固本止哮方防治支氣管哮喘的實驗研究

謝曉書， 張士卿

支氣管哮喘是一種常見的、多發的慢性呼吸系統疾病，患病率有逐年上升趨勢，嚴重威脅人類身體健康。根據全球哮喘防治創議統計數字，全世界有1.5億人患有哮喘，每年死于哮喘的人有18萬之多。國外人群哮喘患病率為5%～10%，國內約為1%，兒童可達3%左右［1］。因此，哮喘的防治已引起全世界的重視，世界衛生組織已將其列入全球防治戰略。發揮中醫未病先防，整體觀念，辨證論治，發時治標，防時治本，多環節，多角度，多靶點調治等優勢，是支氣管哮喘防治的研究方向之一。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 選取SPF級SD幼齡大鼠100只，體質量（70±10）g，雌雄各半，由甘肅中醫學院實驗動物中心提供（合格證號：SCXK（甘）2004－0006）。整個實驗過程在SPF級動物實驗室（動物實驗設施使用證號：SCXK（甘）2004－0006－0000916）中實施。

1.2 實驗藥品 卵白蛋白粉劑（上海升正生物技術有限公司，批號：100108）；固本咳喘膠囊（合肥今越制藥有限公司，批號：090730）；磷酸組胺（上海中秦化學試劑有限公司，批號：100410）；氯化乙酰膽堿（蘭州愛華化工有限責任公司，批號：081020）；固本止哮方（甘肅中醫學院藥劑教研室）。

1.3 實驗動物篩選 100只大鼠放入霧化裝置箱內，待其安靜后啟動超聲霧化儀，向箱內噴入2%乙酰膽堿和1%磷酸組胺1∶1混合液，噴霧時間為30s，觀察并記錄大鼠出現二級哮喘時間（參照哮喘癥狀評分［2］，1級為呼吸困難，2級為呼吸困難＋咳嗽，3級為呼吸困難＋咳嗽＋跌倒，4級為死亡），即引喘潛伏期，超過60s為不敏感棄之，篩選出60只，雌雄各半備用。

1.4 分組 將60只大鼠按隨機數字法分為5組（空白組、模型組、固本止哮方高劑量組、固本止哮方低劑量組、固本咳喘膠囊對照組），每組12只。

1.5 模型制備 除空白組外，各組制備哮喘模型。第1、6、11天對實驗大鼠行腹腔注射10%卵白蛋白生理鹽水1mL致敏（含卵白蛋白100mg，氫氧化鋁干粉100mg）；第14天，將大鼠置于霧化箱中，以3%卵白蛋白生理鹽水行超聲霧化吸入誘發哮喘發作，每日激發1次，每次30min，每次激發至3級哮喘狀態，即大鼠出現咳嗽、呼吸急促、腹肌緊張、點頭運動等哮喘癥狀。連續激發7d。

1.6 干預方法 空白組、模型組分別連續生理鹽水灌胃，固本咳喘膠囊對照組按0.13g／kg劑量灌胃，固本止哮方高、低劑量組分別按生藥20、5g／kg劑量灌胃，各組連續灌藥28d。各組于灌藥7d后制備哮喘模型，空白組腹腔注射相同劑量的生理鹽水，給予相同劑量的生理鹽水霧化。

1.7 觀察指標 對各大鼠引喘潛伏期的影響，大鼠首次與1%卵白蛋白氣霧接觸哮喘等級變化情況及激發后各組誘發哮喘（3級）發生率。

1.8 統計學方法 所有數據采用SPSS 17.0統計軟件包作統計分析，計量資料采用珚±s表示，組間比較采用方差分析，等級資料采用Ridit分析，計數資料采用 Mann－Whitney U 檢驗。P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 對各組大鼠引喘潛伏期的影響 見表1。

表1 各組大鼠引喘潛伏期比較（珚±s，n＝12，s）

表1 各組大鼠引喘潛伏期比較（珚±s，n＝12，s）

注：與模型組比較，aP＜0.05。

組別 第1天 第14天40.69±0.36 －模型組 40.50±3.60 44.11±1.33固本止哮方高劑量組 40.90±1.78 87.33±1.64a固本止哮方低劑量組 41.10±2.38 80.51±1.01a固本咳喘膠囊對照組 40.80±3.04 81.99±0.64a F 0.98 5.86 P＞0.05 ＜空白組0.05

表1結果表明，在第1天篩選過程中各組大鼠的引喘潛伏期差異無統計學意義（P＞0.05）；用藥灌胃預防14d后，除空白組未做引喘潛伏期測定外，余各組大鼠引喘潛伏期均延長，組間比較差異有統計學意義（P＜0.05），固本止哮方高、低劑量組、固本咳喘膠囊對照組引喘潛伏期均長于模型組，差異有統計學意義（P＜0.05）。固本止哮方高、低劑量組、固本咳喘膠囊對照組3組兩兩比較差異無統計學意義（P＞0.05）。

2.2 大鼠首次與1%卵白蛋白氣霧接觸哮喘等級變化情況 見表2。

表2 各組大鼠哮喘等級變化情況（n）

表2結果表明，空白組未與1%卵白蛋白氣霧接觸，未發生哮喘，余4組均發生哮喘；與模型組比較，固本止哮方高、低劑量組、固本咳喘膠囊對照組哮喘等級明顯有減輕趨勢，差異有統計學意義（P＜0.05）；與固本咳喘膠囊對照組比較，固本止哮方高、低劑量組哮喘等級有減輕趨勢，差異無統計學意義（P＞0.05）。固本止哮方高、低劑量組比較，差異無統計學意義（P＞0.05）。

2.3 激發后各組誘發3級哮喘發生率的比較 在激發第4、7天，與空白組比較，其余各組的3級哮喘發生率明顯增高，差異有統計學意義（P＜0.01）；固本止哮方高、低劑量組、固本咳喘膠囊對照組的3級哮喘發生率明顯低于模型組，差異有統計學意義（P＜0.05）；固本止哮方高、低劑量組的3級哮喘發生率低于固本咳喘膠囊對照組，差異無統計學意義（P＞0.05）。固本止哮方高、低劑量組3級哮喘發生率比較差異無統計學意義（P＞0.05）。見表3。

表3 激發后各組誘發3級哮喘發生率的比較［n（%），n＝12］

3 討論

固本止哮方由黃芪、五味子、炒白術、烏梅、防風、銀柴胡、補骨脂、女貞子、何首烏、炙甘草等組成，是導師張士卿根據中醫基礎理論在玉屏風散和過敏煎的基礎上，結合現代藥理研究和多年臨床經驗，精心篩選其相關藥物化裁而成。導師認為：哮喘的病變部位主要在肺、脾、腎三臟，小兒肺臟嬌嫩，脾常不足，腎常虛，而人體水液的正常代謝由肺脾腎三臟完成，肺為水之上源，通調水道，脾胃為水谷之海主運化水谷精微，腎者水臟，主津液，若三臟功能失調，則水液代謝障礙，痰濁內生（與現代過敏學說有關），成為哮喘之夙根。其病機主要為正虛痰伏，邪阻肺絡，遇感外邪而觸發。治療上主張扶正為主，兼以祛邪。

玉屏風散由黃芪、白術、防風3味中藥組成，主治表虛衛陽不固所致的體虛易感風邪者，前兩味藥，以扶正為主，而防風則以祛邪為主，它可以提升患兒的“正氣”以抵御外邪，補脾實衛，益氣固表止汗，被稱為“中藥免疫調節劑”。現代藥理研究證實：黃芪、白術能提高免疫球蛋白，促進抗體產生，促進體液免疫，對B淋巴細胞免疫功能具有明顯的增強作用且對多種細菌有抑制作用。防風大分子多糖為水提液的主要成分，具有明顯增強機體免疫功能的作用。

過敏煎是祝諶予名老中醫之驗方，由銀柴胡、防風、烏梅、五味子、甘草5味藥組成。該方具有御衛固表、抗過敏的功效。銀柴胡、防風發散表邪，祛風解痙，烏梅、五味子收斂肺氣，止咳平喘，一散一收，調節肺氣，頗合肺的呼吸出入功能。現代藥理研究證實：銀柴胡具有抗炎解熱作用，五味子能抑制肥大細胞脫顆粒，有拮抗炎性介質，抗變態反應，止咳祛痰作用。烏梅有增強機體免疫力，抗過敏作用，甘草能預防支氣管哮喘的發作。

補骨脂、女貞子、何首烏：滋補肝腎，強壯腰膝，納氣平喘。現代藥理研究證實：補骨脂能提高巨噬細胞的吞噬能力，提高機體非特異性免疫的能力。女貞子能增強免疫功能對炎癥有明顯的抑制作用。何首烏中提取的大黃酚，能促進腸管的運動，并能驟減神經的時值，促使神經興奮，增加肌肉時值，使肌肉麻痹，起到解痙作用。無論從藥物配伍還是從單味藥性上研究，固本止哮方都具有提高機體免疫力，參與免疫調節、抵抗變態反應的作用，故可防治過敏性哮喘。

本實驗結果表明：（1）用藥灌胃預防后，大鼠引喘潛伏期均延長，且固本止哮方高、低劑量組與哮喘模型組比較均有意義。（2）大鼠首次與1%卵白蛋白氣霧接觸：固本止哮方高、低劑量組與哮喘模型組比較哮喘等級明顯降低。（3）在激發第4、7天，固本止哮方高、低劑量組與哮喘模型組比較3級哮喘發生率明顯減低。故通過對固本止哮方實驗研究發現：固本止哮方具有延長大鼠引喘潛伏期，降低哮喘發生率及哮喘程度作用，能夠較好的防治幼齡大鼠哮喘。

［1］陳撅珠.實用內科學［M］.11版.北京：人民衛生出版社，2002：1556.

［2］Shimojo N，Kohno Y，Katsuki T，et al.Diminished interferon－gamma（IFN－gamma）production by bacterial antigen－specific T cells in atopic patients［J］.Clin Exp Immunol，1996，106（1）：62－66.