復方泥鰍超微粉膠囊抗疲勞的動物性實驗研究

張家國，孫靜，潘洪民

（1.國家農產品現代物流工程技術研究中心，山東 濟南 250103；2.山東省農產品貯運保鮮技術重點實驗室，山東 濟南 250103）

疲勞是指人們從事體力或腦力活動,經過一定的時間和達到一定的程度后出現的活動能力下降,表現為疲倦、肌肉酸痛或全身無力的現象。疲勞可以分為急性疲勞和慢性疲勞。急性疲勞主要是由于頻繁而強烈的肌肉活動所引起的；慢性疲勞主要是長時間而反復的活動所引起的。而現代生活中大多數人出現的以及對人的身心危害最大的就是慢性疲勞[1]。

為消除體力疲勞，除了充分注意營養和休息外，發現疾病還應須及早治療，在藥物治療方面可適當運用維生素、氨基酸、激素等。但通過西藥解除疲勞畢竟不是好辦法，而且長期服用可能有副作用。中藥對于消除疲勞雖見效慢，但一般沒有副作用，效果較好[2]。

泥鰍（Misgurnus anguillicaudatus），又名鰍（《爾雅》）、鰍魚（《本草拾遺》），屬于鯉形目、鯉亞目、鰍科的小型魚類。該魚食性雜，抗病力強，生長快，是我國重要的名優經濟魚類，分布在我國除青藏高原外的各地溝渠、稻田、池塘、河流、湖泊及水庫等水域中。近年來，隨著我國養殖業的迅猛發展和人工飼養技術的不斷提高，泥鰍的產量逐年增長，但關于泥鰍的深加工和綜合利用探討甚少[3]。泥鰍的肉或全體均可入藥，也是人們常食的魚類，其體表的皮膚能夠分泌出豐富的黏液，具有重要的生理功能。目前，人們從泥鰍黏液中已經分離到多種生物活性物質，如糖蛋白[4]、凝集素[5]、抗菌肽[6]、不飽和多烯脂肪酸、牛磺酸和賴氨酸等必需氨基酸以及鋅硒等微量營養元素[7]等。泥鰍的食用常見方法主要是高溫烹調，造成其活性成分的喪失，如何在保持其活性成分的前提下，開發出食用方便、攜帶便捷的功能性食品是泥鰍加工領域的關鍵[8-10]。針對以上問題，本實驗研制了一種復方泥鰍超微粉膠囊，并對其抗疲勞功效進行了動物性實驗研究。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 泥鰍

大鱗副泥鰍（Paramisgurnus dabryanus（Sauvage））（臨沂水產養殖場）規格海尾10 g～15 g，無病無傷。泥鰍購入后水中暫養3 d，以使其吐凈消化系統的內容物，并去除泥鰍的腥味。活泥鰍先在-30℃以下預凍，完全凍結后，在一定的真空條件下（真空度26.66 Pa～0 Pa，溫度-45℃以下）凍干，從而達到低溫脫水的目的。

1.1.2 中草藥材

實驗用中草藥材均購自濟南建聯中藥店。

1.1.3 膠囊的組方

膠囊由凍干泥鰍、枸杞子、太子參、黃精、百合和桑椹子共6種原料組成。

1.1.4 膠囊的制備

超微粉碎：按一定的重量比稱取凍干泥鰍，把稱取的凍干泥鰍與經過干燥的其它藥材按配方混合，然后在BFM-6超微粉碎機內進行超微粉碎，粉碎粒度為200目以上。

高效混合：采用SYH-5型三維運動高效混合機(常州產)進行攪拌混合，攪拌的時間為3 min。

膠囊灌裝：加入制備膠囊劑型所需的各種常規輔料，采用NJP-200型自動膠囊灌裝機（浙江產）進行灌裝，制成膠囊劑。

滅菌：裝瓶封口后放置在微波爐中用微波滅菌5min于陰涼干燥處保存備用。

1.1.5 實驗動物

雄性昆明種小白鼠48只，體重18 g～22 g，由山東大學實驗動物研究所提供。

1.2 方法

1.2.1 溶液配制

分別稱取膠囊粉末0.75、1.50、3.00 g溶于100 mL蒸餾水中，依次配成濃度為 7.5×10-3、1.50×10-2、3.00×10-2g/mL的供試液備用。

1.2.2 分組與給藥方法

將小白鼠隨機分成4組各10只，分別為本品0.15、0.30、0.60 g/kg組和溶劑對照組（蒸餾水灌胃），各組經口灌胃1次/d，小鼠灌胃體積為0.2 mL/10 g體重。受試物給予時間30 d，然后分別進行抗疲勞能力測定。

1.2.3 小白鼠負重游泳實驗

末次給藥30 min后，將小鼠置游泳箱中，水深30 cm、水溫（25±0.5）℃，鼠尾根部負荷 5%體重的鉛皮。小鼠自游泳開始至死亡的時間為小鼠游泳時間。

2 結果與分析

2.1 膠囊主要成分測定

膠囊由山東省疾病預防控制中心監測，測定結果見表1～表3。

表1 膠囊主要功效成分的含量Table 1 The main efficacious composition indicators of the compound loach superfine powder capsules

從表1可以看出，實驗膠囊中含有皂苷、多糖和蛋白質3種活性成分，其含量分別達到3.18、5.68 mg/g和27.3%。

表2 膠囊有毒、有害物質的含量Table 2 The poisonous and harmful substances indicators of the compound loach superfine powder capsules mg/kg

從表2看出，實驗膠囊中有毒有害物質鉛、總砷及總汞的含量遠低于GB16740-1997《保健（功能）食品通用標準》的規定。

表3 實驗膠囊微生物學指標監測情況Table 3 The microbiological indicators of the compound loach superfine powder capsules

從表3看出，實驗膠囊微生物學指標符合GB 16740-1997《保健（功能）食品通用標準》要求，對人體是安全的。

2.2 實驗膠囊對小白鼠負重游泳時間的影響

實驗膠囊對小白鼠負重游泳的實驗結果見表4。

表4 實驗膠囊對小鼠游泳時間的影響()Table 4 The capsule on the influence of the time of swimming in small mice

表4 實驗膠囊對小鼠游泳時間的影響()Table 4 The capsule on the influence of the time of swimming in small mice

注：*為與溶劑對照組和0.15 g/kg組比較具有顯著性差異（P<0.05）。

從表4可以看出，小白鼠負重游泳時間隨著劑量的增加而延長，并且給藥量達到0.6 g/kg時，游泳時間達最大值113.79 min。方差檢驗表明，0.3 g/kg和0.6 g/kg兩組與低劑量組（0.15 g/kg）及溶劑對照組有顯著性差異。該實驗結果證實，復方泥鰍超微粉膠囊具有顯著的抗體力疲勞功能。

復方泥鰍超微粉膠囊采用凍干泥鰍、枸杞子、太子參等6味藥食兩用的原料精制而成，復方泥鰍超微粉膠囊中活性成分有皂苷、蛋白質和多糖等，其多糖的來源主要是泥鰍、枸杞和太子參[12]。據研究，從泥鰍黏液中分離提取的中性粗多糖，用凝膠過濾色譜柱在高效液相色譜儀上分離和測定，結果表明該多糖由1個高聚糖（MAP，19.1%）和 1個寡糖（MAO，80.9%）組成。通過化學模擬體系研究MAP對活性氧自由基的清除作用，結果表明，MAP對活性氧自由基O2-、-OH和H2O2有清除作用；對DNA鏈起到保護作用[13]。周軍等[14]連續給小鼠灌胃不同劑量的MAP 14 d后進行密閉缺氧試驗、亞硝酸鈉中毒試驗和急性腦缺血性缺氧試驗，表明可明顯延長小鼠在不同缺氧條件下的存活時間。MAP可增高小鼠血紅蛋白含量，抑制組織脂質過氧化反應以及增加血漿中超氧化物歧化酶活性。增強血液的載氧能力可能是其耐氧的原因之一，其抗氧化機制可能與其清除活性氧的作用有關。李金華等[13]研究表明泥鰍粉有提高小鼠耐缺氧能力的作用。吳亞君[15]對小鼠的抗疲勞實驗結果表明，MAP可顯著延長小鼠的游泳時間和爬桿時間，說明MAP有抗疲勞作用。枸杞為茄科植物枸杞（Lycium barbarum L.）的成熟果實，具有滋補肝腎,益精明目之功效,含有枸杞多糖、多種氨基酸、微量元素、維生素、牛磺酸、生物堿、揮發油等化學成分。一般認為，其主要有效成分為枸杞多糖[16-17]。龔濤等[18]證實，枸杞粗多糖能較顯著提高小鼠血清、肝臟及腦組織中SOD活性,降低MDA含量；極顯著提高正常小鼠常壓耐缺氧能力和游泳抗疲勞能力。太子參所含有的水提物還具有抗氧化活性的作用，實驗證實，太子參提取液具有穩定的非酶類除超氧自由基的“SOD樣作用”物質，提示太子參具有一定的體外SOD樣的藥理活性[19]。由于實驗膠囊中含有枸杞子和太子參兩種原料，因此，該膠囊同樣具有一定的抗缺氧之功效。

3 結論

通過以上實驗和分析，充分證明復方泥鰍超微粉膠囊具有顯著的抗疲勞之功效，是有效消除體力疲勞的功能食品。

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