鴨瘟病毒研究進(jìn)展

徐曉娟綜述 郭霄峰 魏平華審閱（華南農(nóng)業(yè)大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院 廣州 5064 廣州格雷特生物科技有限公司 廣州 50730）

鴨瘟（Duck Plague,DP），又名鴨病毒性腸炎（（Duck Virus Enteritis,DVE），是鴨、鵝和其他雁形目禽類的急性、熱性和敗血性傳染病，是目前對(duì)世界范圍內(nèi)水禽養(yǎng)殖業(yè)危害較為嚴(yán)重的疫病之一[1]。該病已被世界動(dòng)物衛(wèi)生組織認(rèn)定為B類傳染病，我國(guó)動(dòng)物防疫法也將其列入二類動(dòng)物疫病[2]。荷蘭學(xué)者Baudet[3]于1923年首次發(fā)現(xiàn)該病后，其流行范圍逐步擴(kuò)大，相繼在法國(guó)(1949)、美國(guó)(1950)、印度(1963)、比利時(shí)(1964)、英國(guó) 1972)、泰國(guó)(1976)和加拿大(1976)被發(fā)現(xiàn)。1957年，黃引賢在我國(guó)廣州報(bào)道發(fā)現(xiàn)了鴨瘟。1957～1965年，本病廣泛流行于我國(guó)南部、中部和東部的一些養(yǎng)鴨業(yè)較為發(fā)達(dá)的省市[4]，1983年廖德惠報(bào)道了四川省存在鴨瘟，并且分離到鴨瘟病毒。至今，全國(guó)各地均有本病的報(bào)道。目前，鴨瘟仍然是阻礙我國(guó)養(yǎng)鴨業(yè)發(fā)展的重要傳染病之一。

1 鴨瘟病毒基本特性

DP的病原是鴨瘟病毒（DPV），又名鴨病毒性腸炎病毒（DEV），屬皰疹病毒科、皰疹病毒亞科，也稱鴨皰疹病毒Ⅰ型(Duck hcrpcsivirusⅠ)[5]，是一種泛嗜性全身性感染的病毒。

DPV為線性雙鏈DNA病毒，成熟病毒粒子直徑150～380nm，呈球形，有囊膜，在CsCl中浮密度為1.272g/mL，無血凝特性和血細(xì)胞吸附作用。除有芯髓、衣殼、囊膜等常見結(jié)構(gòu)外，在衣殼和囊膜間還有皰疹病毒所特有的皮層成分[6]。DPV各毒株在毒力上存在差異，但在免疫學(xué)特性上卻是相同的，迄今為止，只發(fā)現(xiàn)一種血清型。該病毒對(duì)熱、pH及脂溶劑（乙醚、氯仿等）均較敏感，56℃10 min會(huì)喪失感染力，80℃5 min即可死亡，在pH3和pH11的環(huán)境下也很快被滅活[7]。

2 鴨瘟病毒粒子結(jié)構(gòu)

DPV完整的病毒粒子由芯髓 (core)、衣殼（capsid)、囊膜（envelope）及衣殼和囊膜間的皮層結(jié)構(gòu)（又稱外膜）所組成。病毒芯髓由蛋白與雙股DNA纏繞而成，在衣殼內(nèi)致密排列，直徑約為35～40nm，也有報(bào)道稱為74nm。衣殼為對(duì)稱二十面體，表觀呈現(xiàn)正六角形，它由162個(gè)相互連接呈放射狀排列且有中空軸孔的殼粒組成，是皰疹病毒最重要的形態(tài)特征。芯髓與衣殼一起被稱為核衣殼或裸露的病毒子，直徑約為95～105nm。核衣殼穿過宿主細(xì)胞核膜進(jìn)入胞漿或其空泡中，外面包上一層由蛋白質(zhì)組成的皰疹病毒所特有的皮層成分，最后繞以囊膜形成成熟的病毒子。余克倫[7]等在電鏡下觀察純化的DPV直徑為184nm,核衣殼直徑92nm,而芯髓在衣殼內(nèi)排列致密，直徑為74nm，衣殼外包有明顯的囊膜，還可見到多量的囊膜融合的雙病毒顆粒和四病毒顆粒。2008年，郭宇飛等[8]的電鏡負(fù)染觀察結(jié)果表明，病毒粒子呈圓形,多數(shù)直徑為150 nm左右,只有1個(gè)核衣殼,少數(shù)病毒粒子直徑可達(dá)300 nm,有2個(gè)或多個(gè)核衣殼。

3 鴨瘟病毒的裝配與釋放

經(jīng)研究報(bào)道，DPV可在9～14日齡鴨胚中生長(zhǎng)繁殖，并引起胚胎死亡。病毒在鴨胚生長(zhǎng)適應(yīng)以后還可感染雞胚和雞胚成纖維細(xì)胞，產(chǎn)生蝕斑并形成核內(nèi)包涵體。DPV還可在成纖維傳代細(xì)胞系CCL-141中生長(zhǎng)并具有蝕斑易于觀察的特點(diǎn),但病毒產(chǎn)量較原代細(xì)胞少5.6倍[32]。有研究報(bào)道，1株DPV弱毒接種鴨胚成纖維細(xì)胞后，對(duì)其生長(zhǎng)情況進(jìn)行的研究結(jié)果表明，接毒后4 h可在胞內(nèi)檢測(cè)到DPV，在48h病毒滴度達(dá)到最高；接毒后6～8 h可在胞外檢測(cè)到DPV，在60h病毒滴度達(dá)最高，病毒在細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制周期為6～8 h，成熟病毒子的釋放與細(xì)胞發(fā)生病變的時(shí)間相一致。丁明孝[9]的研究結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)，DPV DNA的合成是持續(xù)進(jìn)行的，被感染細(xì)胞中，病毒DNA的復(fù)制與殼體的裝配，病毒粒子的成熟與釋放是同時(shí)進(jìn)行的。對(duì)DPV弱毒株在雞胚成纖維細(xì)胞中的成熟和釋放方式進(jìn)行研究發(fā)現(xiàn)，DPV獲得囊膜的方式有2種:一是核衣殼可通過空泡出芽的方式獲得囊膜；二是在核內(nèi)依靠膜物質(zhì)在核衣殼周圍積累而獲得囊膜。深入研究結(jié)果表明，DPV存在2種裝配方式:（1）病毒核衣殼進(jìn)入宿主細(xì)胞后，在核內(nèi)獲得皮層蛋白，部分核內(nèi)膜形成囊膜從而成為成熟病毒子，稱為胞核裝配方式；（2）核衣殼通過內(nèi)外核膜進(jìn)入胞漿，在其中獲得皮層蛋白，然后通過向高爾基體或者內(nèi)質(zhì)網(wǎng)腔出芽釋放時(shí)獲得囊膜形成成熟病毒子釋放到細(xì)胞外，稱為胞漿裝配方式[10,11]。前者是DEV核衣殼主要的裝配方式。但是，翟中和等[12]通過大量的觀察和應(yīng)用電子顯微鏡放射自顯影技術(shù)，證明了DPV第二種裝配方式的存在，即在細(xì)胞質(zhì)內(nèi)的裝配過程。其后丁明孝[9]也觀察到DEV在細(xì)胞質(zhì)中的成熟過程。DEV的復(fù)制過程，特別是在病毒復(fù)制的前期階段，比如基因的轉(zhuǎn)錄、蛋白合成以及DNA復(fù)制等仍然缺乏詳細(xì)的資料。

4 鴨瘟病毒基因組結(jié)構(gòu)及分子生物學(xué)研究

4.1 DPV 基因組結(jié)構(gòu)

DPV的DNA與其他α-皰疹病毒基因組結(jié)構(gòu)相似，整個(gè)基因組由 UL（unique long）區(qū)和 US(unique short)區(qū)組成，中間有 IR（internal repeat）區(qū)相隔，兩端有 TR（terminal repeat）區(qū)相連。Ying Wu 等[13]對(duì) DPV CHv株全基因組測(cè)序結(jié)果表明，該株DPV基因組全長(zhǎng)由162175個(gè)核苷酸組成，G+C含量為44.89%，與之前報(bào)道的DPV基因組G+C含量64.3%不同。該毒株5’UTR長(zhǎng)為5685bp，包含25個(gè)TATA盒、8個(gè) CAAT盒、8個(gè) poly(A)尾和 1個(gè) GC盒，而 3’UTR則分別包含3個(gè)TATA盒、13個(gè)CAAT盒、4個(gè)poly(A)尾和7個(gè)GC盒，一般認(rèn)為它們均在一定程度上調(diào)控基因的轉(zhuǎn)錄水平。同時(shí)，3’UTR擁有7個(gè)串聯(lián)重復(fù)序列，其長(zhǎng)度達(dá)到40nt，可定義為小衛(wèi)星。

4.2 DPV分子生物學(xué)研究

相對(duì)于皰疹病毒科其他成員，人們對(duì)DPV基因組的研究起步較晚。1998年，Plummer等用HindⅢ消化DPV得到約1.95kb的DNA片段，對(duì)該片段測(cè)序分析結(jié)果表明，該片段與水痘帶狀皰疹病毒（Varicella-zoster virus，VZV）的 UL6 和 UL7 部分基因同源[14]。隨后，Hansen等[15]報(bào)道了DPV UL30基因的部分序列。2002年，郭霄峰的研究表明:DPV的UL6和UL7基因在不同毒株中高度保守[16]。隨著對(duì)DPV基因組結(jié)構(gòu)的深入研究，多個(gè)DPV基因現(xiàn)已被成功克隆并進(jìn)行了序列分析。韓先杰等[17]利用兼并PCR的方法成功克隆了DEV完整的TK、gH、UL24基因和UL25、UL26基因的部分序列，同時(shí)實(shí)現(xiàn)了gH部分基因、UL24及TK基因在大腸桿菌內(nèi)的表達(dá)；并首次以DEV TK基因作為同源重組的區(qū)域，將LacZ基因表達(dá)盒插入TK基因內(nèi)構(gòu)建鴨瘟病毒轉(zhuǎn)移載體，為以鴨瘟病毒為載體構(gòu)建重組鴨瘟病毒活載體疫苗創(chuàng)造了條件。文明[18]等應(yīng)用鳥槍法成功構(gòu)建了DPV基因文庫(kù)，獲得大于100bp的ORF共187個(gè)，首次克隆并鑒定了DPV的核衣殼蛋白基因。陳淑紅[19]、高亞東[20]等研究者應(yīng)用靶基因步移PCR法分別獲得DPV部分基因的完整ORF，研究結(jié)果均指向DPV應(yīng)歸類為α-皰疹病毒亞科的馬立克氏病病毒屬。李陽(yáng)[21]分別以DPV UL35、UL50和SORF3部分基因?yàn)槠唿c(diǎn)設(shè)計(jì)引物，擴(kuò)增出DPV基因組未知序列UL36、UL51～UL55、US2 和 US3。Yan Zhao 等獲得了 DPV US10、US2、US3、US4和US5并對(duì)這些基因進(jìn)行了分子水平上的分析，認(rèn)為DPV與α-皰疹病毒亞科的同源關(guān)系最近。

隨著基因組序列的深入研究，相關(guān)基因的功能研究也逐漸開展起來。李慧昕表達(dá)了UL27基因中段UL27-MHE UL6基因的UL6-1和UL6-2兩段，應(yīng)用Western Blotting和間接免疫熒光方法進(jìn)行了檢測(cè)，并制備了針對(duì)UL19-C段蛋白的單克隆抗體，擬對(duì)UL19抗原表位進(jìn)行初步定位。潘華奇以純化的重組gB1蛋白作為包被抗原，初步建立了檢測(cè)鴨瘟病毒抗體的igB1-ELISA。孫濤等對(duì)DPV UL6基因B細(xì)胞表位進(jìn)行了預(yù)測(cè)以及對(duì)其主要抗原域進(jìn)行了原核表達(dá)，以兔抗DPV多克隆抗血清進(jìn)行Western Blotting分析，多抗血清可與該融合蛋白發(fā)生特異性反應(yīng)。劉峰源對(duì)不含信號(hào)肽部分的gC基因胞外區(qū)進(jìn)行了原核表達(dá)，并證明了糖蛋白gC上含有中和抗原表位并且能夠刺激機(jī)體的細(xì)胞免疫。金映紅［21］將DEV gH蛋白切除信號(hào)肽和跨膜區(qū)而保留抗原區(qū)的截?cái)嗟鞍撰@得有效表達(dá)，且重組蛋白能與疫苗免疫的DEV陽(yáng)性血清發(fā)生特異性反應(yīng)，具有較好的抗原反應(yīng)原性，采用以此表達(dá)產(chǎn)物作為抗原建立DEV的血清學(xué)檢測(cè)方法和研究DEV感染過程中g(shù)H的作用研究奠定了基礎(chǔ)。李子劍將綠色熒光蛋白插入到DPV基因TK、US2、US1和US10，證明這四個(gè)基因?yàn)镈PV復(fù)制非必需區(qū)[22]。

5 分子生物學(xué)診斷方法

隨著現(xiàn)代分子生物學(xué)的迅速發(fā)展，鴨瘟病毒的診斷已經(jīng)從傳統(tǒng)的診斷方法過渡到如今的分子生物學(xué)方法。目前主要利用抗原抗體反應(yīng)和分子檢測(cè)方法對(duì)該病作出正確診斷[23]。

現(xiàn)代分子生物學(xué)方法包括聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）、微量固相放射免疫試驗(yàn)(Micro-SPRIA)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）、間接免疫熒光試驗(yàn)（IFA）和斑點(diǎn)雜交(Dot-hybridization)等。近來，郭宇飛等[9]建立了用電鏡負(fù)染檢測(cè)鴨瘟病毒的方法。隨后，Renyong Jia[24]等建立了有效檢測(cè)鴨瘟病毒UL24蛋白的抗原捕獲酶聯(lián)免疫吸附法(AC-ELISA)，Chanjuan Shen[25]等又研制出檢測(cè)鴨瘟病毒的免疫膠體金層析試紙條。

PCR檢測(cè)DPV方法的建立，是在成功獲得了DPV部分保守基因片段核酸序列的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，Plummer等［14］于 1998年首次成功利用該方法檢測(cè)到鴨瘟病毒(DPV)DNA，并且確定了PCR的最低檢測(cè)量為1fg，整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程僅需36～48h。隨著研究者們的深入研究，目前，應(yīng)用該方法能夠檢測(cè)到1pg[26]甚至0.1pg[27]的病毒DNA，并且檢測(cè)時(shí)間縮短至12h。2006年，湯承等[28]開發(fā)成功的SYBR GreenⅠ實(shí)時(shí)定量PCR(real-time PCR)檢測(cè)技術(shù)將檢測(cè)時(shí)間縮短至3h,對(duì)本病的快速診斷具有極其重要的作用。該方法由于其敏感、特異、簡(jiǎn)便和快速等特點(diǎn)，對(duì)于隱性帶毒狀態(tài)禽類的檢測(cè)具有重要意義，目前已有應(yīng)用該方法對(duì)鴨群進(jìn)行檢疫的報(bào)道[29]。但是，PCR檢測(cè)方法需要較昂貴的儀器和試劑，并且在進(jìn)行血液檢測(cè)時(shí)，偶爾會(huì)出現(xiàn)嚴(yán)重的拖尾現(xiàn)象，影響結(jié)果的判斷，此外，還要求獸醫(yī)工作者具有良好的操作技能，因此，該方法不適宜在基層推廣。

微量固相放射免疫試驗(yàn)（Micro-SPRIA）的原理是抗原抗體結(jié)合反應(yīng),該技術(shù)是利用表面能吸附抗體的塑料或其他材料作為固相載體，用同位素標(biāo)記抗體或抗原，以測(cè)定相應(yīng)抗原或抗體的一種微量檢測(cè)技術(shù)[30]。該技術(shù)廣泛應(yīng)用于各種病原的檢測(cè)，徐耀基等[31]于1992年便開始使用Micro-SPRIA檢測(cè)DPV，該方法可直接檢測(cè)肝、脾、腦及血清等病料，人工發(fā)病48h后陸續(xù)從病鴨、鵝的肝、脾、腦及血清等材料中檢出DPV，其中肝、腦的檢出率為80%，最高可達(dá)到100%。它能夠在感染DPV的鴨鵝剛出現(xiàn)體溫升高特征性癥狀和病變尚未出現(xiàn)之前對(duì)該病進(jìn)行檢測(cè)，適宜發(fā)病早期的診斷。Micro-SPRIA特異性強(qiáng)、敏感性高、快速和經(jīng)濟(jì)，標(biāo)記抗體對(duì)抗原純度要求不高，可廣泛應(yīng)用于微量可溶性抗原、抗體的檢測(cè)，對(duì)疫情監(jiān)測(cè)和交通口岸的鴨檢疫具有重要的應(yīng)用價(jià)值。

ELISA方法用于DPV病原檢測(cè)具有簡(jiǎn)便、快速、敏感、特異等優(yōu)點(diǎn),能在臨床癥狀出現(xiàn)之前從肝、脾、糞便和血液中檢出DPV,采集的病料只需經(jīng)過勻漿、凍融和離心等步驟處理后即可用于檢測(cè),適宜于對(duì)該病的檢疫和早期診斷[32]。目前已有多種商品化的間接ELISA檢測(cè)鴨瘟的試劑盒面市，特別適用于對(duì)大批血清樣品ELISA效價(jià)的檢測(cè)。

抗原捕獲ELISA（AC-ELISA）方法是利用兩種純化后的抗體通過夾心作用捕獲樣品中的相應(yīng)抗原從而達(dá)到檢測(cè)目的的一種方法，該方法快速、敏感、特異及可靠。2009年，Renyong Jia[24]等建立了有效檢測(cè)鴨瘟病毒UL24蛋白的抗原捕獲ELISA方法，該方法建立在重組DPV UL24蛋白多克隆抗體的基礎(chǔ)上，對(duì)人工感染的病鴨血清進(jìn)行檢測(cè)，最低檢出量為46ng/100μL。試驗(yàn)結(jié)果表明，AC-ELISA能特異性檢測(cè)到DPV，并且與其他病毒或菌株無交叉反應(yīng)性，對(duì)鴨病毒性肝炎病毒（DHV）、鴨乙型肝炎病毒（DHBV）、小鵝瘟病毒(GPV)、鴨疫里默氏桿菌（R.A.）、大腸桿菌（E.coli）、巴氏桿菌（P.M.)以及腸炎沙門氏菌（S.E.）的檢測(cè)結(jié)果均為陰性，與PCR和病毒分離試驗(yàn)的陽(yáng)性符合率為100%。AC-ELISA方法能夠短時(shí)間內(nèi)準(zhǔn)確、快速地直接檢測(cè)大批量樣品中的DPV抗原,明顯優(yōu)于病毒分離和免疫熒光等方法，而且具有半自動(dòng)化的特點(diǎn),能自動(dòng)顯示結(jié)果，更適合于各級(jí)獸醫(yī)研究機(jī)構(gòu)和生產(chǎn)單位應(yīng)用。

膠體金免疫層析技術(shù)(Gold immunochromatography assay,GICA)是一種將膠體金標(biāo)記技術(shù)、免疫檢測(cè)技術(shù)和層析分析技術(shù)等多種方法有機(jī)結(jié)合在一起的固相標(biāo)記免疫檢測(cè)技術(shù)。其原理是:以條狀纖維層析材料為固相，通過毛細(xì)作用使樣品溶液在層析條上泳動(dòng)，并同時(shí)使樣品中的待測(cè)物與層析材料上針對(duì)待測(cè)物的受體(抗原或抗體)發(fā)生高特異性、高親和性的免疫反應(yīng)，層析過程中免疫復(fù)合物被富集或截留在層析材料的一定區(qū)域(檢測(cè)帶),運(yùn)用可目測(cè)的標(biāo)記物(膠體金)而得到直觀的實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象(顯色)。2010年，Chanjuan Shen[25]等首次制成檢測(cè)血液樣品中DPV抗體的免疫膠體金快速診斷試紙，試驗(yàn)中，以純化的重組DPV UL51蛋白和羊抗兔IgG作為示蹤標(biāo)記物，對(duì)人工分別感染多種鴨病原微生物的鴨血清進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明，該免疫層析試紙條能夠特異性檢測(cè)到DPV 抗體，對(duì) DHV，R.A.，E.coli，MPV，鴨流感病毒（DIV)的檢測(cè)結(jié)果均為陰性。同時(shí)，將血清樣品按1:128的比例稀釋時(shí)，檢測(cè)結(jié)果仍呈現(xiàn)陽(yáng)性，表明其敏感性高。對(duì)110份DPV陽(yáng)性血清樣品同時(shí)用GICA、ELISA和NT 3種方法進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明，GICA方法的敏感性與ELISA方法相當(dāng)，但遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于血清中和試驗(yàn)（NT），并且該方法經(jīng)濟(jì)、快速（10～15分鐘即可顯示結(jié)果）、易于操作、不需要特殊的儀器設(shè)備。膠體金免疫層析技術(shù)是在酶免疫結(jié)合試驗(yàn)的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的，作為當(dāng)今檢測(cè)病原體敏感的免疫學(xué)技術(shù)之一,不僅操作簡(jiǎn)便、快速、特異,更為重要的是適用于廣大基層單位，并能在現(xiàn)場(chǎng)作檢測(cè)。

6 疫苗研制

目前，對(duì)于鴨瘟尚無特效藥物治療，為防止該病的發(fā)生，鴨場(chǎng)必須建立健全合理的管理制度及衛(wèi)生防疫制度，同時(shí)，在綜合防制的基礎(chǔ)上，重點(diǎn)進(jìn)行疫苗預(yù)防。目前，能用于DP預(yù)防的疫苗分為滅活疫苗和弱毒疫苗兩大類，其中的滅活苗包括臟器滅活疫苗、雞胚滅活疫苗、鴨胚滅活疫苗等，弱毒苗包括雞胚化弱毒疫苗、雞胚化弱毒細(xì)胞疫苗、自然弱毒疫苗等。國(guó)內(nèi)通常使用弱毒疫苗對(duì)鴨群進(jìn)行免疫，認(rèn)為兩類疫苗中弱毒疫苗免疫效果更好，使用弱毒疫苗免疫的鴨體僅產(chǎn)生低水平中和抗體，但受強(qiáng)毒攻擊時(shí)可使鴨體產(chǎn)生明顯的血清記憶反應(yīng)[33]。由于生產(chǎn)需要，一些聯(lián)苗也相繼被開發(fā)出來。程安春等[34]于1997年開發(fā)出來的鴨瘟-鴨病毒性肝炎弱毒二聯(lián)疫苗免疫后對(duì)本病也具有良好的預(yù)防作用，其保護(hù)期可達(dá)9個(gè)月。此外，若種鴨體內(nèi)具有很高的DPV中和抗體水平，其可通過母源抗體傳遞作用使下一代雛鴨獲得對(duì)本病的被動(dòng)免疫保護(hù)，該雛鴨在2日齡和4日齡時(shí)對(duì)攻毒感染可產(chǎn)生完全的抵抗而13日齡時(shí)則產(chǎn)生50%的死亡率,這表明該被動(dòng)免疫很快消退。使種鴨產(chǎn)生高水平中和抗體的方法是將種鴨暴露于自然感染該病的環(huán)境中，因?yàn)閮H靠疫苗接種難以產(chǎn)生足夠水平的中和抗體。Sarmah等[35]報(bào)道，DPV弱毒株接種后18 h尚無保護(hù)作用,24h后即出現(xiàn)70%的攻毒保護(hù)率,推測(cè)疫苗株對(duì)強(qiáng)毒株的免疫干擾作用是該保護(hù)力迅速產(chǎn)生的原因。

目前的DPV弱毒疫苗，都需做肌肉或皮下接種，這對(duì)大群免疫極不方便。因此學(xué)者們都在致力于口服弱毒疫苗的研制。另外，研制鵝用的DEV疫苗也是當(dāng)前的一個(gè)課題。

隨著DNA重組技術(shù)的發(fā)展和利用，基因工程疫苗的研究取得了快速發(fā)展，其中重組病毒活載體疫苗成為當(dāng)前新型疫苗的研究熱點(diǎn)。DPV作為皰疹病毒同樣具有充當(dāng)基因工程疫苗載體的條件，韓先杰等[17]以DEV TK基因作為同源序列成功構(gòu)建了轉(zhuǎn)移載體，為進(jìn)一步構(gòu)建重組病毒活載體疫苗搭建了物質(zhì)平臺(tái)。邢明偉[36]分別構(gòu)建了含有AIV H7 HA和H9 HA基因的重組DPV轉(zhuǎn)移載體，將為重組病毒疫苗的研制奠定基礎(chǔ)。

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