病情進展以及癌變傾向的作用。

在排除抗HBV藥物和重疊丙型肝炎病毒感染對肝組織炎癥分級和纖維化作用進而影響血清AFP水平的條件下，從表2可見，肝組織炎癥分級1、2、3和4級的血清AFP水平分別為（4.42±1.80）、（10.49±13.72）、（88.42±140.63）和（142.23±317.12）μg/L；肝組織纖維化分期Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ期的血清AFP水平分別為（11.31±18.07）、（7.93±5.24）、（72.91±133.31）和（149.46±296.39）μg/L，血清AFP水平隨著肝組織炎癥分級的增加和肝組織纖維化的加重水平呈逐漸升高的趨向，肝組織炎癥分級四級之間和肝組織纖維化分期四期之間兩兩比較存在差異，統計學分析的結果見表3。提示HBV慢性感染進入免疫清除期之后，由于肝組織炎癥壞死的長期積累，同時啟動肝纖維化向肝硬化發展，在肝細胞復發不斷的再生過程中，伴隨異型增生肝細胞出現，分泌輕度升高的AFP水平；可能與嚴重的炎性反應和早期肝硬化之后，HBX抗原與具有抑癌作用的P53基因結合，使p53蛋白出現變異，降低了對肝細胞異型增生抑制的結果。

[1]Zhou H,Wang H,Zhou D,et al.Hepatitis B virus-associated intrahepatic cholangiocarcinoma and hepatocellular carcinoma may hold common disease process for carcinogenesis[J].Eur J Cancer,2010,46(6):1056-1061.

[2]Cabibbo G,Craxì A.Epidemiology,risk factors and surveillance of hepatocellular carcinoma[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci,2010,14(3):352-355.

[3]Wei-Min Ke,Shi-Bin Xie,Li-Na Yu,et al.Decline of serum HBV DNA and no change apportioned by the same hepatic parenchyma cell volume from hepatic fibrosis stage 1 to stage 4 during the natural history of chronic hepatitis B[J].Intervirology,2008,51(2):235-240.

[4]Desmet VJ,Gerber M,Hoofnagle JH,et al.Classification of chronic hepatitis: dianosis,grading and staging[J].Hepatology,1994,19(6):1513-1520.

[5]Chen M,Sallberg M,Hughes J,et al.Immune tolerance split between hepatitis B virus precore and core proteins[J].J Virol,2005,79(5):3016-3027.

[6]Lok AS,McMahon BJ.Chronic hepatitis B[J].Hepatology,2007,45(5):507-539.

[7]Iimuro Y,Nishio T,Morimoto T,et al.Delivery if matrix metalloproteinase-1 attenuates established liver fibrosis in the rat[J].Gastroen terology,2003,124(4): 445-458.