四川省工作犬心絲蟲感染率的調查

葉青華，陳 濤

（1.成都農業科技職業學院，四川 成都 611130；2.成都美寶畜禽研究所，四川 成都 610066）

犬心絲蟲病又名犬惡絲蟲病，是由絲蟲科惡絲蟲屬的絲蟲成蟲寄生于犬的右心室、肺動脈（少見于胸腔、支氣管）內，導致犬循環系統、呼吸系統、泌尿系統等遭受損害，引起循環障礙、呼吸困難及貧血等臨床癥狀的一種寄生蟲病。成蟲雌蟲產出的幼蟲——微絲蚴進入并寄生在犬外周血液中，當蚊蟲等中間宿主在患犬身上吸血時，微絲蚴就進入到蚊蟲體內，并逐漸發育成具有感染性的幼蟲。當正常犬被含有微絲蚴的蚊蟲叮咬時，微絲蚴就順著吻管進入到犬體內，這樣正常犬只就被感染。

本次試驗首次在大陸地區使用商品化的犬心絲蟲ELISA快速檢測試劑盒進行檢測，在早期臨床診斷和預防上具有重大意義。該病初期沒有臨床癥狀，但會逐漸導致犬的運功能力及生理機能下降，這對工作犬而言是至關重要的，特別是防爆犬、追蹤犬，工作能力的下降就預示著該犬應被淘汰，而工作犬特別是警犬的選育及訓導需要花費大量的人力物力，犬只的淘汰對公安機關和廠礦企業的損失很大。目前，四川省內工作犬、伴侶犬的心絲蟲病流行狀況還未見報道，人們對此病沒有引起重視，筆者所調查的工作犬全部沒有采取過預防措施。而該病如果已有大量成蟲感染，則預后不良，嚴重的死亡率可達50%。因此，筆者就四川省工作犬心絲蟲的感染率進行了跟蹤調查。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

1.1.1 血樣采集 在四川省采集成都、德陽、綿陽、樂山、宜賓、阿壩六地共128只工作犬（包括警犬和護衛犬）的血樣。犬種包括德國牧羊犬、拉布拉多犬、馬林諾斯犬、昆明犬、羅威納犬、史賓格犬、藏獒，年齡從8月齡到7歲半不等，在下午5點～9點之間進行前肢靜脈采血。犬只具體狀況如表1所示。

表1 試驗犬只來源及數量

1.1.2 試劑 血液稀釋液：從韓國Animal Genetics公司購入，批號 1102026。

ELISA心絲蟲快速檢測試劑盒（Anigen Rapid Heartworm Ag Test Kit）：批號 1102026，從韓國Animal Genetics公司購入。

1.1.3 試液 0.1%美藍染色液：精確稱取1g分析純美藍放入250mL容量瓶中，加入蒸餾水至刻度即得。用于犬心絲蟲微絲蚴的染色。

2%甲醛固定液：精確量取分析純甲醛5mL放入250mL容量瓶中，加蒸餾水至刻度即得。用于犬微絲蚴的固定。

1.1.4 儀器 離心機：上海手術器械廠生產；顯微鏡：日本奧林巴斯公司生產；泡沫低溫箱：自備。

1.2 試驗方法

1.2.1 ELISA快速檢測法 將快速檢測試劑盒以及已放入2滴抗凝劑的試管編號，并與即將采血的犬只相對應。每只犬采集2mL前肢靜脈血放入試管內混勻，馬上滴30μL（使用專用一次性滴管）左右全血在試劑盒檢測孔內，再滴入專用稀釋液3滴（90μL），放置于桌面上，5～10min后觀察結果。試驗結果見表2。

表2 ELISA試劑盒檢測犬心絲蟲的結果 只

1.2.2 改良Knott′s法 將靜脈采集的剩余血液放入低溫泡沫箱中保存，再返回實驗室，取1mL血樣加入2%福爾馬林9mL充分混合，以2500r/min離心20min，棄上清液，將沉淀1滴與0.1%美藍1滴染色后加蓋玻片鏡檢，低倍鏡下發現微絲蚴，轉至高倍鏡下檢查。結果見表3。

表3 改良Knott′s法檢測犬心絲蟲的結果 只

2 結果與分析

通過對128頭工作犬的血樣用改良Knott′s法進行檢測，結果發現有7頭犬的微絲蚴檢測為陽性，而通過ELISA快速檢測試劑盒檢測到的陽性犬只有26只。ELISA快速檢測試劑盒的敏感度為96%,準確率為100%；而Knott′s法的準確率為100%，但敏感度很低，以ELISA檢測的陽性數量計，其敏感度僅為28.04%，可能與血液采集時間有很大的相關性。

通過分析得知，犬年齡在5歲以上的感染率相對較高，達53.85%，2～5歲犬次之，感染率為23.33%，8月齡～2歲犬感染率最低，為9.09%。成都地區的感染率為20.75%，其中2～5歲犬感染率為22.22%，5歲以上犬感染率為40.00%；樂山地區的感染率為20.00%，其中2～5歲犬感染率為0%，5歲以上犬感染率為100%；德陽地區的感染率為18.75%，其中2～5歲犬感染率為25.00%，5歲以上犬感染率為50.00%；綿陽地區的感染率為21.88%，其中2～5歲犬感染率為28.57%，5歲以上犬感染率為66.67%；宜賓地區的感染率為20.00%，其中2～5歲犬感染率為33.33%，5歲以上犬感染率為50.00%；阿壩地區的感染率為0。

3 結論與討論

從試驗結果看，除阿壩州外其余地區的感染率沒有差異。阿壩州氣溫低而日照強烈，7月的平均氣溫為11～17℃，全年無霜期少于90d，該地區基本不適合傳播媒介的生存，因此其感染率為0屬于正常，與該病的流行病學特點相符合。

該試驗結果與楊鋒在簡陽地區的試驗結果（感染率為80%）和饒忠秀在重慶壁山的試驗結果（感染率為61.12%）相差比較大，分析其原因主要有：

（1）ELISA快速檢測試劑盒是通過雌性成蟲制作抗原進行檢測的，如果犬只僅單獨感染雄性成蟲，則其檢測結果為陰性。

（2）其他兩次試驗檢測的都是農村家犬，其生活環境相對比較惡劣，蚊蟲較多，感染的機率較大。而本次試驗的試驗動物全部為警犬和護衛犬，所有犬只均有專門的犬舍，也有專門的訓導員進行護理，衛生狀況非常好，因此其感染幾率相對較低。

（3）其他兩次試驗均沒有進行犬只年齡的劃分，只是進行籠統計算；而本次試驗的犬只均有年齡檔案，嚴格進行了年齡劃分，因而5歲以上的犬只與文獻報道的兩次試驗結果相對接近。

四川西面是高原，氣溫低而日照強烈，7月的平均氣溫為11～17℃，全年無霜期少于90d，該地區基本不適合傳播媒介的生存。攀西地區1月氣溫8～13℃，7月平均氣溫22～26℃，無霜期達 250～280 d，年降水量1 000mm，該地區氣溫適宜，但濕度偏小。四川盆地屬于亞熱帶濕潤季風氣候，比同緯度的長江中下游偏高2～4℃，具有冬暖、春早、夏熱、濕度大、云霧多、日照少、霜雪少、晝夜溫差小等特點，1月平均氣溫3～8℃，7月平均氣溫 25～39℃，全年無霜期 280～340 d，年降水量800～1200mm；西部峨眉、雅安一帶受地形影響，雨量豐富，年降水量達1 800 mm，這個區域是非常適合傳播媒介生存的地方，其代表區域是成都。成都市年平均氣溫16.2℃，年極端最高氣溫37.3℃，年極端最低氣溫為-5.9℃，最熱時間出現在7～8月，月平均氣溫為25.4℃，最冷出現在1月，穩定通過20℃的初終日期為5月下旬，通過10℃的初終日期為3月中旬到下旬。這種氣候條件下，傳播媒介從4月就開始出現，到10月中旬左右才會消失。從氣象資料和文獻報道并綜合此次試驗結果進行分析，四川盆地確實是犬心絲蟲病的流行區域。1990年以前，四川盆地內的犬只與盆地外的流動幾乎沒有，1992年以后流動雖然增大，但也只局限在中等以上城市。四川盆地內農村家犬之所以有如此高的感染率，其外來因素基本可以排除，主要原因還是在于本地犬只相互感染。

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[4]饒忠秀，張富南，葉紅.重慶市璧山縣家犬的犬惡絲蟲感染調查[J].四川動物，1999，18（2）：54.