鼻咽癌患者EB病毒檢測的臨床意義

陳瑜萍，阮輝，肖志勇

（1.福建省福州市第二醫(yī)院耳鼻喉科，福建 福州 350007；2.福建省福州市第二醫(yī)院檢驗科）

鼻咽癌在我國東南地區(qū)是一種常見惡性腫瘤，其發(fā)生被證實與EB病毒感染密切相關。EB病毒（epstein－barr virus，EBV）是一種γ皰疹病毒，目前已有令人信服的證據(jù)支持EB病毒是鼻咽癌重要的致病因子，肯定參與鼻咽癌的多階段、多因素發(fā)生過程［1］。被病毒感染的細胞具有EBV的基因組，并可產(chǎn)生各種抗原及相應的抗體。對EB病毒各種抗原抗體及EBV－DNA檢測一直是鼻咽癌篩查、輔助診斷和監(jiān)測病情變化的主要生物學方法［2］。本研究旨在對確診為鼻咽癌患者放療前后血漿中EBVVCA－IgA、EBV－EA－IgA、EBV－DNA的檢測結果進行對比，從而對鼻咽癌放療后的療效及預后判斷進行探討。

1 資料和方法

1.1 臨床資料

我科自1998年至2010年收集鼻咽癌患者76例，均經(jīng)病理診斷為低分化鱗癌，其中男性47例，女性29例，年齡18－73歲。

1.2 試劑和儀器

VCA－IgA酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）檢測試劑盒（北京貝爾生物工程有限公司）；EA－IgA酶聯(lián)免疫吸附法檢測試劑盒（德國IBL International GMBH公司）；EB病毒核酸擴增聚合酶鏈反應（PCR）熒光檢測試劑盒（中山大學達安基因股份有限公司）；EL－808半自動酶標測試儀；德國Roche LightCybler實時熒光定量基因擴增系統(tǒng)。

1.3 方法

放療前均通過酶聯(lián)免疫吸附法檢測患者血清VCA－IgA和 EA－IgA，PCR法（FQ－PCR）定量檢測患者血漿中EBV－DNA，實驗操作均按試劑盒要求。并進行電子鼻咽鏡檢查，鼻咽部CT掃描（包括顱底骨質和全頸部），胸部X光片，腹部B超檢查。放療總劑量一般為7 000cGy，每周5次，每次200cGy，分7周完成。如診斷為N2期及以上淋巴結轉移，則同步行化療。放化療后3個月復查上述實驗室指標及一系列影像學檢查，比較放療前后EBV－VCAIgA、EBV－EA－IgA 和 EBV－DNA 的變化及與臨床情況對比。

2 結果

根治性治療后3個月復查 EBV－VCA－IgA、EBV－EA－IgA和EBV－DNA結果如表1。76例中，放療前VCA－IgA陽性71例，陰性5例；治療后陽性69例，陰性7例。EB－EA－IgA放療前陽性68例，陰性8例；治療后陽性者64例，陰性12例。以上兩種指標治療前后陽性率變化經(jīng)統(tǒng)計學檢驗無明顯顯著差異（P＞0.05），但兩種指標陽性抗體滴度都較治療前有明顯下降。放療前EBV－DNA檢測陽性者60例，陰性者16例；治療后陽性者11例，陰性者65例。治療后陽性率明顯下降，經(jīng)統(tǒng)計學檢驗差異有顯著意義（P＜0.01）。11例檢出陽性者中2例證實為遠處轉移，8例為臨床復發(fā)，故其腫瘤進展陽性預測值為90.9%，其中10例腫瘤進展者EBV－DNA水平在放療前就高于其他患者。在65例陰性患者中，共有3例遠處轉移，8例復發(fā)，故陰性預測值為83.1%。64例患者血漿EBV DNA水平與臨床結果相符，故準確率為84.2%。

表1 鼻咽癌患者放化療前后EB－VCA－IgA，EB－EA－IgA及EBV－DNA檢測結果（例）

3 討論

EB病毒與鼻咽癌的發(fā)生、發(fā)展密切相關，EB病毒感染人體，在裂解期病毒基因完全表達，細胞主要合成早期細胞內抗原（early intracellular antigen，EA）、衣殼抗原（EB virus capsid antigen，VCA）等。大量文獻報道，聯(lián)合檢測EBV－VCA－IgA、EBV－EAIgA抗體水平對鼻咽癌具有診斷意義［3］。EB病毒僅能在B淋巴細胞中增殖，以環(huán)狀DNA形式游離在胞漿中，并整合于染色體內。隨著PCR技術的推廣，血漿中EBV－DNA水平檢測也廣泛運用于鼻咽癌早期診斷、預后判斷、療效監(jiān)測和臨床分期等。本研究通過檢測上述3項指標，檢測結果進行對比，從而對鼻咽癌放療后的療效及預后判斷進行探討。

從結果觀察到，放療前后 EBV－VCA－IgA、EBV－EA－IgA陽性率變化無明顯差異，提示此兩項陽性率指標對療效觀察不敏感，可能是由于兩種抗體在人體內的半衰期較長，即使體內EBV清除后，仍有較長時間維持在較高濃度，因此發(fā)生質變即轉陰仍不明顯。但其陽性抗體滴度較治療前有較明顯下降，此與曾希等［4］的研究結果相似。可間接提示，隨著治療進行與病灶的縮小，EB病毒EBV－VCAIgA、EBV－EA－IgA抗體滴度逐漸下降，有著量變的過程，也間接提示 EB病毒 EBV－VCA－IgA、EBVEA－IgA與治療過程呈一定相關性。

從結果觀察到，EBV－DNA治療前后陽性率有明顯變化，提示該指標對療效觀察敏感。本實驗中，經(jīng)過治療，EBV－DNA陽性率由78.9%轉為14.5%，迅速轉陰，提示隨著治療腫瘤縮小及清除，EB病毒也隨之清除，體現(xiàn)在EBV－DNA水平迅速下降轉陰，故EBV－DNA對監(jiān)測鼻咽癌放療后療效存在價值。64例患者血漿EBV－DNA水平與臨床結果相符，準確率為84.2%，提示其不失為一個判斷療效及腫瘤進展情況較可靠的指標。11例放療后陽性患者中被證實為復發(fā)及轉移者10例，腫瘤進展陽性預測值為90.9%，故放療后仍為陽性者提示腫瘤進展可能性極大，預后不良。應該進行更全面的臨床和影像學檢查，可縮短隨訪的間隔時間，進行更加密切的隨訪。65例陰性患者中有11例腫瘤進展，陰性預測值為83.1%，提示放療后轉陰患者仍有腫瘤復發(fā)及進展的可能，仍需定期隨訪，以防止漏診。

鼻咽癌臨床分期是影響其預后的主要因素，鼻咽癌患者血清中EB病毒分子水平與腫瘤的分期和臨床進展有明顯相關性［5］。通過檢測治療前后EBV－DNA水平發(fā)現(xiàn)，預后越差者其EBV－DNA水平越高。本研究也進一步證實了鼻咽癌患者血漿EBV－DNA可以準確反應腫瘤負荷［6］，并隨著腫瘤的清除而迅速下降至檢測極限值以下［7］。因此，從理論上講鼻咽癌治療后血漿中檢測出EBV－DNA提示腫瘤復發(fā)或遠處轉移，本次研究結果與此相符。

總之，鼻咽癌放療后患者血漿EBV－DNA是監(jiān)測腫瘤進展的有效方法，有利于早期診斷復發(fā)和轉移，并采取臨床干預措施。

［1］潘孝彰.新發(fā)傳染病［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2004：59－61.

［2］季明芳，郭媛卿，梁錦勝，等.鼻咽癌患者發(fā)病前后EB病毒VCA／IgA和EA／IgA滴度動態(tài)分析［J］.中華腫瘤雜志，2003，25（3）：243－245.

［3］陳云，劉根焰，姚堃，等.定量檢測EB病毒 VCA－IgA和 EAIgA抗體對EB病毒相關鼻咽癌的診斷意義［J］.南京醫(yī)科大學學報（自然科學版），2009，29（12）：1638－1642.

［4］曾希，曾穎，王承龍.33例鼻咽癌患者治療前后血清EB病毒VCA－IgA跟蹤分析［J］.南華大學學報：醫(yī)學版，2010，38（1）：62－64.

［5］胡春卉，李山.EB病毒診斷方法研究進展［J］.腫瘤學雜志，2010，16（1）：78－80.

［6］Lin JC，Wang WY，Chen KY，et al.Quantification of plasma Epstein－Barr virus DNA in patients with advanced nasopharyngeal Carcimoma［J］.N Engl 1Jmed，2004，350（24）：2461－2470.

［7］Lo YM，Leung SF，Chan LYS，et al.Kinetics of plasma Epstein－Barrvirus DNA during radiation therapy for nasopharyngeal carcinoma ［J］.Cancer Res，2000，60（9）：2351－2355.